Патент на изобретение №2236684
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РОСТА ЛЕЙОМИОМЫ МАТКИ
(57) Реферат:
Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования роста миомы матки. Сущность изобретения состоит в том, что в периферической крови определяют относительное содержание CD38+ лимфоцитов и при их значениях, равных или больших 23%, прогнозируют быстрый рост миомы матки в течение года. Техническим результатом является создание точного, чувствительного и специфического способа прогнозирования быстрого роста миомы матки. 1 табл. Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования роста миомы матки. Актуальность изобретения определяется высокой частотой встречаемости лейомиомы (в дальнейшем – миомы матки) у женщин старше 30 лет (15-17%). До 80% всех случаев заболевания наблюдается у женщин репродуктивного возраста [4]. У 50% больных имеет место быстрый рост миомы матки, что является показанием к операции. Радикальное вмешательство с удалением матки приводит к потере репродуктивной и менструальной функции. Разработка достоверных критериев прогнозирования темпов роста миомы матки позволит врачу выбрать оптимальную тактику ведения больной и в конечном счете сохранить детородную функцию женщины. Известен метод неинвазивной диагностики морфологического типа миомы матки путем проведения цветного допплеровского картирования (ЦДК), заключающегося в том, что саркома миоматозного узла в отличие от других форм имеет интенсивный характер неоваскуляризации с центральным и периферическим, хаотичным расположением сосудов, низким уровнем резистентности кровотока, что способствует быстрому росту миомы [2]. Недостатки способа: 1) способ основан на дифференциальном диагнозе саркомы матки, тогда как частота малигнизации миомы матки составляет не более 0,8% [6]; 2) способ неспецифичен, т.к. характер внутриопухолевого кровотока при саркомах и пролиферирующей миоме идентичен; 3) данный способ не позволяет прогнозировать темп роста миомы; 4) отсутствуют данные о точности способа. Наиболее близким по техническому решению к заявляемому способу является способ прогнозирования роста миомы матки, заключающийся в том, что в тканях миоматозных узлов, получаемых методом трансцервикальной пункционной биопсии, иммуногистохимическим методом предлагается определять плотность и интенсивность окрашивания рецепторов к прогестерону, и при увеличении этих показателей прогнозируется рост миомы в течение 12 месяцев [9]. Данный способ был выбран нами в качестве ближайшего аналога. Однако он имеет ряд недостатков: 1) плохая воспроизводимость результатов в связи с погрешностями при приготовлении срезов, неоднородным по интенсивности окрашиванием тканей, особенностями микроскопии [1]; 2) высокая инвазивность и травматичность; 3) высокая трудоемкость; 4) авторы не указывают точность, чувствительность и специфичность способа. Указанные недостатки предлагается устранить в заявляемом способе. Заявляемый технический результат достигается тем, что в периферической крови женщин с миомой матки определяют относительное количество CD38+ лимфоцитов и при значениях этого показателя, равном 23% и более, прогнозируют быстрый рост миомы с точностью 75,8% в течение года. Новизна заявляемого способа заключается в том, что впервые предлагается прогнозировать темп роста миомы матки по определению относительного содержания CD38+ лимфоцитов в периферической крови. Ранее показатель содержания CD38+ лимфоцитов определяли в периферической крови часто и длительно болеющих лиц, при этом отмечалось повышение числа лимфоцитов, несущих на своей поверхности данную молекулу [5]. В острый период нейрожелезистой формы паротитной инфекции у больных также было выявлено повышенное содержание CD38+ лимфоцитов в периферической крови [3]. Для прогнозирования темпов роста миомы матки этот показатель ранее не применяли. Известно, что CD38 молекула экспрессируется лимфоцитами на разных этапах их развития. Сначала CD38 молекула появляется на незрелых клетках, потом в процессе