Патент на изобретение №2217762

(54) СПОСОБ ОЦЕНКИ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ НОВОРОЖДЕННЫХ ПРИ ВНУТРИУТРОБНОЙ ИНФЕКЦИИ

(57) Реферат:

Изобретение относится к медицине, в частности к неонатологии. Способ позволяет повысить точность оценки эффективности лечения внутриутробных инфекций у новорожденного. Проводят исследование его периферической крови, при этом в периферической крови определяют концентрацию лактата до и после лечения и при снижении концентрации лактата относительно исходного уровня, превышающего норму, лечение оценивают как эффективное, а при отсутствии снижения или увеличения его концентрации – как неэффективное. 1 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к неонатологии и позволяет оценить эффективность лечения у доношенных, и недоношенных (в срок гестации 28-37 недель) новорожденных с внутриутробной инфекцией.

В последние годы отмечается рост частоты внутриутробных инфекций новорожденных [5, 7] с 5,3% до 27,4% [9, 6]. В структуре причин смертности новорожденных внутриутробные инфекции составляют 22-52% [3, 8]. Одна из причин высокого уровня смертности новорожденных при внутриутробных инфекциях – отсутствие быстрых, достаточно точных способов оценки эффективности проводимого лечения. В связи с этим разработка критериев оценки эффективности лечения является актуальной.

Известен способ диагностики и оценки эффективности лечения внутриутробных инфекций у новорожденных путем микробиологического посева пуповинной крови для обнаружения микроорганизмов [2] . Материал высевают на плотную питательную среду. После появления колоний микроорганизмов подсчитывают их количество и делают перерасчет на содержание микробных тел в 1 мл пробы.

Недостатки данного способа:
1. Оценка результата исследования возможна через 72 часа.

2. Сам факт выделения микроорганизмов еще не свидетельствует о внутриутробной инфекции, так как те же самые микроорганизмы выделяют и при обследовании здоровых новорожденных.

3. Точность способа отсутствует.

Известен способ диагностики и оценки эффективности лечения внутриутробной инфекции у новорожденных в периферической крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) [11]. Метод основан на выявлении фрагмента ДНК или РНК возбудителя инфекции.

Недостатки данного способа:
1. Исследования проводят в специализированной лаборатории.

2. Длительность проведения анализа 5 часов.

3. Точность способа отсутствует.

Известен способ диагностики и оценки эффективности лечения внутриутробной инфекции у новорожденных путем определения иммуноглобулинов G (IgG) в сыворотке венозной крови методом нефелометрии и по Манчини [1]. По изменению содержания IgG в сыворотке крови относительно исходного уровня оценивают эффективность лечения. При увеличении концентрации IgG с 1,160,08 о.с. до 1,190,05 о.с. и выше лечение оценивалось как эффективное.

Недостатки данного способа:
1. С помощью данного способа выявляется только герпетическая инфекция.

2. Существование больших колебаний показаний Ig G у новорожденных.

3. При рождении титр антител может находиться в пределах нормы и нарастать в течении 7-10 дней.

4. Точность способа отсутствует.

У новорожденных часто имеет место сочетание бактериальной и вирусной инфекции, ТОRСН-инфекций. В этих случаях для оценки эффективности лечения необходимо проведение реакций с различными высокоспецифичными моноклональными антителами или антигенами. У таких новорожденных невозможно оценить эффективность лечения по одному параметру.

Наиболее близким по техническому решению является способ оценки эффективности лечения внутриутробной инфекции у новорожденных путем исследования содержания в периферической крови количества лейкоцитов (10). Независимо от вида возбудителя при снижении содержания лейкоцитов до 2510 ⁹/л, но не менее 410 ⁹/л лечение оценивают как эффективное с точностью 63,3%.

Недостатки данного способа:
1. Исследуемые показатели могут оставаться в пределах нормальных величин даже при генерализованной гнойно-септической инфекции у детей.

2. Количество лейкоцитов в крови зависит от дня жизни ребенка.

3. Точность способа 63,3%.

Указанные недостатки предлагается устранить в заявляемом способе. Техническим результатом данного изобретения является оценка эффективности лечения внутриутробной инфекции у новорожденных путем определения исходной концентрации лактата (до лечения) и после лечения на 7-е сутки жизни в цельной периферической крови. При снижении содержания лактата относительно исходного уровня (исходный уровень лактата (от 2,0 до 8,0 ммоль/л) при ВУИ у новорожденных установлен заявителями в лаборатории клинической биохимии на основании обследования 100 детей в детском реанимационном отделении и в детском обсервационном отделении Ивановского НИИ материнства и детства МЗ РФ им. В. Н. Городкова), превышающего норму (уровень лактата 1,80,2 ммоль/л оценивается нами как показатель нормы и установлен заявителями в лаборатории клинической биохимии на основании обследования 100 детей в отделении физиологии новорожденных и в отделении выхаживания недоношенных детей Ивановского НИИ материнства и детства МЗ РФ им. В.Н. Городкова), лечение оценивается как эффективное. При отсутствии снижения или при увеличении концентрации лактата лечение оценивается как неэффективное с точностью 97,5%.

