Патент на изобретение №2222011

(54) СПОСОБ ИНДИВИДУАЛЬНОГО ПОДБОРА ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ ЭТИОЛОГИЧЕСКИ РАЗЛИЧНЫМИ ОСТРЫМИ И ХРОНИЧЕСКИМИ ВИРУСНЫМИ ГЕПАТИТАМИ

(57) Реферат:

Изобретение относится к медицине, а именно к способам скрининга лекарственных препаратов для подбора препарата и его оптимальной дозы для лечения конкретного больного гепатитом. Способ включает культивирование цельной гепаринизированной крови с тестируемыми препаратами, определение в одной и той же пробе количества SH- и SS-групп, SH-групп – амперометрическим титрованием раствора нитрата серебра, SS-групп – только на основании падения тока после внесения сульфита натрия, и выбор оптимального препарата по определению наибольшего коэффициента по соотношению SH-/SS-групп в пределах 2,6-4. Культивирование крови проводят в течение 1 ч при 37^oС, введение тестируемого препарата в кровь осуществляют в дозе, соответствующей 1:5000 от терапевтической. Технический результат: создание быстрого, простого и эффективного способа индивидуального подбора лекарственных препаратов для лечения больных этиологически различными острыми и хроническими вирусными гепатитами.

Изобретение относится к медицине, а именно к способам скрининга лекарственных препаратов для подбора препарата и его оптимальной дозы для лечения конкретного больного гепатитом.

В настоящее время традиционный подбор препарата для конкретного больного включает в себя клиническое обследование больного, сопоставление данных обследования с рекомендациями фармации, назначение препарата или группы препаратов и коррекцию назначения по результатам воздействия препарата на организм (Методы экспериментальной химиотерапии (Практическое руководство) /Под ред. Першина Г.Н. -М., 1971, с.234).

Недостатком такого подхода является длительность и ненадежность подбора, высокая вероятность осложнений.

Известен метод сравнения действия и/или биодоступности терапевтически эффективных смесей путем их взаимодействия с эритроцитами животных и человека, при котором сравнивается количество нормальных и шиповидных эритроцитов до и после добавления этих смесей (DE 4038898 A1, G 01 N 33/15, 1990).

Недостатком метода является недостаточная точность, связанная с использованием полуколичественного анализа, сложность стандартизации исследования, необходимость использования дорогостоящих цитологических методов и труда высококвалифицированного персонала.

Известен метод индивидуального подбора веществ для лечения пациента, включающий в себя помещение рук оператора над больным и тестируемыми веществами и выбор оптимального препарата исходя из температурной реакции оператора (пат. РФ 2007117 С1, кл. А 61 B 5/04, G 01 N 33/15, 1992).

Известен метод детектирования антиаггрегационного действия вазоактивных веществ путем измерения аггрегации тромбоцитов в крови до и после введения вазоактивных веществ (DE 3717337 A1, G 01 N 33/15, 1987).

Недостатками этих методов является определенная субъективность и недостаточная надежность результатов.

Прототипом заявляемого способа является способ скрининга лекарственных препаратов, включающий в себя культивирование компонентов крови больного с водными растворами тестируемых препаратов, в разных дозах, определение соотношения SH- и SS-групп в клеточной фракции крови больного после культивирования и выбор в качестве оптимального препарата или оптимальной дозы препарата, обеспечивающего указанное соотношение, наиболее близкое к 3 (пат. РФ 2150700, кл. G 01 N 33/15, 2000).

Преимущества способа – универсальность.

Недостатком прототипа является трудоемкость, длительность. При применении метода обратного амперометрического титрования для определения SS-групп в биологических жидкостях требуется обязательная проверка окислительно-восстановительного состояния унитиола, который применяется при этом методе.

