Патент на изобретение №2212035

(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОКАЗАНИЙ К ПРОВЕДЕНИЮ ХИМИОТЕРАПИИ ПЕРВИЧНЫМ БОЛЬНЫМ ЛИМФОГРАНУЛЕМАТОЗОМ И РАСПРОСТРАНЕННЫМ РАКОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

(57) Реферат:

Изобретение относится к области медицины, в частности к онкологии. Способ позволяет повысить точности определения показаний к проведению химиотерапии первичным больным лимфогранулематозом и распространенным раком молочной железы. Определяют число нейтрофилов крови пациента и при уровне числа нейтрофилов от 1,8 до 10,0х10⁹ кл/л исследуют лейкоциты периферической крови после гамма-облучения в дозе 2 Гр, инкубируют облученную и необлученную пробы в течение 3 ч при 37^oС, определяют в них содержание ДНК лейкоцитов и рассчитывают показатель чувствительности (S) как отношение концентрации ДНК для лейкоцитов необлученной пробы к концентрации ДНК лейкоцитов облученной пробы и при величине нейтрофилов в пределах 1,8-10,0х10⁹ кл/л и значении величины S-показателя ниже 1,0 считают, что больному, в случае первичного генерализованного лимфогранулематоза, показано проведение комбинированной терапии по схеме ВЕАСОРР – блеомецином, этопозидом, доксорубицином, циклофосфамидом, винкристином, прокарбозином и преднизолоном, при значении величины S-показателя ниже 0,8 считают, что больному, в случае первичного распространенного рака молочной железы, показано проведение стандартного курса комбинированной химиотерапии по схеме CMF – циклофосфаном, метотрексатом, 5-фторурацилом, а при значении S-показателя выше 0,8 считают, что больному, в случае первичного распространенного рака молочной железы, показано проведение курса комбинированной химиотерапии по схеме FAC – 5-фторурацилом, доксорубицином, циклофосфаном. 3 ил., 6 табл.

Изобретение относится к медицине, точнее к области онкологии, оценке апоптотической гибели клеток при химиотерапии опухолей, и может найти применение при лечении больных с солидными новообразованиями и одной из распространенных злокачественных лимфом – лимфогранулематозом (ЛГМ).

Рак молочной железы (РМЖ) занимает 1 место среди всех новообразований у женщин зрелого и пожилого возраста, тогда как ЛГМ является часто встречающейся системной злокачественной лимфомой, поражающей преимущественно пациентов молодого репродуктивного возраста. В настоящее время для лечения распространенных РМЖ и ЛГМ применяют лучевую терапию (ЛТ), химиотерапию (XT) или их комбинацию. Кроме того, при лечении РМЖ в ранних стадиях используются хирургические способы лечения с последующей адъювантной XT после операций. Вместе с тем, XT занимает ведущее место в лечении распространенных РМЖ и ЛГМ в III – IV стадиях.

Однако интенсивная XT вызывает изменения показателей периферической крови (ППК) в виде миелодепрессии и, в первую очередь, нейтропению. Степень такого гематотоксического эффекта, вызываемого комбинированной XT, индивидуальна в отношении больного. Эта токсичность может привести к увеличению продолжительности лечения и/или снижению терапевтической дозы, увеличению интервала между циклами и в конечном итоге к уменьшению эффективности лечения. При адъювантной терапии РМЖ уменьшения дозы следует избегать, так как это приводит также к снижению общей эффективности лечения. Прогнозировать токсичность на основании обычных клинико-биохимических показателей практически очень сложно из-за вариабельности метаболизма химиопрепаратов в организмах больных и сравнительно узкого терапевтического диапазона большинства лекарств.

