Патент на изобретение №2235785
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ БАКТЕРИЙ РОДА YERSINIA
(57) Реферат:
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к клинической микробиологии, и может быть использовано для бактериологической диагностики заболеваний, вызываемых бактериями рода Yersinia. Среда содержит сухой питательный агар, в качестве стимулятора роста витаминный препарат “ЭКД”, содержащий аминокислоты и комплекс витаминов, маннит, расщепляемый бактериями рода Yersinia с образованием кислоты, ингибитор грамположительной микрофлоры, желчные соли и кристаллический фиолетовый, в качестве индикатора кислотообразования – нейтральный красный, воду дистиллированную в заданном соотношении компонентов. Преимущество предлагаемой среды заключается в том, что среда полностью ингибирует рост грамположительной микрофлоры, обеспечивает рост штаммов Proteus vulgaris в О-форме. Кроме того, среда обладает высокой чувствительностью, отмечается рост колоний иерсиний при посеве из разведения 10-7. 1 табл. Изобретение относится к медицины, а именно к клинической микробиологии, и может быть использовано для бактериологической диагностики заболеваний, вызываемых бактериями рода Yersinia. Наиболее употребительной средой для выделения иерсиний являются среда Эндо и среда Серова (1). Недостатком этих сред является то, что на среде Эндо выделение иерсиний затруднено из-за недостаточно четких дифференцирующих свойств среды, а также слабоселективных свойств, а среда Серова сложна в приготовлении и включает в состав дефицитный реактив (конго красный). Наиболее близким к предложенной питательной среде является питательная среда для выделения иерсиний, описанная в SU 1482944, кл. С 12 Q 1/04, 30.05.1989, содержащая источник питательного агара – среда Эндо, источник углерода – Д(-) маннит, в качестве ингибитора посторонней микрофлоры – желчь сухая, индикатор кислотообразования генцианвиолет, воду дистиллированную. К причинам, препятствующим достижению указанного ниже технического результата при использовании известной среды, принятой за прототип, является многоступенчатость способа выделения иерсиний, которая требует обязательного предварительного подращивания бактерий в фосфатно-буферном растворе на холоду, низкая чувствительность среды, не обеспечивающая рост иерсиний при посеве единичных клеток, недостаточная селективность. Кроме того, среда является многокомпонентной, сложна в приготовлении, что затрудняет выпуск данной среды в качестве коммерческого препарата в промышленном масштабе. Задача предлагаемого изобретения – повышение дифференцирующих и селективных свойств среды. Указанный технический результат при осуществлении изобретения достигается тем, что в качестве основного источника азотистого питания в предлагаемой среде используется сухой питательный агар, в качестве стимулятора роста витаминный препарат “ЭКД”, содержащий аминокислоты и комплекс витаминов, а также многоатомный спирт маннит, расщепляемый бактериями рода Yersinia с образованием кислоты, как ингибиторы грамположительной микрофлоры в состав среды введены соли желчных кислот и кристаллический фиолетовый, в качестве индикатора кислотообразования – нейтральный красный, при следующем соотношении компонентов, г/л: Сухой питательный агар 30,0-40,0 Витаминный препарат “ЭКД” 1,0-3,0 Д(-) маннит 15,0-25,0 Желчные соли, сухие 7,5-9,5 Нейтральный красный 0,02-0,04 Кристаллический фиолетовый 0,001-0,002 Вода дистиллированная остальное Содержание в предлагаемой среде желчных солей и кристаллического фиолетового полностью ингибирует рост грамположительной микрофлоры, обеспечивает рост штаммов Proteus vulgaris в O-форме. Вместе с тем среда обладает высокой чувствительностью, отмечается рост колоний иерсиний при посеве из разведения 10-7. Среда сконструирована из отечественных гостированных ингредиентов на основе сухого питательного агара и витаминного препарата “ЭКД”, имеющих промышленный выпуск на предприятии НПО “Питательные среды” (3, 4). Среду получают следующим образом. Пример 1. В 0,9 л дистиллированной воды растворяют следующие ингредиенты, взятые в количестве (минимальное): сухой питательный агар – 30,0 г, витаминный препарат “ЭКД” – 1,0 г, Д(-) маннит – 15,0 г, желчные соли, сухие – 7,5 г, нейтральный красный – 0,02 г, кристаллический фиолетовый – 0,001 г. Среду доводят до кипения, кипятят 2-3 мин. Остужают до 45 Пример 2. Отличается от примера 1 тем, что в 0,9 л дистиллированной воды растворяют следующие ингредиенты среды, взятые в количестве (оптимальное): сухой питательный агар – 35,0 г, витаминный препарат “ЭКД” – 2,0 г, Д(-) маннит – 20,0 г, желчные соли, сухие – 8,5 г, нейтральный красный – 0,03 г, кристаллический фиолетовый – 0,002 г. Далее согласно примеру 1. Пример 3. Отличается от примеров 1 и 2 тем, что в 0,9 л дистиллированной воды растворяют следующие ингредиенты среды, взятые в количестве (максимальное): сухой питательный агар – 40,0 г, витаминный препарат “ЭКД” – 3,0 г, Д(-) маннит – 25,0 г, желчные соли, сухие – 9,5 г, нейтральный красный – 0,04 г, кристаллический фиолетовый – 0,003 г. Далее согласно примеру 1. Каждый вариант среды получали отдельно. Результаты испытания биологических показателей предлагаемой и известной сред приведены в таблице. Из данных таблицы видно, что предлагаемая среда имеет преимущество, так как на питательной среде задерживается ползучий рост протеев, подавляется рост грамположительной микрофлоры. Состав среды и технология ее приготовления просты, также среда удобна, обладает хорошими ростовыми свойствами. Источники информации 1. Этиология, эпидемиология, клиника и лабораторная диагностика человека. Методические рекомендации для эпидемиологов, микробиологов и инфекционистов, М., 1982 г., с.17. 2. Г.Я. Ценева. Иерсинез и псевдотуберкулез. С-П., 1992 г., с.12-13 (прототип). 3. ФС 42-3520-98. 4. ФС 42-3441-97. Формула изобретения
Питательная среда для выделения бактерий рода Yersinia, содержащая источник питательного агара, источник углерода, ингибитор посторонней микрофлоры, ингибитор кислотообразования, воду дистиллированную, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит в качестве стимулятора роста витаминный препарат “ЭКД”, в качестве источника питательного агара – сухой питательный агар, в качестве источника углерода – Д(-)маннит, в качестве ингибитора посторонней микрофлоры – желчные соли и кристаллический фиолетовый, в качестве индикатора кислотообразования – нейтральный красный при следующем соотношении компонентов, г/л: Сухой питательный агар 30,0 – 40,0 Витаминный препарат “ЭКД” 1,0 – 3,0 Д(-)Маннит 15,0 – 25,0 Желчные соли сухие 7,5 – 9,5 Нейтральный красный 0,02 – 0,04 Кристаллический фиолетовый 0,001 – 0,02 Вода дистиллированная Остальное PD4A – Изменение наименования обладателя патента Российской Федерации на изобретение
(73) Новое наименование патентообладателя:
Извещение опубликовано: 27.03.2005 БИ: 09/2005
|
||||||||||||||||||||||||||
С, разливают в чашки Петри, подсушивают в термостате 1,5 ч.