Унитиол необходимо титровать раствором азотнокислого серебра перед началом определения SS-групп каждый день, а если работа проводится в течение рабочего дня, то неоднократно за день. Открытая амплитуда унитиола, как правило, не применяется в последующие дни работы, т.к. унитиол спонтанно быстро окисляется.

Задачей изобретения является создание более быстрого, простого и эффективного способа индивидуального подбора лекарственных препаратов для лечения больных этиологически различными острыми и хроническими вирусными гепатитами.

Поставленная задача решается путем культивирования цельной гепаринизированной крови с тестируемыми препаратами, определения количества SH-групп амперометрическим титрованием раствора нитрата серебра и выбора оптимального препарата по определению наибольшего соотношения SH-/SS-групп в пределах 2,6-4 и определения SS-групп только на основании падения тока после внесения сульфита натрия, а также определения SH- и SS-групп в одной и той же пробе. Культивирование крови проводят в течение 1 ч при температуре 37^oС, причем введение тестируемого препарата в кровь осуществляют в дозе, соответствующей 1:5000 от терапевтической.

Основными отличиями заявляемого способа от прототипа являются: 1) определение SS- и SH-групп, в одной и той же пробе; 2) SS-группы определяют после внесения сульфита натрия, по падению токового сигнала; 3) выбор препарата проводят по оптимальному соотношению SH/SS в пределах от 2,6 до 4.

В основу способа были положены свойства тиоловых соединений крови, характеризующие их высокую реакционную способность и чувствительность к воздействию на организм факторов различной этиологии, связанных с заболеваниями организма, и, следовательно, препараты, способные их нормализовать, являются наиболее эффективными для лечения.

SS-группы определяют без применения обратного титрования после внесения в пробу восстановителя (Na₂SO₃), в результате чего образуются SH-группы, которые реагируют с известным избытком ионов серебра, что приводит к падению токового сигнала, по величине которого рассчитывается количество вновь образовавшихся SH-групп.

Выбор препарата осуществляют по оптимальному соотношению SH/SS в пределах 2,6-4, т.к. выбранные значения соответствуют нормальному коэффициенту SH/SS здоровых лиц.

Способ осуществляется следующим образом.

К 1 мл цельной гепаринизированной крови, взятой из периферической вены, добавляют тестируемые препараты в необходимых дозах (дозировка in vitro рассчитывается исходя из 1: 5000 от терапевтической), в контрольную пробирку добавляется растворитель, смеси инкубируют 1 ч при температуре около 37^oС. Затем кровь разливают по 1 мл в необходимое количество пробирок (обычно 7-9), которое зависит от количества тестируемых препаратов и их доз. В каждую пробирку добавляют тестируемые препараты в необходимых дозах (дозировка in vitro рассчитывается исходя из 1:5000 от терапевтической), в контрольную пробирку добавляется растворитель, смеси инкубируют в термостате 1 ч при t= 37^oC. После инкубации пробирки центрифугируют 5-7 мин при 800 об/мин, после чего плазму удаляют. Затем клеточную фракцию крови гемолизируют в 0,1% растворе Трилона “Б” (рН 7,0): 1 часть клеток крови и 19 частей раствора смешивают, помещают в холодильник (4-5^oС) и через 30 мин центрифугируют для осаждения разрушенных клеток в течение 15 мин при 6000 об/мин. Надосадочную жидкость (гемолизат) используют в работе.

Определение SS- и SH-групп проводят на устройстве АТА-1. В сосуд для титрования вносят 15 мл аммиачного буфера, помещают на магнитную мешалку и опускают в него электрохимический датчик, включают мешалку. Дозатором отмеривают в сосуд 0,2 мл гемолизата и после появления сигнала на АЦП прибора (аналого-цифровой преобразователь) через 1-2 с начинают титрование, добавляя по 0,05 мл 110^-3 М AgNО₃. Сигнал устанавливается через 1-2 с и его записывают. После нахождения точки перегиба продолжают добавлять AgNО₃ до 0,2 мл и фиксируют величину сигнала по АЦП, по количеству затраченного на титрование раствора азотнокислого серебра рассчитывают содержание SH-групп.