Для снижения вариабельности эффекта препарата и его токсичности клиницисты обычно “нормируют” дозу препарата на площадь поверхности тела (ППТ) больного (в кв. м). Современный способ расчета показателя ППТ определяется ростом и массой пациента по специальным таблицам или номограммам. В соответствии с этим индивидуальная доза препарата или комбинации препаратов рассчитывается на основании персональной величины ППТ. Вместе с тем, как правило, имеет место достаточно широкая межпациентная вариабельность, обусловленная метаболическими параметрами большинства химиотерапевтических препаратов, используемых при XT опухолей. Часто величина ППТ не коррелирует с показателями фармакокинетики комплекса препаратов и, как следствие, не может быть использована для предсказания токсичности [Ratain, 1998]. В значительной степени обусловлено это тем, что показатель ППТ не учитывает количество жира, белка и степени оводненности тела пациента, изменения этих компонентов организма в процессе заболевания. Число таких изменений может в значительной степени варьировать от пациента к пациенту. Основывая дозу при XT только на ППТ, врач часто подвергает больного риску повышенного токсического воздействия, в частности, водорастворимых препаратов.

Известен способ определения показаний к XT опухолей на основании измерения величины общего азота в организме (ОАО) [Aslani et al., 2000], значение которой определяется путем анализа захвата нейтронов при облучении in vivo. Этот способ включает бомбардировку тела пациента быстрыми нейтронами из соответствующего источника нейтронов. Авторы, в частности, использовали в качестве такого источника нейтронов калифорний-252. Общее облучение, получаемое пациентом при таком анализе, сопоставимо с дозой, получаемой при стандартном рентгеновском обследовании грудной клетки. При величине измерявшегося авторами показателя ОАО выше 0,89 в 26,6% случаев наблюдалась нейтропения ниже 1,0х10⁹ кл/л в случае проведения CMF-терапии больных с РМЖ. Вместе с тем, этот метод, включающий лучевое воздействие на организм пациента – его облучение в малой дозе, не был апробирован при других режимах XT солидных опухолей или при лечении злокачественных лимфом.

Оба этих метода основаны на объективных показателях больного. Однако для выбора тактики лечения, а именно целесообразности и возможности проведения интенсивной XT (ИХТ), они недостаточно информативны, так как дают опосредованные показания к проведению такого лечения.

Наиболее близким к предлагаемому является способ, основанный на определении радиочувствительности общих лейкоцитов крови до начала лучевой терапии ЛГМ [Иванов С.Д. и др., 1997]. Этот способ взят нами в качестве прототипа. Он позволяет прогнозировать лейкопению как осложнение при проведении радикальной ЛТ, являющейся результатом лучевого поражения организма пациента. Вместе с тем, этот способ, как и вышеописанные, не всегда отражает чувствительность организма пациента к XT, которая может быть высокой и при низкой радиочувствительности пациента, а также не является точным в отношении действия конкретной комбинации данных химиотерапевтических препаратов.

Технический результат настоящего изобретения состоит в повышении точности определения показаний к проведению XT у ранее нелеченных больных с опухолями молочной железы и ЛГМ за счет выявления степени чувствительности нейтрофилов крови пациентов к основным режимам XT до начала проведения лечения.

Этот результат достигается тем, что, тогда как в известном способе определения показаний к проведению ЛТ при ЛГМ используется исследование лейкоцитов периферической крови и прогнозируется снижение их общего числа, в предлагаемом изобретении для повышения точности прогнозируется нейтропения, в связи с чем сначала определяется число нейтрофилов крови, а затем согласно изобретению отобранную пробу крови делят на 2 части, одну из которых подвергают гамма-облучению в дозе 2 Гр, затем обе пробы инкубируют в течение 3 ч при 37^oС, после чего в них определяют содержание ДНК в лейкоцитах, отношение найденных величин в необлученной и облученной пробах (показатель S) и считают, что больной с первичным РМЖ при прочих равных условиях и значении этого отношения ниже 0,8 целесообразно проведение курса комбинированной XT по программе CMF, а выше 0,8 – курса FAC; у пациентов с первичным ЛГМ при величине этого отношения ниже 1,0 показано проведение комбинированной XT по схеме ВЕАСОРР.

