Патент на изобретение №2214269
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ СТИМУЛЯЦИИ ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЙ И РЕПАРАТИВНОЙ РЕГЕНЕРАЦИИ ПЕЧЕНИ
(57) Реферат: Изобретение относится к медицине. Предложен способ стимуляции физиологической и репаративной регенерации печени с использованием трипептида H2N-Gly-L-His-L-Lys-COOH. Изобретение позволяет стимулировать митотическую активность гепатоцитов. 2 ил. Изобретение относится к медицине, а именно к гепатологии, и может быть использовано для стимуляции репаративных процессов в печени при токсических гепатопатиях. Недостатком предложенного способа является то, что авторами дана очень широкая область доз (0,01-100 мкг/кг массы тела) и не предложен конкретный и лучший способ введения. Более того, хотя авторами и отмечается, что предложенный ими пептид можно использовать при нарушении репаративных процессов, вызванных воздействием химических факторов, конкретно не указано можно ли вообще, а если можно, то как использовать данный пептид в условиях токсического поражения печени, когда репаративные процессы, в результате включения компенсаторных механизмов, могут не только нарушаться, но и активироваться (Алексеева И.Н., Брызгана Т.М., Павлович С.И., Ильчевич Н.В. Печень и иммунологическая реактивность. -Киев.: Наук. думка, 1991. -С.34). Задача изобретения – улучшение регенераторной способности печени с целью профилактики или ускорения компенсации деструктивных изменений при токсических поражениях органа. Задача изобретения достигается тем, что экспериментальному животному (крысе, мыши) парентерально (внутрибрюшинно) вводят растворенный в физиологическом растворе (ФР) хлорида натрия трипептид: H2N-Gly-L-His-L-Lys-COOH в дозе 1,5 мкг/кг массы тела, пятикратно, с интервалом в 24 часа между инъекциями. Пептид (в дальнейшем для краткости обозначаемый как Gly-His-Lys) может вводиться как здоровым, так и отравленным животным, как до поступления гепатотропного яда (с профилактической целью), так и во время поступления или после него (с целью ускорения компенсации). При этом морфологические исследования печени свидетельствуют о стимуляции как физиологической (здоровые животные), так и репаративной регенерации гепатоцитов (животные отравленные гепатотропным ядом). На фиг. 1 представлен график, демонстрирующий влияние различных доз пептида Gly-His-Lys на митотическую активность гепатоцитов у здоровых животных. На фиг.2 представлен график, демонстрирующий влияние пептида Gly-His-Lys на митотическую активность гепатоцитов в условиях острой токсической гепатопатии. Способ осуществляется следующим образом. Берут соответствующую навеску трипептида Gly-His-Lys, растворяют его в изотоническом растворе хлорида натрия и разводят до получения необходимой дозы 1,5 мкг/кг массы тела. Вводят внутрибрюшинно в объеме 0,1 мл экспериментальному животному один раз в день, с интервалом в 24 часа на протяжении 5-ти суток. В результате проведенных морфологических исследований печени показано, что пептид в дозе 1,5 мкг/кг массы существенно повышает митотический индекс (МИ) гепатоцитов, что свидетельствует о стимуляции физиологической регенерации печени (фиг.1). В дозе 0,5 мкг/кг пептид не проявлял существенной митотической активности. Применение более высоких доз 50, 150 и 450 мкг/кг не приводит к еще большему повышению МИ по сравнению с группой животных, получавших пептид в дозе 1,5 мкг/кг. Но в больших дозах (50, 150 и 450 мкг/кг) наблюдается развитие дистрофических изменений в печени, нарастающих по мере повышения дозы. Поэтому для стимуляции регенерации гепатоцитов более целесообразно использовать дозу 1,5 мкг/кг массы. Пептид одинаково эффективен в отношении регенерации гепатоцитов как при введении его до развития острой токсической гепатопатии (ОТГ), так и в момент формирования ОТГ или после развития ОТГ. Пример конкретного выполнения. Пример 1. Стимуляция физиологической регенерации печени различными дозами пептида Gly-His-Lys. Крысы Вистар были разделены на группы по 8-10 крыс в каждой. Предлагаемый пептид Gly-His-Lys был синтезирован в НИИ химии Санкт-Петербургского Государственного Университета и вводился животным пятикратно (один раз в сутки) внутрибрюшинно в дозах 0,5; 1,5; 50; 150 и 450 мкг/кг массы. На следующий день после последнего введения крыс забивали обескровливанием под эфирным наркозом, выделяли печень. Кусочки органов фиксировали в 10% нейтральном формалине на 0,1 М фосфатном буфере рН 7,2 и заливали в парафин по общепринятой методике. Из этих органов изготовляли парафиновые срезы, окрашивали гематоксилином и эозином, после чего изучали морфологическую картину органа, подсчитывая количество митозов и вычисляя митотический индекс. Во всех дозах, начиная с дозы 1,5 мкг/кг, пептид повышал МИ практически одинаково, но по мере повышения дозы отмечается развитие дистрофических изменений, особенно выраженных в дозе 450 мкг/кг (фиг. 1). В дозе 1,5 мкг/кг дистрофические изменения не наблюдались. Пример 2. Стимуляция репаративной регенерации печени пептидом Gly-His-Lys в условиях токсической гепатопатии. Крысы Вистар были разбиты на группы по 8-10 крыс в каждой. ОТГ вызывали путем пятикратного (один раз в сутки) внутримышечного введения 50% раствора ТХМ в растительном масле в дозе 3 мл/кг массы, чередуя лапы. Пятидневное введение ТХМ приводит к возникновению среднекапельной вакуольной дистрофии гепатоцитов и повышению МИ (фиг.2). Пептид вводился одновременно с введением ТХМ. В дозе 1,5 мкг/кг массы введение пептида приводило к еще большему повышению МИ. В дозе 150 мкг/кг также наблюдалось повышение МИ по сравнению с группой животных только отравленных ТХМ, но в условиях ОТГ в дозе 150 мкг/кг дистрофические изменения в печени были более выражены по сравнению с дозой 1,5 мкг/кг, что свидетельствует о том, что именно такое количество пептида более целесообразно использовать в условиях токсической гепатопатии. Таким образом, трипептид (H2N-Gly-L-His-L-Lys-COOH) в дозе 1,5 мкг/кг массы тела, введенный пятикратно, с интервалом в 24 часа между инъекциями, может быть использован для стимуляции митотической активности гепатоцитов как с профилактической целью, так и с целью ускорения компенсации пораженного гепатотропным ядом органа. Формула изобретения Способ стимуляции физиологической и репаративной регенерации печени, отличающийся тем, что используют трипептид (H2N-Gly-L-His-L-Lys-COOH) парентерально в дозе 1,5 мкг/г массы один раз в сутки, в течение пяти дней. РИСУНКИ
MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 08.03.2004
Извещение опубликовано: 27.04.2006 БИ: 12/2006
|
||||||||||||||||||||||||||