SS-группы определяют в той же пробе, что и SH-групп, не применяя метода обратного амперометрического титрования. В емкость для титрования вносят 150 мг сульфита натрия, и через 10-20 с, когда на АЦП установится постоянная величина токового сигнала, записывают его величину, по разности между показателями токового сигнала при известном избытке серебра и после внесения Na₂SO₃ определяют количество мл азотнокислого серебра, вступившего в реакцию с восстановлением SH-группами. Полученный результат делят на 2, определяют количество SS-групп в пробе.

Пример 1
Выписка из амбулаторной карты 12837. Больной С., 43 лет, инженер, обратился в поликлиническое отделение ГИБ 30 им. С.П. Боткина в феврале 1999 года по поводу обострения хронического вирусного гепатита В. На момент обследования жалобы на слабость, тяжесть в правом подреберье, периодическое изменение цвета мочи. Установлено, что с 1997 года страдает хроническим вирусным гепатитом В с периодическими обострениями. При биохимическом обследовании выявлено повышение АЛТ (138 Ед/л) и билирубина (29 мкмоль/л), при нормальных коллоидных пробах (тимоловая проба 1,7 ед, сулемовый титр 1,5 мл), уровень протромбина и белковых фракций не отличался от показателей у здоровых лиц. При иммуносерологическом обследовании обнаружены основные маркеры гепатита В (HBsAg+), PCR HBV +. Диагноз: Хронический гепатит В (HBsAg+), репликативная фаза, с умеренной активностью.

Первоначальное определение чувствительности к противовирусным препаратам выявило снижение коэффициента SH/SS до 1,2 при норме от 2,6 до 4,0. При нагрузке противовирусными препаратами (реаферон, циклоферон, неовир, олифен) значения коэффициента SH/SS составил от 1,6 до 2,8. Выбрана доза препарата реаферон, максимально приближенная к оптимальным значениям коэффициента (2,8). Назначена терапия реафероном в дозе 2 млн. Ед 3 раза в нед., которую больной получал в течение 3 месяцев. На фоне лечения состояние больного улучшилось, жалоб нет. При обследовании: АЛТ 30 е/л, билирубин 15 мкмоль/л, PCR HBV – отрицательный.

Пример 2
Выписка из амбулаторной карты 938. Больной В., 37 лет, не работает, обратился в поликлиническое отделение ГИБ 30 им. С.П. Боткина с жалобами на слабость, периодически возникающую тяжесть в правом подреберье. Страдает хроническим вирусным гепатитом В с 1999 года, лечился стационарно в ГИБ 30 им. С.П. Боткина, наблюдался в поликлинике. При биохимическом обследовании: АЛТ 150 е/л, билирубин 25 мкмоль/л, тимоловая проба 2,4 ед, сулемовый титр 1,6 мл, протромбин 94%, протеинограмма: альб. – 64,8%, глоб. ₁-3,1%, ₂ – 5,7%, – 7,3%, – 17,2%. При иммуносерологическом обследовании обнаружены HBsAg+, PCR HBV+, HBeAg+. Диагноз: Хронический гепатит В (HBsAg+), репликативная фаза.

Первоначальное определение чувствительности к противовирусным препаратам выявило снижение коэффициента SH/SS до 1,5. При нагрузке противовирусными препаратами (реаферон, циклоферон, неовир, олифен) значения коэффициента SH/SS составили от 1,0 до 2,9. Выбрано значение коэффициента SH/SS ниже оптимального значения (1,9) и назначена терапия реафероном в дозе 1 млн. Ед 3 раза в нед. в течение 3 месяцев. На фоне лечения состояние больного не улучшилось, сохраняются жалобы на слабость, на первые три инъекции препарата отмечал развитие гриппоподобной симптоматики (лихорадку до 38^oС, ломоту во всем теле). При обследовании: АЛТ 140 е/л, билирубин 12 мкмоль/л, PCR HBV+.