Определение чувствительности именно абсолютного числа нейтрофилов как основной “мишени” повреждения цитостатиками, а не общего числа лейкоцитов, позволяет лучше учесть степень поражения системы неспецифического иммунитета, которая обеспечивает защиту организма от инфекций и других осложнений в ходе противоопухолевой терапии. Определение чувствительности нейтрофилов у больных, имеющих, как правило, число этих клеток в пределах, близких нормальным значениям (от 1,8 до 10,0х10⁹ кл/л), обусловлено следующим. С одной стороны, при более низком содержании нейтрофилов цитостатическая терапия не проводится, так как любой лечебный эффект противоопухолевых цитостатиков приведет к гематотоксическим последствиям – снижению числа этих клеток ниже 1,8х10⁹ кл/л со всеми вытекающими отсюда осложнениями и потребует гемостимулирующих мероприятий. С другой стороны, при более высоком, чем 10,0х10⁹ кл/л, содержании нейтрофилов в крови даже значительный гематотоксический эффект препаратов не приведет к снижению уровня этих клеток в кровотоке до опасно низких значений.

Целесообразно прогнозировать степень снижения числа нейтрофилов у каждого больного до начала XT, так как это позволит учесть чувствительность нейтрофилов в конкретных условиях их микроокружения к повреждающему терапевтическому воздействию. Степень повреждения нейтрофилов к терапевтическому воздействию моделируется гамма-облучением в дозе 2 Гр. Нами установлены зависимости между величиной показателя S и глубиной нейтропении для основных курсов XT. Вместе с тем, определение переходных коэффициентов и построение отдельных калибровочных кривых для каждого режима XT (при моделировании повреждающего воздействия на клетку путем гамма-облучения пробы крови в дозе 2 Гр) позволяет экстраполировать результаты лучевого поражения для оценки химической токсичности сочетанного воздействия ряда препаратов, учесть особенности апоптоза в нейтрофилах при подведенных дозах конкретной программы комбинированной химиотерапии.

Инкубацию проб крови целесообразно проводить в растворе Хенкса при 37^oС, что обеспечивает достаточное количество питательных компонентов среды для краткосрочной инкубации лейкоцитов при температуре, соответствующей таковой в организме человека. Инкубация проб крови в течение 3 ч дает возможность получить достаточно значимые различия между поврежденной и неповрежденной пробами, которые являются результатом пострадиационных процессов, развиваются во времени и, как нами показано, являются оптимальными для решения поставленной задачи. Более длительная инкубация лишь увеличит общее время определения, но не дает существенных преимуществ в выявлении различий. При меньшем времени инкубации достоверность различий не выявляется. Отношение содержания ДНК лейкоцитов в необлученной и облученной пробах характеризует степень деградации ДНК под влиянием лучевого воздействия, которое, как известно, имеет место при апоптотической форме гибели белых клеток крови, находящихся в интерфазе. Использование в этом отношении содержания ДНК необлученной пробы, отражающего неспецифическую гибель лейкоцитов, позволяет скорректировать возможные вариации, возникающие при изменениях условий инкубирования клеток.

Пробы крови перед определением ДНК целесообразно обработать раствором, содержащим 0,5% тритон Х-100, 2М NaCl, 0,1 М Na₂EDTA и 0,01 М трис при рН 8,0 в течение 3-5 мин, что позволяет солюбилизировать мембраны клеток и тем самым обеспечить беспрепятственный доступ флуорохрома – 4,6-диамидино-2-фенилиндола (ДАФИ) к содержащейся в пробах ДНК. Это дает возможность быстро связаться флуоресцирующему лиганду с субстратом, что сокращает процедуру измерения ДНК до нескольких минут и делает весь метод пригодным для оперативной оценки.

Сущность способа заключается в следующем.

