Патент на изобретение №2151185

(54) ШТАММ ВИРУСА ГРИППА A/47/ИОГАННЕСБУРГ/96/7/7 (H1N1) ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ЖИВОЙ ГРИППОЗНОЙ ИНТРАНАЗАЛЬНОЙ ВАКЦИНЫ ДЛЯ ДЕТЕЙ

(57) Реферат:

Изобретение относится к получению вакцинного штамма вируса гриппа А/47/Иоганнесбург/96/7/7 (H1N1) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для детей. Штамм А/47/Иоганнесбург/96/7/7 (H1N1) активно размножается в развивающихся куриных эмбрионах при оптимальной температуре 34°С, характеризуется температурочувствительностью и холодоадаптированностью. Штамм ареактогенен и пригоден для применения в качестве живой гриппозной интраназальной вакцины для введения детям 3-14 лет. 1 табл.

Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано в здравоохранении для профилактики эпидемического гриппа среди детей живой интраназальной гриппозной вакциной из штамма A/47/Иоганнесбург/96/7/7 (H1N1). Известный штамм A/47/Техас/91/2/6 (H1N1) – прототип [1] – утратил антигенную актуальность и вследствие этого не сможет вызвать защитную реакцию во время эпидемии гриппа, вызванной штаммом вируса гриппа, аналогичного вирусу A/Иоганнесбург/82/96 (H1N1).

Задачей, на решение которой направлено заявляемое изобретение, является получение вакцинного штамма актуальной антигенной разновидности на основе эпидемического вируса A/Иоганнесбург/82/96 (H1N1).

Вакцинный штамм A/47/Иоганнесбург/96/7/7 (H1N1) получен методом генетической реассортации эпидемического вируса А/Иоганнесбург/82/96 (H1N1) с холодоадаптированным штаммом А/Ленинград/134/47/57 (H2N2) – донором аттенуации – с последующей селекцией в присутствии антисыворотки к вирусу A/Ленинград/134/47/57 (H2N2). Донор аттенуации холодоадаптированный температурочувствительный штамм вируса гриппа A/Ленинград/134/47/57 (H2N2), разрешенный для получения безвредных живых интраназальных вакцин для детей [2].

Методом сравнительного анализа электрофоретической подвижности одноцепочечных фрагментов РНК родительских вирусов и реассортантного вакцинного штамма в полиакриламидных гелях установлено, что вакцинный штамм A/47/Иоганнесбург/96/7/7 (H1N1) унаследовал 6 генов, кодирующих внутренние белки (PB1, PB2, PA, NP, М, NS) от донора аттенуации A/Ленинград/134/47/57 (H2N2) и 2 гена, кодирующих поверхностные белки – HA (гемагглютинин) и NA (нейраминидазу) – от эпидемического вируса A/Иоганнесбург/82/96 (H1N1). Гемагглютинин в РТГА идентичен вирусу A/Иоганнесбург/82/96 (H1N1), антисывороткой к которому полностью нейтрализуется. Штамм является температурочувствительным (разность в показателях инфекционной активности при 33^oC и 40^oC составляет 7.0 lg ЭИД₅₀/0,2 мл) и холодоадаптированным (разность в показателях инфекционной активности при 33^oC и 25^oC – 3.0 lg ЭИД₅₀)/0,2 мл).

Таким образом, представленный вакцинный штамм A/47/Иоганнесбург/96/7/7 (H1N1) характеризуется сочетанием полезных признаков, необходимых вакцинному штамму: антигенной специфичностью поверхностных белков эпидемического вируса A/Иоганнесбург/82/96 (H1N1), структурой генома, оптимальной для реассортантных вакцинных штаммов, температурочувствительностью и холодоадаптированностью, что коррелирует с аттенуацией для человека, характерной для донора аттенуации. Морфология штамма – полиморфная, типичная для вируса гриппа.

ХАРАКТЕРИСТИКА ШТАММА
Инфекционная активность при репродукции в развивающихся куриных эмбрионах при 33-34^oC в течение 48 часов -9,0 lg ЭИД₅₀/0,2 мл.

Гемагглютинирующая активность – 1:512.

Штамм проявляет генетическую стабильность биологических признаков после 5 пассажей на куриных эмбрионах (при использовании больших заражающих доз).

Образец паспорта на вакцинный штамм A/47/Иоганнесбург/96/7/7 (H1N1) представлен в конце описания.

ШТАММ A/47/ИОГАННЕСБУРГ/96/7/7 (H1N1) АРЕАКТОГЕНЕН ПРИ ИНТРАНАЗАЛЬНОМ ВВЕДЕНИИ ДЕТЯМ 3-14 ЛЕТ.

Пример. Группу из 104 детей в возрасте 3-14 лет вакцинировали интраназально в объеме 0,5 мл рекомбинантным вакцинным штаммом A/47/Иоганнесбург/96/7/7 (H1N1) с инфекционной активностью 7,5 lg ЭИД₅₀/0,2 мл. Группа детей того же возраста из 101 человека получила плацебо.

Сильные температурные реакции с повышением температуры свыше 38,5^oC и средние реакции с кратковременным повышением температуры в диапазоне 37,6-38,5^oC не наблюдались. Слабые температурные реакции (до 37,5^oC) наблюдались у 9 человек (8,7% случаев). Показатель реактогенности (разница в проценте средних реакций у привитых вакциной и получивших плацебо) составил 0% (таблица 1).

Таким образом, вакцинный штамм A/47/Иоганнесбург/96/7/7 (H1N1) по показателям реактогенности соответствует требованиям, предъявляемым к вакцинным штаммам Фармакопейной статьей ФС 42-3353-97 на живую гриппозную вакцину для интраназального применения детям 3-14 лет.

ЛИТЕРАТУРА
1. Штамм A/47/Texac/91/2/6 (H1N1) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для детей. Патент РФ 2077581 от 20.04.97. Опубликовано в бюллетене изобретений N 11 от 20.04.97.

2. Александрова Г.И., Климов А.И. Живая вакцина против гриппа. – СПб.: Наука. – 1994. – 151 с.

Формула изобретения

Штамм вируса гриппа А/47/Иоганнесбург/96/7/7 (H1N1) ГИСК N 392 (государственный институт стандартизации и контроля им.Л.А.Тарасевича), используемый для получения живой гриппозной интраназальной вакцины для детей.

РИСУНКИ

MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 11.12.2006

Извещение опубликовано: 20.01.2008 БИ: 02/2008