созревания и дифференцировки клеток она перестает экспресироваться, но вновь появляется на поверхности лимфоцитов на самых поздних этапах активации [7]. Мы предполагаем, что высокое содержание CD38+ лимфоцитов у женщин с миомой матки связано с увеличением в периферической крови пула незрелых клеток, что может являться следствием нарушения процессов дифференцировки иммунокомпетентных клеток и служить одним из факторов, провоцирующих рост ткани. Способ осуществляется по стандартной методике следующим образом: 1 мл крови из локтевой вены забирают в пробирку, содержащую 25 ЕД гепарина, добавляют 1 мл Среды 199 и подслаивают 1 мл фиколлверографина с плотностью 1,078. Клеточную фракцию лимфоцитов получают стандартным методом скоростного центрифугирования при 1500 об/мин в течение 20 минут [1]. Лимфоциты собирают в интерфазе Среда 199 – фиколлверографин и отмывают 2 раза Средой 199 центрифугированием при 1500 об/мин в течение 10 минут [8]. Далее в соответствии с инструкцией фирмы-разработчика моноклональных антител (Мед-Биоспектр, г. Москва, регистрационный №29/240/70700/2013-01 от 14.0.6.01) 100 мкл клеток в концентрации 1х106 кл/мл инкубируют с 20 мкл моноклональных анти-CD38 антител, меченных FITC, в течение 30 минут при комнатной температуре в темноте, после чего клетки отмывают 1 раз 1 мл физиологического раствора центрифугированием при 1500 об/мин в течение 2 минут. Клетки ресуспендируют в 500 мкл физиологического раствора. Учет реакции проводят на проточном цитометре, определяя относительное содержание CD38+ клеток в лимфоцитарном гейте. Использование предлагаемого способа позволяет с высокой точностью (75,8%) прогнозировать темп роста миомы матки в течение года. Отличительными признаками способа являются: установлен прогностический параметр относительного содержания CD38+ лимфоцитов в периферической крови, при количественных значениях которого 23% и более прогнозируется быстрый рост миомы. Сущность заявляемого способа поясняется следующими примерами. Пример 1. Больная А., 40 лет. Наблюдается в женской консультации по поводу миомы матки небольших размеров (8 недель) в течение 5 лет. Предъявляет жалобы на обильные длительные менструации, слабость. В анамнезе 2 своевременных родов, 2 мед. аборта без осложнений, ВМС в течение 6 лет, удалена 5 лет назад. Контрацепция в настоящее время барьерными методами. При влагалищном исследовании: шейка матки без дефектов слизистой, матка увеличена до 8 недель беременности, с неровной поверхностью, плотная, подвижная, безболезненная, придатки не определяются, своды свободны. По данным ультразвукового сканирования (УЗС): тело матки с неровной поверхностью, неоднородной структуры, размерами 76 Анализ крови: Нb – 104 г/л, эритроциты – 3,34 т/л, цветной показатель – 0,81, лейкоциты – 6,4 г/л, эозинофилы – 2, сегментоядерные нейтрофилы – 63, моноциты – 3, лимфоциты – 32, СОЭ – 16 мм/ч. Клинический диагноз: межмышечно-подбрюшинная миома матки, гиперполименоррея, анемия 1 степени. По данным иммунологического обследования по заявляемому способу показатель относительного содержания CD38+ лимфоцитов в периферической крови составил 11,5%, что ниже заявляемого параметра (23%). Заключение: прогнозируется отсутствие роста миомы в течение года. При повторном осмотре через 1 год гинекологический статус больной тот же (подтвержден данными УЗИ). Пример 2. Больная Л., 41 год. Обратилась в женскую консультацию с жалобами на обильные менструации. В анамнезе 1 своевременные роды, 3 медицинских аборта без осложнений, ВМС 5 лет, удалена 1 год назад. При осмотре: шейка матки без дефектов слизистой, тело матки увеличено до 5 недель беременности, плотное, подвижное, безболезненное, придатки не определяются. Данные УЗС: тело матки неоднородной структуры, размерами 58 Анализ крови: Нb – 114 г/л, эритроциты – 3,8 т/л, цветной показатель – 0,9, лейкоциты – 5 г/л, палочкоядерные нейтрофилы – 2, сегментоядерные нейтрофилы – 66, моноциты – 5, лимфоциты – 27, СОЭ – 10 мм/ч. Клинический диагноз: межмышечная миома