Определяется исходное количество нейтрофилов, как наиболее повреждаемых цитостатиками клеток крови первичных больных раком молочной железы (РМЖ) или лимфогранулематозом (ЛГМ), и при уровне числа нейтрофилов от 1,8 до 10,0х10⁹ кл/л исследуются лейкоциты периферической крови после гамма-облучения в дозе 2 Гр, инкубации облученной и необлученной проб в течение 3 ч при 37^oС, определении в них содержания ДНК лейкоцитов, нахождении соотношения этих биохимических величин в необлученной и облученной пробах. При значениях этого соотношения у больных РМЖ менее 0,8 делают вывод о достаточной резистентности нейтрофилов пациентов к режиму XT, включающему CMF (циклофосфан, метотрексат, 5-фторурацил), а при величине этого соотношения более 0,8 делают заключение о резистентности нейтрофилов больного к химиотерапии, включающей схему FAC (5-фторурацил, доксорубицин, циклофосфан), и считают, что больным может быть проведен соответствующий курс XT без дополнительной стимуляции или защиты миелопоэза. В случае ЛГМ при значениях величины соотношений ДНК лейкоцитов контрольной и облученной проб ниже 1,0 делают вывод о достаточной резистентности нейтрофилов пациента к наиболее эффективной комбинации цитостатиков ВЕАСОРР (блеомицин, этопозид, доксорубицин, циклофосфамид, винкристин, прокарбазин, преднизолон) и считают, что больному показано проведение такой XT. Способ позволяет определить показания к проведению соответствующего курса XT до начала лечения и осуществлять его с положительным результатом, то есть без осложнений в виде нейтропении, как основного показателя миелодепрессии.

У больного с РМЖ или ЛГМ берут 1,0 мл крови, добавляют гепарин (до 25 ед/мл) и 1,0 мл раствора Хенкса. В крови общеизвестным методом определяется абсолютное количество нейтрофилов с помощью камеры Горяева и подсчета формулы крови. Гепаринизированную разбавленную кровь делят на 2 части. Одну из них облучают в дозе 2 Гр, другая служит контролем. Обе пробы инкубируют в течение 3 ч при 37^oС. После этого в обеих пробах определяют содержание лейкоцитов (Л) с помощью камеры Горяева и концентрацию ДНК флуориметрическим способом. Для этого 0,05 мл пробы крови обрабатывают 10-кратным объемом смеси, содержащей 0,5% тритона Х-100, 2М NaCl, 0,1 М Na₂EDTA и 0,01 М трис при рН 8,0 в течение 3-5 мин до просветления и 0,05 мл лизированной пробы добавляют к 1,0 мл трис-буфера. Измеряют интенсивность флуоресценции при _возб=350 нм и _эм=450 нм у лизированной пробы (I₀), затем к пробе добавляют 0,05 мл раствора ДАФИ в концентрации 4 мкг/мл и снова измеряют интенсивность флуоресценции (I₁), после чего к пробе добавляют 0,02 мл раствора стандартной ДНК в известной концентрации и еще раз определяют интенсивность флуоресценции (I₂). Концентрацию ДНК в лейкоцитах анализируемой пробы рассчитывают по формуле:

где К – коэффициент, зависящий от разбавления проб и стандарта, а также от концентрации стандарта (при одинаковых условиях измерения является величиной постоянной).

Определив по формуле (1) концентрацию ДНК для лейкоцитов облученной (Со) и необлученной (Ск) проб, рассчитывают величину искомого показателя по формуле
S=Ск/Со. (2)
В случае первичного РМЖ при значениях этого показателя меньше 0,8 делают заключение о достаточной резистентности миелопоэза пациентки к CMF, а при значениях показателя выше 0,8 – об устойчивости к FAC и считают, что больным показано проведение соответствующих схем XT. В случае первичного ЛГМ при значениях определенного показателя ниже 1,0 считают, что пациент достаточно резистентен к токсическому действию XT по схеме ВЕАСОРР, и ему показано проведение такого лечения.