Пример 3
Выписка из амбулаторной карты 26937. Больной К., 35 лет, обратился по поводу хронического гепатита C с жалобами на периодически тяжесть в правом подреберье. Страдает хроническим вирусным гепатитом C с 1998 года, лечился стационарно в ГИБ 30 им. С.П. Боткина, наблюдался в поликлинике. При обследовании: АЛТ 188 е/л, билирубин 23 мкмоль/л, тимоловая проба 1,8 ед, сулемовый титр 1,5 мл, протромбин 96%, протеинограмма: альб. – 62,5%, глоб. ₁-2,6%, ₂ – 5,9%, – 6,9%, – 15,1%. PCR HCV+, HCV Ab+. Диагноз: Хронический гепатит С (HCV Ab+), репликативная фаза, с умеренной активностью.

Первоначальное определение чувствительности к противовирусным препаратам выявило снижение коэффициента SH/SS до 1,7 при норме от 2,6 до 4,0. При нагрузке противовирусными препаратами (реаферон, циклоферон, неовир, олифен) значения коэффициента SH/SS составил от 1,2 до 3,2. Выбрана доза препарата олифен, коэффициент при инкубации с которым максимально приблизился к нормальным значениям (3,2). Назначена терапия олифеном по схеме в течение 6 месяцев. На фоне лечения состояние больного улучшилось, жалоб нет. При обследовании: АЛТ 36 е/л, билирубин 17 мкмоль/л, PCR HCV – отрицательный.

Пример 4
Выписка из истории болезни 18395. Больной А., 22 лет, учащийся, поступил в ГИБ 30 им. С.П. Боткина в связи с выявленным повышением АЛТ. Жалоб нет. При обследовании: АЛТ 215 е/л, билирубин 25 мкмоль/л, тимоловая проба 6,8 ед, сулемовый титр 1,4 мл, протромбин 98%, протеинограмма: альб. – 66,2%, глоб. ₁-3,1%, ₂– 6,9%, – 7,8%, – 18,0%. PCR HCV +, HCV Ab +. Диагноз: Острый вирусный гепатит С (HCV Ab+), безжелтушная форма.

Первоначальное определение чувствительности к противовирусным препаратам выявило снижение коэффициента SH/SS до 1,5. При нагрузке противовирусными препаратами (реаферон, циклоферон, неовир, олифен) значения коэффициента SH/SS составили от 0,8 до 2,6. Выбрана доза препарата циклоферон, максимально приближенная к нормальным значениям коэффициента (2,6). Назначена терапия циклофероном по схеме в течение 6 месяцев. На фоне лечения отмечалась нормализация биохимических показателей: АЛТ 26 е/л, билирубин 12 мкмоль/л, PCR HCV – отрицательный.

Пример 5
Выписка из амбулаторной карты 13951, Больной М., 30 лет, обратился в поликлиническое отделение ГИБ 30 им. С.П. Боткина с жалобами на слабость, периодически тяжесть в правом подреберье, темную мочу. Страдает хроническим вирусным гепатитом В с 1996 года, лечился стационарно в ГИБ 30 им. С.П. Боткина, затем наблюдался в поликлинике; в последнее время состояние ухудшилось – появились слабость, тяжесть в правом подреберье, темная моча.

Диагноз: Острый вирусный гепатит С (HCV Ab+), легкое течение, на фоне хронического вирусного гепатита В (HBsAg+). При обследовании: АЛТ 160 е/л, билирубин 40 мкмоль/л, тимоловая проба 2,7 ед, сулемовый титр 1,6 мл, протромбин 100%, протеинограмма: альб. – 67,1%, глоб. ₁-2,8%, ₂– 5,8%, – 7,9%, – 16,4%. PCR HCV +, HCV Ab +, HBsAb +, HBcor Ab+. На УЗИ: диффузные изменения печени, гепатоспленомегалия.

