Патент на изобретение №2226397
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) СРЕДСТВО ДЛЯ РАЗВЕДЕНИЯ СУХИХ ПРОТИВОБРУЦЕЛЛЕЗНЫХ ВАКЦИН
(57) Реферат: Средство включает физиологический раствор хлористого натрия и метилцеллюлозу при следующем соотношении компонентов, мас.%: метилцеллюлоза – 0,6, раствор хлористого натрия – остальное. Введение метилцеллюлозы повышает эффективность разбавителя сухих противобруцеллезных вакцин. 2 табл. Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к ветеринарии, и может быть использовано для разведения сухих противобруцеллезных вакцин из штаммов В.abortus №19 и 82. Для удобства в хранении и транспортировке противобруцеллезные вакцины из штаммов B.abortus №19 и 82 выпускаются биопромышленностью в сухом виде. Перед применением их разбавляют специальной стерильной жидкостью и вводят животным в виде взвеси микробов определенной концентрации. Такую жидкость ранее выпускала биологическая промышленность, однако, с 1996 г. выпуск ее ограничен и для разведения вакцины рекомендовано использовать стерильный физиологический раствор хлористого натрия. Таким образом, аналогом данного изобретения является 0,85%-ный раствор хлористого натрия. Однако физраствор является инертным препаратом, не обладающим иммуностимулирующим эффектом. Целью настоящего изобретения является повышение эффективности разбавителя сухих противобруцеллезных вакцин. Указанная цель достигается дополнительным введением в физиологический раствор хлористого натрия метилцеллюлозы (МЦ) 0,6%-й концентрации. Пример 1. Раствор МЦ, выпускаемый Усолье-Сибирским химическим комбинатом “Химпром”, готовят на физиологическом растворе из расчета 6 г на 1000 мл, разливают в 200-граммовые флаконы и стерилизуют в автоклаве при 1 атм в течение 20 мин. Пример 2. Определяют динамику изменения количественного содержания бруцелл вакцинных штаммов В.abortus 19 и 82 в разных разбавителях при хранении после разведения при комнатной температуре в течение 4 ч. Каждую вакцину разводят в трех разбавителях: один флакон в биофабричном разбавителе, второй в физрастворе NaCl и третий флакон – в МЦ. Основные разведения готовят согласно Наставлениям по применению сухих живых вакцин. Вакцину из шт. 19 разводят из расчета, чтобы одна прививочная доза (80 млрд микробных клеток) содержалась в 4 мл, а из шт. 82 (100 млрд м.к.) – в 5 мл разбавителя. Из основных разведении готовят рабочие от 10-1 до 10-9. Из пробирок с разведениями 10-7, 10-8 и 10-9 делают высевы по 0,01 мл на чашки Петри с эритритагаром и помещают в термостат при 37  С.
Количество выросших колоний бруцелл подсчитывают на 4-5 сутки инкубирования.
Результаты исследований приведены в табл.1
Из таблицы видно, что количественное содержание бруцелл штаммов 19 и 82 через 30 мин после разведения не имело существенных различий во всех трех разбавителях. Так, колоний бруцелл шт. 19 в разведении 10-9 в физрастворе было 17, в стандартном разбавителе 45 и в МЦ-53, шт. 82 – соответственно 33, 15 и 19. Четкие различия выявлены при исследовании через 4 ч после разведения: количество микробов обоих штаммов снизилось во всех разбавителях. В стандартном разбавителе количество бруцелл снизилось незначительно (в 2 раза в разведении 10-9), в физрастворе – в 5-6 раз, в МЦ- количество их осталось почти на прежнем уровне.
Таким образом, проведенные исследования показали, что в растворе МЦ бруцеллы вакцинных шт. 19 и 82 сохраняются лучше, чем в физрастворе и даже стандартном разбавителе.
Пример 3. Опыт по изучению уровня и динамики антителогенеза при применении вакцины из шт. 19, разведенной разными разбавителями, проводят на ярках 2 – месячного возраста. Животных в количестве 15 голов разбивают на 3 группы по 5 голов в каждой. Для ярок первой группы используют вакцину, разведенную стандартным разбавителем, второй – физиологическим раствором и третьей – МЦ.
Вакцину вводят подкожно в бесшерстную часть с внутренней стороны бедра в дозе 40 млрд микробных клеток. Динамику антителообразования у подопытных животных изучают в течение 3 мес. после вакцинации. Для этого через 7, 15, 30, 45, 70 и 90 дней после прививки берут кровь и исследуют в реакции агглютинации (РА) по общепринятой методике и в реакции иммунодиффузии (РИД) по В.М.Чекишеву. Схема и результаты опыта отражены в табл.2.
Из таблицы видно, что в РИД через 7 суток после прививки положительные реакции зарегистрированы у 40% овец всех групп. Через 15 дней реагировали все животные всех групп. Через 30 дней при применении вакцины, разведенной в стандартном разбавителе и МЦ, положительно реагировало 80% овец, в физрастворе – 60%, через 45 дней – соответственно 20, 20 и 40%. В остальные сроки положительных результатов не было.
Примерно такая же динамика антителообразования регистрировалась и в РА. Однако положительные реакции отмечались во все сроки исследования. При применении биофабричного разбавителя и МЦ титры антител были выше, чем при использовании физраствора. Причем этот показатель у МЦ был выше, чем у стандартного разбавителя во все сроки исследований.
Формула изобретения Средство для разведения сухих противобруцеллезных вакцин, включающее раствор хлористого натрия, отличающееся тем, что оно содержит дополнительно метилцеллюлозу при следующем соотношении компонентов, мас.%: Метилцеллюлоза 0,6% Раствор хлористого натрия Остальное |
||||||||||||||||||||||||||