Сущность способа иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1.

Анамнез – больная Андреева, 30 лет, первичный РМЖ T₃N₁M_x(1), поступила в клинику ЦНИРРИ МЗ РФ в мае 2000 г.

К 1,0 гепаринизированной (до 25 ед/мл) цельной крови пациентки Андреевой добавили 1,0 мл раствора Хенкса. В крови рассчитали количество нейтрофилов с помощью камеры Горяева (число лейкоцитов=6,2х10⁹ кл/л) и определения формулы крови (нейтрофилы – 51%). Получившуюся смесь разделили на 2 части. Одну из них облучили в дозе 2 Гр на гамма-установке “Луч-1” (⁶⁰Со, мощность дозы= 0,45 Гр/мин), другая служила контролем. Обе пробы инкубировали в течение 3 ч при 37^oС в суховоздушном термостате. После этого в обеих пробах определяли концентрацию лейкоцитов (Л) обычным камерно-меланжерным методом с помощью камеры Горяева и концентрацию ДНК флуориметрическим способом. С этой целью 0,02 мл пробы крови обрабатывали 10-кратным объемом смеси, содержащей 0,5% тритона Х-100, 2М NaCl, 0,1 М Na₂EDTA и 0,01 М трис при рН 8,0 в течение 3-5 мин до просветления и 0,05 мл лизированной пробы добавляли к 1,0 мл трис-буфера. Интенсивность флуоресценции образца измеряли на спектрофлуориметре фирмы “Хитачи” (Япония) Model-850 при _возб=350 нм и _эм=450 нм. В данном случае (пример 1 таблицы) у необлученной лизированной пробы I_O=4,7, затем к пробе добавили 0,05 мл раствора ДАФИ в концентрации 4 мкг/мл и снова измерили интенсивность флуоресценции I₁=24,5, после чего к пробе добавили 0,02 мл раствора стандартной ДНК тимуса теленка фирмы “Серва” (Германия) в концентрации 25 мкг/мл и еще раз определили интенсивность флуоресценции I₂= 39,4. Концентрацию ДНК в лейкоцитах анализируемой пробы рассчитывали по формуле (1). Данные определения экспериментальных параметров для лейкоцитов облученной и необлученной проб крови больной Андреевой представлены в табл. 1.

Определив по формуле (1) концентрацию ДНК для лейкоцитов облученной (Со) и необлученной (Ск) проб, по формуле (2) рассчитали величину искомого показателя S= 0,56. Так как значение этого показателя было меньше 0,8, то был сделан вывод о достаточной резистентности лейкопоэза пациентки к комбинации цитостатиков CMF и сочли возможным проведение стандартного курса CMF-терапии у этой больной. Последующее определение надира (наименьшего уровня за период наблюдения) нейтрофилов в процессе XT показало, что действительно, снижение числа нейтрофилов было небольшим и достигало лишь 2,6х10⁹ кл/л. Осложнений в процессе XT не было.

Для сравнения приводим данные лечения другой больной, которой в соответствии с нашими показаниями CMF-терапия не была рекомендована, но курс лечения все же был проведен.

Анамнез – больная Никишаева, 62 лет, первичный РМЖ T₃N₀M₀, поступила в клинику ЦНИРРИ МЗ РФ в апреле 2000 г.

К 1,0 гепаринизированной (до 25 ед/мл) цельной крови пациентки Никишаевой добавили 1,0 мл раствора Хенкса. В крови определили количество нейтрофилов, как описано ранее. Измерение всех вышеперечисленных параметров было осуществлено в условиях, описанных выше. Данные этих измерений также представлены в табл. 1. Как можно видеть из этих данных, величина показателя S у больной Никишаевой была равна 1,15, что свидетельствовало о повышенной чувствительности нейтрофилов пациентки к токсическому действию цитостатиков и являлось противопоказанием для проведения курса XT по схеме CMF. Несмотря на это, такое лечение было осуществлено и в процессе его обнаружилось, что снижение числа нейтрофилов было существенным – до 1,61х10⁹ кл/л. Это привело к осложнению процесса лечения, необходимости применения корригирующей терапии.