Первоначальное определение чувствительности к противовирусным препаратам выявило снижение коэффициента SH/SS до 1,3 при норме от 2,6 до 4,0. При нагрузке противовирусными препаратами (реаферон, циклоферон, неовир, олифен) значения коэффициента SH/SS составили от 0,7 до 5,3. Выбрана такая доза препарата реаферон, значения коэффициента при инкубации с которым оказались максимально приближенными к нормальным значениям коэффициента (3,5). Назначена терапия реафероном по 3 млн. Ед 3 раза в нед. в течение 3 месяцев. На фоне лечения состояние больного значительно улучшилось, жалоб не предъявляет. При обследовании: АЛТ 42 е/л, билирубин 16 мкмоль/л, PCR HCV – отрицательный.

Пример 6
Выписка из амбулаторной карты 15392. Больной В., 25 лет. Анамнез заболевания: хронический вирусный гепатит C с 1997 года, перенес вирусный гепатит А три месяца назад, лечился стационарно в ГИБ 30 им. С.П. Боткина, однако до момента обращения сохраняется повышение АЛТ, на УЗИ выявлены диффузные изменения печени, гепатоспленомегалия. При обследовании: АЛТ 168 е/л, билирубин 23 мкмоль/л, тимоловая проба 3,6 мкмоль/л, сулемовый титр 1,4 мл, протромбин 98%, протеинограмма: альб. – 64,4%, глоб. ₁-3,2%, ₂– 7,8%, – 8,4%, – 16,3%. PCR HCV+, HCV Ab+, HAV IgM+. Диагноз: Острый гепатит А (HAV IgM +), период поздней реконвалесценции, на фоне хронического вирусного гепатита С (HCV Ab+), активная фаза.

Первоначальное определение чувствительности к противовирусным препаратам выявило снижение коэффициента SH/SS до 1,4. При нагрузке противовирусными препаратами (реаферон, циклоферон, неовир, олифен) значения коэффициента SH/SS составили от 1,2 до 3,6. Выбран препарат неовир, при нагрузке с которым коэффициент максимально приблизился к нормальным значениям (3,6). Назначена терапия неовиром в стандартной дозе внутримышечно 3 раза в нед. в течение 3 месяцев. На фоне лечения отмечалась нормализация биохимических показателей: АЛТ 28 е/л, билирубин 12 мкмоль/л, PCR HCV – отрицательный.

Пример 7
Выписка из амбулаторной карты 20681. Больной П., 28 лет, обратился с жалобами на слабость, отсутствие аппетита, тяжесть в правом подреберье, темную мочу. Анамнез заболевания: заболел в сентябре 2000 года, лечился стационарно в ГИБ 30 им. С.П. Боткина. Диагноз: Острый вирусный гепатит неверифицированной этиологии. При обследовании: АЛТ 174 е/л, билирубин 22 мкмоль/л, тимоловая проба 3,1 ед, сулемовый титр 1,6 мл, протромбин 100%, протеинограмма: альб. – 65,3%, глоб. ₁-3,4%, ₂– 8,1%, – 6,6%, -17,6%. HAV IgM -, HBsAg -, HCV Ab -, HBcor Ab -, HBe Ab -, HBs Ab -, HBeAg -, PCR HCV и HBV – отрицательные.

Первоначальное определение чувствительности к противовирусным препаратам выявило снижение коэффициента SH/SS до 1,3 при норме от 2,6 до 4,0. При нагрузке противовирусными препаратами (реаферон, циклоферон, неовир, олифен) значения коэффициента SH/SS составили от 1,1 до 5,8. Выбран препарат олифен, при нагрузке с которым коэффициент был выше своих оптимальных значениий (5,8). Назначена терапия олифеном по схеме в течение 3 месяцев.

