Патент на изобретение №2151139
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЙ СУММЫ ТРИТЕРПЕНОВЫХ КИСЛОТ
(57) Реферат: Изобретение относится к биотехнологии, в частности к способу получения биологически активной суммы тритерпеновых кислот. Способ получения биологически активной суммы тритерпеновых кислот заключается в том, что исходное сырье (древесную зелень или кору пихты) пропаривают, затем высушивают, экстрагируют органическим растворителем, обрабатывают экстракт водным раствором щелочного агента, подкисляют и выделяют целевой продукт. Техническим результатом изобретения является повышение эффективности способа вследствие сокращения времени экстрагирования, в некоторых случаях увеличение выхода целевого продукта. 1 табл. Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способам выделения биологически активной природной смеси (суммы) тритерпеновых кислот из древесной зелени и коры пихты. Известен способ получения биологически активной суммы тритерпеновых кислот путем экстрагирования высушенной хвои (древесной зелени) пихты смесью петролейного эфира и этилацетата (1:1 по объему), обработки экстракта водным раствором бикарбоната натрия, подкисления соляной кислотой и выделения целевого продукта этилацетатом (патент РФ N 2025976). Данный способ недостаточно эффективен вследствие своей длительности и низкого выхода целевого продукта. Известен способ получения биологически активной суммы тритерпеновых кислот, по которому в качестве исходного сырья используют кору пихты, экстракцию проводят углеводородным растворителем и этилацетатом последовательно или их смесью в соотношении 1:0,8:1,2, целевой продукт извлекают этилацетатом с последующим извлечением тритерпеновых кислот раствором щелочи, подкислением водно-щелочного раствора и выделением из него целевого продукта (патент РФ N 2061487). Недостатком способа также является низкий выход продукта – биологически активной суммы тритерпеновых кислот. Задачей, на решение которой направлено изобретение, является повышение эффективности способа за счет сокращения времени экстракции и в некоторых случаях увеличения выхода целевого продукта. Поставленная задача решается следующим образом. Растительное древесное сырье – древесную зелень или кору пихты обрабатывают паром с получением пихтового масла, затем сушат, экстрагируют высушенное сырье органическим растворителем, извлекают из экстракта сумму тритерпеновых кислот раствором щелочного агента, подкисляют водно-щелочной раствор и выделяют целевой продукт, например, фильтрацией. Сопоставительный анализ с ближайшим аналогом показывает, что заявляемое решение отличается тем, что растительное сырье перед экстрагированием его органическим растворителем обрабатывают паром, под воздействием которого нарушается восковое покрытие хвои, разрываются клеточные оболочки клеток хвои или коры и, таким образом, облегчается доступ растворителя внутрь клеток ко всем клеточным структурам, за счет чего и достигается более полное извлечение из сырья целевого продукта при меньшем расходе растворителя. Способ осуществляют следующим образом. Свежую древесную зелень или кору пихты обрабатывают паром, в результате чего происходит извлечение эфирного масла, сушат и экстрагируют органическим растворителем, затем экстракт обрабатывают водным раствором щелочного агента, водно-щелочной раствор отделяют, подкисляют его минеральной кислотой и выделяют целевой продукт фильтрацией. Способ поясняется следующими примерами. Пример 1. Свежую древесную зелень (500 г) обработали острым паром (t 109-124oC) в течение 13-15 часов, при этом получили 7,2 г пихтового масла, высушили пропаренную зелень до влажности 4-6%, хвою измельчили до 0,1-0,4 мм. Полученные 152 г сухой хвои экстрагировали метил трет-бутиловым эфиром (600 мл) путем настоя в течение 2 часов. Было получено 500 мл экстракта, который обработали 100 мл 2% раствора гидроокиси натрия. Отделенный водно-щелочной раствор подкислили HCl до pH 2 и выделили целевой продукт фильтрацией. Получено 17,9 г тритерпеновых кислот, что составляет 11,8% от веса экстрагируемого сырья. Пример 2. Осуществляли в условиях примера 1, но с экстрагированием пропаренной, высушенной и измельченной древесной зелени различными органическими растворителями. Результаты приведены в таблице. Пример 3. Свежую древесную зелень (500 г), не обработанную паром, высушивали и измельчали, полученные 252 г высушенной зелени экстрагировали метил трет-бутиловым эфиром, дальнейшую обработку вели в условиях примера 1. Получено 14,1 г тритерпеновых кислот. Выход целевого продукта составил 5,6%. Пример 4. Свежую кору пихты (500 г) обрабатывали острым паром и высушивали в условиях примера 1. Полученные 177 г высушенной и измельченной коры экстрагировали и подвергали дальнейшей обработке также в условиях примера 1. Было получено 9,02 г тритерпеновых кислот, что составило 5,1% от экстрагируемого сырья и 4,2 г пихтового масла. Пример 5. Кору пихты высушивали (без обработки паром), высушенное сырье обрабатывали в условиях примера 1. Выход целевого продукта составил 1,7%. Целевой продукт – биологически активная сумма тритерпеновых кислот, полученный во всех примерах, проанализирован методом высокоэффективной жидкостной хроматографии и соответствует стандартной смеси “тритерпеновых кислот”, согласно ТУ N 9291-001-03533895-94 на препарат тритерпеновых кислот “СИЛК”. Преимуществом заявляемого способа, по сравнению с известными, является получение целевого продукта, тритерпеновых кислот, в частности из древесной зелени пихты, более высокого качества. Используемая в известном способе древесная зелень (“пихтовая лапка”) на 40% состоит из древесины и на 60% – из хвои. При экстрагировании из древесины в экстракт переходят ряд компонентов, в частности дегидроабиетиновая кислота, которые “загрязняют” продукт, являясь его балластом и, таким образом, снижая активность продукта. Отделение хвои от древесины очень трудоемкий процесс и поэтому экономически нецелесообразен. В то же время, после обработки древесной зелени паром и последующей сушки, хвоя отделяется от древесины путем легкого встряхивания, что и позволяет использовать в предлагаемом способе хвою практически без примеси древесины. Кроме целевого продукта – биологически активной суммы тритерпеновых кислот, в заявляемом способе получают и пихтовое масло, отгоняемое из древесной зелени и хвои пихты паром. Формула изобретения
РИСУНКИ
PC4A – Регистрация договора об уступке патента Российской Федерации на изобретение
Номер и год публикации бюллетеня: 13-2002
(73) Патентообладатель:
Дата и номер государственной регистрации перехода исключительного права: 04.02.2002 № 13991
Извещение опубликовано: 10.05.2002
MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 03.08.2002
Извещение опубликовано: 20.10.2004 БИ: 29/2004
MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 03.08.2002
Извещение опубликовано: 27.10.2004 БИ: 30/2004
NF4A Восстановление действия патента Российской Федерации на изобретение
Извещение опубликовано: 27.10.2004 БИ: 30/2004
PC4A – Регистрация договора об уступке патента Российской Федерации на изобретение
Прежний патентообладатель:
(73) Патентообладатель:
Дата и номер государственной регистрации перехода исключительного права: 01.02.2005 № 20813
Извещение опубликовано: 20.05.2005 БИ: 14/2005
MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 03.08.2005
Извещение опубликовано: 10.03.2007 БИ: 07/2007
NF4A Восстановление действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение
Дата, с которой действие патента восстановлено: 10.03.2007
Извещение опубликовано: 10.03.2007 БИ: 07/2007
|
||||||||||||||||||||||||||