Результаты исследований 5 больных вышеописанным способом и данные клинических наблюдений, полученные в процессе лечения, приведены в табл. 2. Как видно из представленных данных, первые 3 больных, которым согласно предлагаемому способу было рекомендовано проведение XT по схеме CMF (так как в среднем S= 0,550,01) перенесли полный курс этой XT с допустимым снижением числа нейтрофилов до 2,540,12х10⁹ кл/л. У остальных 2 больных, которым не было рекомендовано проведение программы CMF (так как у них в среднем S= 1,140,01), в процессе лечения обнаруживалась глубокая нейтропения (в среднем – до 1,02х10⁹ кл/л), что потребовало дополнительной поддерживающей терапии для восстановления картины крови.

Для лучшего понимания выбора тактики лечения приводим установленную нами зависимость в виде графика (фиг.1), на котором по оси абсцисс отложены величины определяемого нами показателя S, а по оси ординат – степень снижения числа нейтрофилов в процессе CMF-терапии РМЖ. Как можно видеть из чертежа, при значениях S менее 0,8 уровень числа нейтрофилов в процессе CMF-терапии РМЖ не опускается ниже 1,9х10⁹ кл/л, что является показанием к проведению такого курса XT.

Пример 2.

Анамнез – больная Алексаничева, 53 лет, первичный РМЖ T₄N₁Mo, поступила в клинику НИИ онкологии им. проф. Н.Н. Петрова МЗ РФ в июле 1999 г.

К 1,0 гепаринизированной (до 25 ед/мл) цельной крови пациентки Алексаничевой добавили 1,0 мл раствора Хенкса. В крови рассчитали количество нейтрофилов с помощью камеры Горяева (число лейкоцитов=5,7х10⁹ кл/л) и определения формулы крови (нейтрофилы – 55%). Измерение всех вышеперечисленных параметров было осуществлено в условиях, описанных выше. Данные этих измерений представлены в табл. 3. Как можно видеть из этих данных, величина показателя S у больной Алексаничевой была равна 1,2, что свидетельствовало о повышенной чувствительности нейтрофилов пациентки к XT по схеме CMF и являлось показанием к проведению курса XT по схеме FAC (5-фторурацил – 1000 мг, адриабластин – 70 мг, цислофосфан – 1000 мг). Последующее определение надира нейтрофилов в процесса XT показало, что действительно, снижения числа нейтрофилов в случае использования программы FAC не было: их уровень достигал значения 3,35х10⁹ кл/л. Осложнений в процессе XT не было.

Для сравнения приводим данные лечения другой больной, которой в соответствии с нашими показаниями XT по схеме FAC не была рекомендована, но курс лечения все же был проведен.

Анамнез – больная Ускова, 53 лет, первичный РМЖ Т₃N₀М₀, поступила в клинику НИИ онкологии им. проф. Н.Н. Петрова МЗ РФ в октябре 1999 г.

К 1,0 гепаринизированной (до 25 ед/мл) цельной крови пациентки Усковой добавили 1,0 мл раствора Хенкса. В крови измерили количество нейтрофилов, как описано ранее. Определение всех вышеперечисленных параметров было осуществлено в условиях, описанных выше. Данные этих измерений также представлены в табл. 3. Как можно видеть из этих данных, величина показателя S у больной Усковой была равна 0,77, что являлось, по нашим данным, противопоказанием для проведения курса XT по программе FAC. Несмотря на это, такое лечение было осуществлено и в процессе его обнаружилось, что снижение числа нейтрофилов было почти двукратным по сравнению с исходным значением и достигало 1,67х10⁹ кл/л. Это привело к осложнению процесса лечения, необходимости применения корригирующей терапии.

