Патент на изобретение №2228030

(54) СПОСОБ ОБРАБОТКИ БИОЛОГИЧЕСКИХ ПРОТЕЗОВ СОСУДОВ

(57) Реферат:

Изобретение относится к области медицины, а именно к предимплантационной обработке биологических протезов кровеносных сосудов малого диаметра для сердечно-сосудистой хирургии. Протезы консервируют 0,625% водным раствором глютарового альдегида. Непосредственно перед использованием их обрабатывают раствором гепарина и аргинина с соотношением компонентов: гепарин 50–150 ед/мл и аргинин 0,5–1,5 мг/мл. Обработку проводят в течение 8–12 ч при температуре 20-25°С и рН 7,0-7,4. Способ позволяет создать “самогепаринизирующуюся” систему, благодаря которой возможно использование эндогенного гепарина на разделе “биопротез-кровь”, что обеспечивает высокий и длительно сохраняющийся антитромбогенный эффект. 2 ил., 2 табл.

Изобретение относится к области медицины, а именно к предимплантационной обработке биологических ксенопротезов кровеносных сосудов малого диаметра (2-4 мм) для сердечно-сосудистой хирургии.

Известен способ обработки биопротезов сосудов, при котором производят консервирование ткани 2-5% водным раствором диглицирового эфира этиленгликоля и обработку раствором гепарина концентрацией не менее 100 ед/мл (Патент РФ №2008767, МКИ⁵ А 01 N 1/00, 1994).

Известен способ обработки биопротезов, применяемый в сердечно-сосудистой хирургии, когда нативную сосудистую ткань после консервации смесью эпоксисоединений при температуре 4-45С в течение 2-21 суток обрабатывают раствором гепарина с концентрацией не менее 75 ед/мл при температуре 20-45С в течение 2-16 ч и дополнительно выполняют обработку 70%-ным водным раствором этанола в течение 40-60 мин (Патент РФ №2008767, опубл. в БИ. – 1994. – №5).

Однако эти способы основаны на использовании только экзогенного гепарина, связанного с биопротезом, но не позволяют использовать эндогенный гепарин организма на разделе “биопротез-кровь”.

Предлагается способ модификации обработки биопротезов малого диаметра, включающий консервацию трупных человеческих артерий 0,625% раствором глютарового альдегида, по стандартной методике, с последующей выдержкой в растворе аргинина и гепарина непосредственно перед использованием, в течение 8-12 ч при температуре 20-25С и рН 7,0-7,4, при следующем соотношении компонентов: 50-150 ед/мл гепарина, 0,5-1,5 мг/мл аргинина.

Введение в обработку биопротезов смеси гепарина и аргинина позволяет создать так называемую “самогепаринизирующуюся” систему, благодаря которой возможно использование эндогенного гепарина на границе раздела “биопротез-кровь”, что обеспечивает высокий и длительный антитромбогенный эффект.

Способ осуществляется следующим образом.

Сразу после забора трупных сосудов их очищают механическим путем от окружающей жировой ткани и помещают в 0,625% раствор глютарового альдегида, приготовленного путем разведения стандартного 25% раствора глютарового альдегида дистиллированной водой в пропорции 1:40. При этом объем консервирующей жидкости должен превышать объем протезов не менее чем в 2 раза. Замену консервирующего раствора глютарового альдегида концентрацией 0,625% производят на 1-е, 3-и, 7-е и 21-е сутки, готовые протезы хранят в том же растворе. Обработку протезов гепарином и аргинином осуществляют непосредственно перед использованием протезов. Для этого в 100 мл водного раствора аргинина и гепарина, концентрацией гепарина 50-150 ед/мл, концентрацией аргинина 0,5-1,5 мг/мл, помещают консервированные биопротезы на 8-12 ч при температуре 20-25С и рН 7,0-7,4.

Пример 1.

Образцы трупных человеческих артерий, изъятых в течение суток после смерти, помещают в водный 0,625% раствор глютарового альдегида, который подвергают замене на 1-е, 3-и, 7-е и 21-е сутки, при температуре 20-25С и рН 7,0-7,4. Затем биопротезы трехкратно промывают избытком физиологического раствора и обрабатывают водным раствором гепарина и аргинина при соотношении компонентов: гепарина 50 ед/мл, аргинина 0,5 мг/мл в течение 8-12 ч при температуре 20-25С и рН 7,0. После чего биопротезы являются готовыми для использования.

Пример 2.

Образцы трупных человеческих артерий, изъятых в течение суток после смерти, помещают в водный 0,625% раствор глютарового альдегида, который подвергается замене на 1-е, 3-и, 7-е и 21-е сутки, при температуре 20-25С и рН 7,0-7,4. Затем биопротезы трехкратно промывают избытком физиологического раствора и обрабатывают водным раствором гепарина и аргинина при соотношении компонентов: гепарина 150 ед/мл, аргинина 1,5 мг/мл в течение 8-12 ч при температуре 20-25С и рН 7,0. После чего биопротезы являются готовыми для использования.

Сопоставление результатов обработки биопротезов с использованием различных концентраций гепарина и аргинина показывает, что колебание значений в пределах 50-150 ед/мл для гепарина и 0,5-1,5 мг/мл для аргинина не влияет на антитромбогенный эффект применения последних.

Предложенным способом была проведена обработка 40 биологических протезов малого диаметра, которые использовались для экспериментальных исследований “in vitro” и “in vivo”. При этом преимущества биопротезов, обработанных одновременно аргинином и гепарином, перед другими видами обработки – в более выраженном и длительно сохраняющемся антикоагулянтном эффекте при улучшении гемосовместимых свойств биопротезов, что подтверждается следующими данными:

1. Исследованием количества иммобилизованного гепарина (по толлуидиновому синему) (табл.1). Прямая гепаринизация консервированного биопротеза сопровождается иммобилизацией незначительного количества антикоагулянта (гепарина), добавка в раствор аргинина в несколько раз повышает количество связанного гепарина.

2. Исследованием активации системы комплемента (табл.2). Прямая гепаринизация биопротеза сопровождается снижением активации системы комплимента в 2,5 раза, несмотря на небольшое количество иммобилизированного гепарина. Добавка аргинина в раствор гепарина сопровождается понижением активации системы комплемента по сравнению с исходным и гепаринизированным образцами в 7,5 и 3 раза соответственно.

3. Исследованием использованных в эксперименте на животных биопротезов, обработанные гепарином и аргинином, методом электронной сканирующей микроскопии в сравнении с биопротезами, обработанными только гепарином. При этом количество тромбоцитов, фиксированных к стенке биопротеза через 6 суток от момента операции, было ниже при использовании биопротезов, обработанных гепарином и аргинином (фиг.1), чем при обработке только гепарином (фиг.2).

Формула изобретения

Способ обработки биологических протезов сосудов, включающий консервацию 0,625%-ным водным раствором глютарового альдегида, отличающийся тем, что непосредственно перед использованием биопротезов их обрабатывают раствором гепарина и аргинина при следующем соотношении компонентов: гепарин 50-150 ед/мл и аргинин 0,5-1,5 мг/мл, в течение 8-12 ч при температуре 20-25°С и рН 7,0-7,4.

РИСУНКИ

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 06.08.2004

Извещение опубликовано: 27.05.2006 БИ: 15/2006