На фоне лечения состояние больного улучшилось, жалоб не предъявляет, однако значения АЛТ оставались повышенными (132 ед/л), увеличились значения билирубина – 52 мкмоль/л, в связи с чем препарат был отменен.

Пример 8
Выписка из амбулаторной карты 12694. Больной Н., 40 лет, обратился с жалобами на периодически тяжесть в правом подреберье. Анамнез заболевания: болен с марта 1996 года, наблюдался в поликлинике. Последнее ухудшение в 2001 году. При обследовании: АЛТ 180 е/л, билирубин 28 мкмоль/л, тимоловая проба 2,9 ед, сулемовый титр 1,4 мл, протромбин 94%, протеинограмма: альб. – 67,2%, глоб. ₁-2,8%, ₂– 5,8%, – 9,2%, – 17,8%. HAV IgM -, HBsAg -, HCV Ab -, HBcor Ab -, HBe Ab -, HBs Ab -, HBeAg -, PCR HCV и HBV – отрицательные. Диагноз: Хронический вирусный гепатит неверифицированной этиологии.

Первоначальное определение чувствительности к противовирусным препаратам выявило снижение коэффициента SH/SS до 1,2 при норме от 2,6 до 4,0. При нагрузке противовирусными препаратами (реаферон, циклоферон, неовир, олифен) значения коэф. SH/SS составили от 0,7 до 3,8. Выбран препарат циклоферон, при нагрузке с которым коэф. максимально приблизился к нормальным значениям (3,8). Назначена терапия циклофероном по стандартной схеме в течение 3 месяцев. На фоне лечения состояние больного улучшилось, жалоб нет. При обследовании: АЛТ 27 е/л, билирубин 16 мкмоль/л.

Пример 9
Выписка из истории болезни 15392. Больной В., 25 лет. Анамнез заболевания: перенес вирусный гепатит А в январе 2001 года, лечился стационарно в ГИБ 30 им. С.П. Боткина, был выписан в удовлетворительном состоянии с хорошей динамикой биохимических показателей. Через 2 недели состояние ухудшилось – появилась слабость, тяжесть в подреберье, темная моча, желтушность склер, госпитализирован повторно. При обследовании: АЛТ 178 е/л, билирубин 42 мкмоль/л, тимоловая проба 4,6 мкмоль/л, сулемовый титр 1,4 мл, протромбин 96%, протеинограмма: альб. – 65,4%, глоб. ₁-2,2%, ₂– 6,8%, – 7,4%, – 16,3%. HAV IgM – положительный. Диагноз: Острый гепатит А (HAV IgM +), затяжное рецидивирующее течение.

Первоначальное определение чувствительности к противовирусным препаратам выявило снижение коэффициента SH/SS до 1,4 при норме от 2,6 до 4,0. При нагрузке противовирусными препаратами (реамберин, циклоферон, неовир, олифен) значения коэффициента SH/SS составили от 1,2 до 3,3. Выбран препарат реамберин, при нагрузке с которым коэф. максимально приблизился к нормальным значениям (3,3). Назначена терапия реамберином по 400,0 мл в течение 10 дней. На фоне лечения отмечалась быстрая нормализация клинико-лабораторных показателей: АЛТ 26 е/л, билирубин 11 мкмоль/л, после отмены препарата исчезла желтуха кожи и склер.