Способ осуществляется следующим образом. У ребенка забирают кровь из пятки. Концентрацию лактата в крови определяют по стандартной методике прибором “Accutrend 1асtаtе” (“Accusport”) фирмы “Roche”: тест-полоску “ВМ-Lасtаtе” вводят в желоб измерительного поля прибора, одну каплю крови наносят на желтую подушечку тест-полоски, закрывают крышку измерительного отделения прибора. Через 60 секунд результаты измерения появляются на дисплее. Концентрация лактата выражается в ммоль/л. Метод является количественным и результаты читаются в интервалах 0,7; 0,8; 0,9; 1,0; 1,1 и так далее до 26. Тест-полоски стандартизированы фирмой – изготовителем. Длительность постановки реакции 1 минута.

Отличительные признаки способа: предлагается оценивать эффективность лечения внутриутробной инфекции у новорожденного путем определения концентрации лактата в крови до и после лечения. При снижении содержания лактата относительно исходного уровня (2,0-8,0 ммоль/л) до нормы (1,80,2 ммоль/л) лечение оценивается как эффективное, при отсутствии снижения или при увеличении концентрации лактата – как неэффективное.

Новизна способа заключается в том, что впервые предлагается оценивать эффективность лечения внутриутробных инфекций у новорожденных по изменению содержания лактата в крови относительно исходного уровня. Кроме того, установлены уровни лактата при внутриутробных инфекциях – от 2,0 до 8,0 ммоль/л.

Лактат – конечный продукт анаэробного гликолиза, образующийся в результате восстановления пировиноградной кислоты (4). Уровень лактата для доношенных новорожденных известен и составляет 1,80,2 ммоль/л, для недоношенных в сроке гестации 28-37 недель этот показатель установлен впервые. Для оценки эффективности лечения внутриутробных инфекций у новорожденных данный показатель используется впервые.

Диагноз внутриутробной инфекции у новорожденных верифицирован клиническим обследованием ребенка и лабораторными данными: общий анализ крови, иммуноферментный анализ (ИФА), полимеразная цепная реакция (ПЦР). Эффект лечения подтвержден нормализацией клинического состояния ребенка, данными ИФА и ПЦР.

Существо способа поясняется следующими примерами.

Пример 1.

Новорожденный Ч., срок гестации 28-29 недель, родился с оценкой по шкале Апгар 3-5 баллов и массой тела 1500 г. На основании клинических данных (состояние средней тяжести, бледность кожных покровов, неврологическая симптоматика, нарушение ритма и частоты дыхания), данных ИФА и ПЦР поставлен диагноз: Внутриутробная инфекция (стрептококк А, герпес II).

Согласно предлагаемому способу в крови новорожденного в первые сутки жизни проведено исследование содержания лактата, которое составило 4,3 ммоль/л (при норме 1,80,2 ммоль/л).

По способу-прототипу проведено исследование содержания лейкоцитов в крови новорожденного, которое составило 14,610⁹/л (при норме на 1-й день жизни 9-3010⁹/л).

Через 7 дней после начала лечения отмечалось улучшение клинического состояния ребенка. Согласно предлагаемому способу в крови новорожденного проведено исследование содержания лактата, которое составило 2,7 ммоль/л. Заключение: лечение оценено как эффективное. По способу-прототипу содержание лейкоцитов в крови составило 8,010⁹/л (при норме на 7-й день жизни 5-2010⁹ /л). Заключение: лечение оценено как эффективное.

При выписке из стационара содержание лактата и лейкоцитов в крови новорожденного соответствовало норме – 2,0 ммоль/л и 6,010⁹/л соответственно.

Таким образом, согласно предлагаемому способу лечение оценено как эффективное, согласно способу-прототипу лечение оценено также как эффективное.

Пример 2.

Новорожденный К., срок гестации 39-40 недель, родился с оценкой по шкале Апгар 3-4 балла и массой тела 3200 г. На основании клинических данных (состояние средней тяжести, бледность кожных покровов, неврологическая симптоматика, нарушение ритма и частоты дыхания), данных ИФА и ПЦР поставлен диагноз: Внутриутробная инфекция (цитомегаловирус, ток-соплазма).