Результаты исследований 4 больных вышеописанным способом и данные клинических наблюдений, полученные в процессе лечения, приведены в табл. 4. Как видно из представленных данных, первые 2 больных, которым согласно предлагаемому способу было рекомендовано проведение XT по схеме FAC (так как в среднем S= 1,030,18) перенесли полный курс этой XT с допустимым снижением числа нейтрофилов до 2,760,59х10⁹ кл/л. У остальных 2 больных, которым не было рекомендовано проведение подобной XT (так как у них в среднем S= 0,750,02), в процессе лечения обнаруживалась нейтропения (в среднем – до 1,74х10⁹ кл/л), что потребовало дополнительной поддерживающей терапии для восстановления картины крови.

Для лучшего понимания выбора тактики лечения приводим установленную нами зависимость в виде графика (фиг.2), на котором по оси абсцисс отложены величины определяемого нами показателя (S), а по оси ординат – степень снижения числа нейтрофилов в процессе XT больных с РМЖ по схеме FAC. Как можно видеть из чертежа, при значениях S более 0,8 уровень числа нейтрофилов в процессе XT по программе FAC при РМЖ не опускается ниже 1,9х10⁹ кл/л, что является показанием к проведению такого курса XT.

Пример 3.

Анамнез – больной Левин, 69 лет, первичный ЛГМ П-Б стадии, поступил в клинику НИИ онкологии им. проф. Н.Н. Петрова МЗ РФ в июне 2000 г.

К 1,0 гепаринизированной (до 25 ед/мл) цельной крови пациента Левина добавили 1,0 мл раствора Хенкса. В крови рассчитали количество нейтрофилов с помощью камеры Горяева (число лейкоцитов = 7,9х10⁹ кл/л) и определения формулы крови (нейтрофилы – 60%). Измерение всех вышеперечисленных параметров было осуществлено в условиях, описанных выше. Данные этих измерений представлены в табл. 5. Как можно видеть из этих данных, величина показателя S у больного была равна 0,33, что свидетельствовало об устойчивости нейтрофилов пациента к проведению курса ХТ по схеме BEACOPP (блеомицин – 15 мг, вепезид – 450 мг, доксолем – 35 мг, цислофосфан – 800 мг, винкристин – 2 мг, натулан – 1050 мг, преднизол – 60 мг/сут). Последующее определение надира нейтрофилов в процессе ХТ показало, что действительно, снижения числа нейтрофилов в случае BEACOPP-терапии не было, их уровень достигал значения 6,16х10⁹ кл/л. Осложнений в процессе ХТ не было.

Для сравнения приводим данные лечения другой больной, которой в соответствии с нашими показаниями ХТ по схеме BEACOPP не была рекомендована, но курс лечения все же был проведен.

Анамнез – больная Белюкина, 31 год, первичный ЛГМ, П-А стадия, поступила в клинику НИИ онкологии им. проф. Н.Н. Петрова МЗ РФ в декабре 2000 г.

К 1,0 гепаринизированной (до 25 ед/мл) цельной крови пациентки Белюкиной добавили 1,0 мл раствора Хенкса. В крови измерили количество нейтрофилов, как описано ранее. Определение всех вышеперечисленных параметров было осуществлено в условиях, описанных выше. Данные этих измерений также представлены в табл. 5. Как можно видеть из этих данных, величина показателя S у больной Белюкиной была равна 1,20, что являлось противопоказанием для проведения курса ХТ по схеме BEACOPP. Несмотря на это, такое лечение было осуществлено и в процессе его обнаружилось, что снижение числа нейтрофилов было значительным и достигло 1,68х10⁹ кл/л. Это привело к осложнению процесса лечения, необходимости применения корригирующей терапии.