Примеры по способу-прототипу:
Пример 10
Выписка из амбулаторной карты 1238. Больной Т-в В.В., 31 год. Обратился в октябре 1999 года. При обследовании в поликлинике выявлены HCV АВ(+), АЛТ 15 ед/л, билирубин 25 мкмоль/л, тимоловая проба 1,7 ед., сулемовый титр 1,5 мл, ПЦР HCV (+). До настоящего времени наблюдался в поликлинике, соблюдал диету, в прошлом получал курс ВИФЕРОНА без эффекта, (ПЦР HCV оставалась положительной). Жалоб активно не предъявляет, при активном расспросе выявлены жалобы на периодически возникающую тяжесть в правом подреберье после физической нагрузки, горечь во рту. Состояние при осмотре удовлетворительное, желтухи кожи и склер нет, периферические лимфоузлы мелкие, безболезненные. Пульс 72 в минуту, ритмичный, тоны сердца ясные. Язык влажный, негусто обложен, печень пальпаторно выступает из-под края реберной дуги на 2 см, селезенка не пальпируется. При УЗИ брюшной полости обнаружены гепатомегалия, диффузные изменения печени. Диагноз: хронический гепатит С, репликативная фаза с умеренной активностью.

Проведено тестирование крови пациента для выявления чувствительности к противовирусным препаратам: коэффициент SH/SS в контроле составил 1,2, к реаферону в дозе 0,5 мл – 0,6, в дозе 1,0 мл – 2,0, в дозе 2,0 мл – 1,2. Согласно методике по способу-прототипу выбран препарат с коэф. SH/SS, максимально приближенным к 3. Выявлена чувствительность к реаферону в дозе 1,0 мл. Получал препарат в указанной дозе в течение месяца 3 раза в неделю. Побочных эффектов не выявлено. Через месяц от начала терапии билирубин 22 мкмоль/л, АЛТ – 64 ед/л, улучшение самочувствия не наблюдалось.

Проведено повторное тестирование: коэффициент SH/SS в контроле составил 2,0, к реаферону в дозе 0,5 мл – 3,6, в дозе 1,0 мл – 2,8, в дозе 2,0 мл – 1,2. Согласно нашему способу выявлена чувствительность к реаферону в дозе 0,5 мл, больной получал этот препарат 3 раза в неделю в течение полугода. При очередном обследовании: ПЦР HCV(-), АЛТ 41 ед/л, жалоб не предъявляет, инъекции препарата переносит хорошо. Печень +2 см, селезенка не пальпируется. Обследован через полгода после окончания курса терапии, сохраняется АЛТ 39 ед/л, ПЦР HCV(-), умеренная гепатомегалия. Зарегистрирована стойкая ремиссия ХГС.

Пример 11
Выписка из амбулаторной карты 3674. Больная Д-а И.Ф., 32 года. Обратилась в феврале 2000 года. HBs Ag (+) выявлен около полугода назад при обследовании по контакту с мужем, больным ХГВ. Жалоб на момент осмотра не предъявляет. В прошлом получала неовир в течение 2-х месяцев без значительного эффекта: ПЦР HBV(+), сохранялась гипертрансфераземия. АЛТ 87 ед/л, билирубин 23 мкмоль/л, тимоловая проба 3,6 ед, сулемовый титр 2,0 мл, ПЦР HBV (+). Состояние при осмотре удовлетворительное, желтухи кожи и склер нет. Сосудистых звездочек нет. Пульс 65 в минуту, ритмичный, тоны сердца ясные. Язык влажный, обложен беловатым налетом, печень пальпаторно выступает из-под края реберной дуги на 2-3 см, селезенка не пальпируется. Диагноз: Хронический вирусный гепатит В (HBsAg+), репликативная фаза.

При тестировании крови пациентки для выявления чувствительности к противовирусным препаратам получены следующие результаты: коэффициент SH/SS в контроле составил 1,3, к реаферону в дозе 0,5 мл – 1,9, в дозе 1,0 мл – 1,8, в дозе 2,0 мл – 1,2. Согласно методике по способу-прототипу выбран препарат с коэф. SH/SS, максимально приближенным к 3. Назначен реаферон в дозе 0,5 млн, который пациентка получала 3 раза в неделю внутривенно в течение первого месяца. Побочных реакций на введение препарата не отмечалось. При обследовании через месяц от начала терапии жалоб нет, АЛТ 55 ед/л, ПЦР HBV (+). Сохраняется гепатомегалия.