Согласно предлагаемому способу в крови новорожденного в первые сутки жизни проведено исследование содержания лактата, которое составило 5,0 ммоль/л (при норме 1,80,2 ммоль/л). По способу-прототипу проведено исследование содержания лейкоцитов в крови новорожденного, которое составило 10,010⁹/л (при норме на 1-й день жизни 9-3010⁹/л).

Через 7 дней после начала лечения отмечалось улучшение клинического состояния ребенка. Согласно предлагаемому способу в крови новорожденного проведено исследование содержания лактата, которое составило 2,0 ммоль/л, что соответствует норме. Заключение: лечение оценено как эффективное. По способу-прототипу содержание лейкоцитов в крови составило 7,310⁹/л (при норме на 7-й день жизни 5-2010⁹/л). Заключение: лечение оценено как не эффективное.

Таким образом, согласно предлагаемому способу лечение оценено как эффективное, что подтверждается данным ИФА, ПЦР, а также клиническими данными. По способу-прототипу лечение оценено как неэффективное.

Пример 3.

Новорожденный С., срок гестации 33-34 недели, родился с оценкой по шкале Апгар 5-6 баллов и массой тела 2000 г. На основании клинических данных (состояние средней тяжести, бледность кожных покровов, неврологическая симптоматика, нарушение ритма и частоты дыхания), данных ИФА и ПЦР поставлен диагноз: Внутриутробная инфекция (стрептококк А, хламидиоз).

Согласно предлагаемому способу в крови новорожденного в первые сутки жизни проведено исследование содержания лактата, которое составило 4,8 ммоль/л (при норме 1,8 ммоль/л). По способу-прототипу проведено исследование содержания лейкоцитов в крови новорожденного, которое составило 8,510⁹/л (при норме на 1-й день жизни 9-3010⁹/л).

Через 7 дней после начала лечения отмечалось ухудшение клинического состояния ребенка. Согласно предлагаемому способу в крови новорожденного проведено исследование содержания лактата, которое составило 4,9 ммоль/л. Заключение: лечение оценено как неэффективное. По способу-прототипу – содержание лейкоцитов в крови составило 5,610⁹/л (при норме на 7-й день жизни 5-2010⁹/л). Заключение: лечение оценено как эффективное. На двенадцатый день жизни ребенок умер.

Таким образом, согласно предлагаемому способу лечение оценено как неэффективное, по способу-прототипу лечение оценено как эффективное.

Точность способа оценки эффективности лечения внутриутробных инфекций у новорожденных по заявляемому способу:
.

Точность способа оценки эффективности лечения внутриутробных инфекций у новорожденных по способу-прототипу:
.

( см. таблицу),
Преимущества способа:
1. Точность предлагаемого способа 97,5%.

2. Для применения данного способа не требуется дорогостоящего оборудования и специальной подготовки персонала.

3. Исследование содержания лактата может быть проведено средним лаборантом в лечебно-профилактических учреждениях всех уровней.

4. Продолжительность выполнения исследований 1 минута.

5. Исследуется малый объем крови (1 капля).

6. Исследование может быть проведено независимо от времени суток, биоритмов, пола и дня жизни новорожденного.

7. Предлагаемый метод может быть использован как скрининг для контроля за лечением внутриутробных инфекций у новорожденных.

Источники информации

4. Бышевский А.Ш., Терсенов О.А. Биохимия для врача. – Екатеринбург. – 1994. – 384 с.

7. Пак Т.А. Лечение бактериальных инфекций у новорожденных высокого риска антибиотиками резерва./ Перинатология. – 1997. – 3. – С. 28-31.

8. Пенкина Н. И., Шкляева Е.Ю., Лопатина Л.Н. и др. Внутриутробные инфекции в структуре младенческой смертности. / Материалы III съезда РАСПМ “Проблемы внутриутробной инфекции плода и новорожденного”. М.- 2000. – С. 33-34.

9. Сидорова И.С., Макаров И.О., Галунин А.П. и др. Особенности течения беременности и исходы родов при внутриутробной инфекции плода./ Рос. вестник перинатол. и педиатр. -1997. – 1. – С. 15-20.

10. Федорова Н.В., Серов В.Н., Стрижаков А.Н. и др. Внутриутробные инфекции./ Вестник Рос. асе. акушеров-гинекологов. – 1997. – 2. – С. 89-99.

Формула изобретения

Способ оценки эффективности лечения внутриутробных инфекций у новорожденного путем исследования его периферической крови, отличающийся тем, что в периферической крови определяют концентрацию лактата до и после лечения и при снижении концентрации лактата относительно исходного уровня, превышающего норму, лечение оценивают как эффективное, а при отсутствии снижения или увеличения его концентрации – как неэффективное.

РИСУНКИ

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 26.06.2004

Извещение опубликовано: 27.05.2006 БИ: 15/2006