Результаты исследований 7 больных вышеописанным способом и данные клинических наблюдений, полученные в процессе лечения, приведены в табл. 6. Как видно из представленных данных, первые 4 больных, которым согласно предлагаемому способу было рекомендовано проведение ХТ по схеме BEACOPP (так как в среднем S= 0,690,14) перенесли полный курс этой ХТ с допустимым снижением числа нейтрофилов до 4,780,74х10⁹ кл/л. У остальных 3 больных, которым не было рекомендовано проведение ХТ BEACOPP (так как у них в среднем S= 1,110,06), в процессе лечения обнаруживалась тенденция к нейтропении (в среднем – до 1,85х10⁹ кл/л), что потребовало дополнительной поддерживающей терапии для восстановления картины крови у 2 пациентов.

Для лучшего понимания выбора тактики лечения приводим установленную нами зависимость в виде графика (фиг.3), на котором по оси абсцисс отложены величины определяемого нами показателя (S), а по оси ординат – степень снижения числа нейтрофилов в процессе комбинированной ХТ по программе BEACOPP у больных ЛГМ. Как можно видеть из чертежа, при значениях S меньше 1,0 уровень числа нейтрофилов при этом не опускается ниже 2,8х10⁹ кл/л, что является показанием к проведению такого курса ХТ.

По сравнению с известными способ имеет ряд существенных преимуществ.

1. Способ позволяет определить показания к проведению курса комбинированной ХТ по схеме BEACOPP для больных ЛГМ до начала лечения и осуществить его без осложнений со стороны миелопоэза.

2. Способ позволяет определить показания к проведению курсов комбинированной ХТ по программе CMF или FAC для больных РМЖ до начала лечения и осуществить их с положительными результатами.

Способ разработки в лаборатории биотестирования токсических факторов окружающей среды ЦНИРРИ МЗ РФ, отделении химиотерапии опухолей НИИ онкогологии им. проф. Н.Н. Петрова МЗ РФ и отделе клинической радиологии ЦНИРРИ МЗ РФ.

Использованная литература

3. Иванов С.Д., Корытова Л.И., Ямшанов В.А., Ильин Н.В. Способ определения показаний к проведению лучевой терапии при первичном лимфогранулематозе. Патент 2129274, 20.04.99. Бюл. 11.

Формула изобретения

Способ определения показаний к проведению химиотерапии первичным больным лимфагранулематозом и распространенным раком молочной железы, отличающийся тем, что определяют число нейтрофилов крови пациента и при уровне числа нейтрофилов от 1,8 до 10,0х10⁹ кл/л исследуют лейкоциты периферической крови после гамма-облучения в дозе 2 Гр, инкубируют облученную и необлученную пробы в течение 3 ч при 37^oС, определяют в них содержание ДНК лейкоцитов и рассчитывают показатель чувствительности (S) как отношение концентрации ДНК для лейкоцитов необлученной пробы к концентрации ДНК лейкоцитов облученной пробы и при величине нейтрофилов в пределах 1,8-10,0х10⁹ кл/л и значении величины S-показателя ниже 1,0 считают, что больному, в случае первичного генерализованного лимфогранулематоза, показано проведение комбинированной терапии по схеме ВЕАСОРР – блеомецином, этопозидом, доксорубицином, циклофосфамидом, винкристином, прокарбозином и преднизолоном, при значении величины S-показателя ниже 0,8 считают, что больному, в случае первичного распространенного рака молочной железы, показано проведение стандартного курса комбинированной химиотерапии по схеме CMF – циклофосфаном, метотрексатом, 5-фторурацилом, а при значении S-показателя выше 0,8 считают, что больному, в случае первичного распространенного рака молочной железы, показано проведение курса комбинированной химиотерапии по схеме FAC – 5-фторурацилом, доксорубицином, циклофосфаном.

РИСУНКИ

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 28.06.2005

Извещение опубликовано: 10.06.2006 БИ: 16/2006

NF4A Восстановление действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение

Дата, с которой действие патента восстановлено: 20.09.2007

Извещение опубликовано: 20.09.2007 БИ: 26/2007