При повторном тестировании коэффициент SH/SS в контроле составил 1,5, к реаферону в дозе 0,5 мл – 2,0, в дозе 1,0 мл – 2,8, в дозе 2,0 мл – 3,6. Согласно нашему способу выявлена чувствительность к реаферону 2,0 млн и больная продолжала его введение в такой дозе в течение следующих 6 месяцев. Через 6 месяцев жалоб не предъявляет, печень увеличена до 2 см, желтухи нет, инъекции препарата переносит хорошо. АЛТ 39 ед/л, ПНР HBV (-), зарегистрирована стабильная ремиссия.

Нами было проведено сопоставление эффективности предложенной нами методики определения индивидуальной чувствительности при терапии препаратами ИФН в различных дозах (1 млн, 2 млн, 3 млн), а также индукторами интерферона у 31 больного с корректировкой в ходе лечения, и терапии по способу-прототипу у 26 пациентов. ИФН назначался 3 раза в неделю внутривенно, Неовир и Циклоферон – внутримышечно, через день по прерывистой схеме. Курс лечения у всех пациентов составил 6 месяцев. У больных, получавших ИФН (n=16) в дозе, предложенной по способу-прототипу, ремиссия отмечалась у 56,3% больных. Сохранение нормальных значений АЛТ и отсутствие РНК вируса в крови после терапии индукторами ИФН (n=10) отмечено лишь у 40% пациентов. Таким образом, положительного эффекта при лечении ХГС при назначении препаратов по способу-прототипу удалось добиться в 50% наблюдений.

При назначении терапии противовирусными препаратами по заявленному способу % положительных исходов оказался выше и составил 58%. В случае назначения ИФН (n=26) в 38,5% выявлена только негативация ПЦР, а в 19,2% – лишь нормализация АЛТ. Ремиссия выявлена в 57,8% случаев, у одного пациента наблюдалась реверсия РНК в крови. У пациентов, получавших индукторы ИФН (n=5), сохранение нормальных значений АЛТ и отсутствие РНК вируса в крови отмечено у 60% пациентов, у одного больного через месяц после отмены препарата вновь стала выявляться РНК вируса гепатита С.

Таким образом, использование заявляемого индивидуального подбора терапии позволяет повысить эффективность лечения, в ряде случаев снизить его стоимость, а также уменьшить число побочных эффектов.

Как показали проведенные эксперименты, предлагаемый способ является достаточно универсальным, позволяя тестировать препараты для лечения всех вирусных гепатитов. Срок скрининга оптимального препарата и его дозы составляет 2-3 ч по заявленному способу, по способу-прототипу – 3-4 ч, следовательно время проведения способа сокращается на 1 ч.

Проведение определения SH- и SS-групп в одной пробе, исключение обратного амперометрического титрования SS-групп намного упрощает общий способ определения тиолсульфатного равновесия, позволяет стандартизировать метод и рекомендовать промышленное использование.

Формула изобретения

Способ индивидуального подбора лекарственных препаратов для лечения больных этиологически различными острыми и хроническими вирусными гепатитами, включающий в себя культивирование цельной гепаринизированной крови в течение 1 ч при 37°С с тестируемыми препаратами, вводимыми в кровь в дозе, соответствующей 1 : 5000 от терапевтической, определение соотношения SH/SS-групп в крови больного после культивирования, определение количества SH-групп амперометрическим титрованием раствора нитрата серебра и выбор оптимального препарата по определению наибольшего соотношения SH/SS-групп, отличающийся тем, что определение SH и SS-групп осуществляют в одной и той же пробе, а наибольшее соотношение SH и SS-групп определяют в пределах 2,6-4, и определение SS-групп осуществляют только на основании падения тока после внесения сульфита натрия.

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 25.04.2004

Извещение опубликовано: 20.05.2006 БИ: 14/2006