матки, гиперполименоррея. Обследование по заявляемому способу показало, что содержание CD38+ лимфоцитов в периферической крови составило 38%, что выше заявляемого параметра (23%). Заключение: прогнозируется быстрый рост опухоли в течение 1 года. Больная поставлена на диспансерный учет, рекомендован осмотр гинеколога 1 раз в 3 месяца, контроль гемоглобина до и после менструации, УЗИ. При обращении через 1 год больная предъявляла жалобы на слабость, обильные менструации, боль внизу живота, учащенное мочеиспускание. При осмотре: шейка матки без дефектов слизистой. Тело матки до 12 недель беременности, с неровной поверхностью, плотное, подвижное, безболезненное. Придатки не определяются. Данные УЗИ: тело матки 94 Анализ крови: Hb – 99 г/л. Клинический диагноз: межмышечно-подбрюшинная миома матки, быстрый рост, гиперполименоррея, анемия 1 степени, дизурические явления. Больная направлена на обследование в гинекологический стационар для оперативного лечения. Таким образом, прогноз быстрого роста миомы по заявляемому способу подтвердился. Пример 3. Больная С., 43 года. Наблюдается в женской консультации по поводу миомы матки небольших размеров (8 недель) в течение 3 лет. Предъявляет жалобы на обильные длительные менструации, слабость. В анамнезе 2 своевременных родов, 3 мед. аборта без осложнений, ВМС в течение 6 лет, удалена 3 года назад. Контрацепция в настоящее время барьерными методами. При влагалищном исследовании: шейка матки без дефектов слизистой, матка увеличена до 7 недель беременности, с неровной поверхностью, плотная, подвижная, безболезненная, придатки не определяются, своды свободны. По данным УЗС: тело матки с неровной поверхностью, неоднородной структуры, размерами 76 Анализ крови: Нb – 108 г/л, эритроциты – 3,2 т/л, цветной показатель – 0,85, лейкоциты – 6,6 г/л, эозинофилы – 1, палочкоядерные нейтрофилы – 3, сегментоядерные нейтрофилы – 52, моноциты – 3, лимфоциты – 41, СОЭ – 6 мм/ч. Клинический диагноз: межмышечная миома матки, гиперполименоррея, анемия 1 степени. По данным иммунологического обследования по заявляемому способу показатель относительного содержания CD38+ лимфоцитов в периферической крови 23,5%. Заключение: прогнозируется рост миомы матки в течение года. При обращении больной через 1 год жалобы те же. При осмотре: шейка матки без дефектов слизистой, матка увеличена до 12 недель беременности, с неровной поверхностью, плотная, подвижная, безболезненная, придатки не определяются. Данные УЗИ: матка размерами 110 В анализе крови Hb – 95 г/л. Клинический диагноз: межмышечно-подбрюшинная миома матки, быстрый рост, гиперполименоррея, анемия 1 степени. Больная направлена в гинекологический стационар для оперативного лечения. Таким образом, прогноз быстрого роста миомы по заявляемому способу подтвердился. Указанным способом на базе гинекологической клиники Ивановского НИИ материнства и детства им. В.Н.Городкова МЗ РФ обследованы 33 пациентки, данные исследований приведены в таблице. Наблюдение за больными осуществлялось в течение 1 года. У всех оперированных женщин при гистологическом исследовании подтвержден диагноз “лейомиома матки”. Преимущества заявляемого способа: 1) высокая точность – 75,8%, чувствительность – 71%, специфичность – 81%; 2) нетравматичность способа; 3) обследование женщин возможно в амбулаторных условиях, не требует привлечения многочисленного персонала и не приводит к временной утрате трудоспособности женщины; 4) прогноз состоятелен в течение года. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 7. Ярилин А.А. Основы иммунологии./М.: Медицина, – 1999, – 608 с. Формула изобретения
Способ прогнозирования роста лейомиомы матки путем исследования периферической крови, отличающийся тем, что определяют относительное содержание CD38+ лимфоцитов и при их значениях, равных или больших 23%, прогнозируют быстрый рост миомы матки в течение года. MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 18.07.2004
Извещение опубликовано: 10.12.2006 БИ: 34/2006
|
||||||||||||||||||||||||||
84