Патент на изобретение №2211683

(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ ЯИЧНИКОВ У СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ

(57) Реферат:

Изобретение относится к области ветеринарии. Начиная с 25-30-го дня послеродового периода исследуют содержание общего холестерина и показатели альбумино-глобулинового коэффициента в крови; затем у животных с содержанием общего холестерина на уровне 5,3-7,5 ммоль/л и имеющих величину альбумино-глобулинового коэффициента в пределах 1,0-2,2, которые проявляют стойкий рефлекс неподвижности, дополнительно определяют рН и рефрактометрический показатель преломления цервико-вагинального секрета и при значении рН на уровне 5,0-6,8 и рефрактометрическом показателе преломления цервико-вагинального секрета, равном 1,3342-1,3352, а также при содержании собственно поверхностных клеток с четким ядром на влагалищных мазках до 7,5% диагностируют наличие функционально активного фолликула со зрелой яйцеклеткой в яичниках циклирующих коров и судят о благоприятных условиях для оплодотворения. Способ позволяет доступно в условиях животноводческих хозяйств диагностировать функциональное состояние яичников у самок сельскохозяйственных животных, более точно выявлять охоту и овуляцию у жвачных животных. 5 табл.

Изобретение относится к области ветеринарии, а именно к акушерству и гинекологии, и предназначено для определения функционального состояния яичников у сельскохозяйственных животных, в частности, может быть использовано при выявлении оптимального времени осеменения у циклирующих коров в послеродовой период.

Способ позволяет доступно в условиях животноводческого хозяйства диагностировать функциональное состояние яичников у коров.

Имеется способ определения оптимального времени осеменения самок жвачных животных, который предполагает исследование пробы цервико-вагинального секрета из половых путей коров с помощью рефрактометрии (Антонюк B.C., Жаркин В. В., Горбунов Ю.А. Способ определения оптимального времени осеменения крупного рогатого скота. А.с. 1146036, СССР). По измерению рефрактометрического показателя преломления цервико-вагинального секрета в отраженном свете судят об оптимальном времени осеменения коров, чему соответствует показатель преломления ЦВС, равный 1,3351-1,3370.

Известен способ определения функционального состояния яичников у животных с удлиненным влагалищем (Василенко Т.Ф. Способ определения функционального состояния яичников у животных с удлиненным влагалищем. Патент РФ 2155016), например коров, который включает взятие мазка из верхнебокового свода влагалища на уровне шейки матки путем снятия клеточной массы со стенок пипеткой для искусственного осеменения с обработанным шероховатым концом (5-7 см). Пипетку вводят через вагинальное зеркало с подсветкой под визуальным контролем. Затем пробы тонким слоем наносят на предметное стекло, клеточный материал фиксируют, окрашивают, дифференцируют и подсчитывают разные типы клеток. Для диагностирования животных определяют процентное содержание собственно поверхностных клеток с четким ядром и “голых” ядер и их “теней”. При содержании собственно поверхностных клеток не более 7,5% и “голых” ядер и их “теней” не более 1,3% диагностируют предовуляторный период полового цикла и судят о благоприятных условиях для оплодотворения коров. При содержании собственно поверхностных клеток не более 7,5% и “голых” ядер и их “теней” в пределах 3,1-8,5% диагностируют беременность и судят о благоприятных условиях для развития плода. Данный способ был взят в качестве прототипа.

Основным недостатком представленных выше способов является то, что определение функционального состояния яичников у коров осуществляется на основе исследования отдельно взятого показателя, характеризующего только состояние вагинальной среды, т.е. эти способы позволяют выявлять предовуляторный период половой охоты, но не достаточно полно определяют функциональное состояние яичников у коров.

Задачей настоящего изобретения является разработка способа с использованием нескольких показателей, позволяющего доступно в условиях животноводческих хозяйств диагностировать функциональное состояние яичников у самок сельскохозяйственных животных и судить о наличии функционально зрелого фолликула в яичниках коров и, следовательно, более точно выявлять охоту и овуляцию у циклирующих самок жвачных животных (коров).

В этом состоит технический результат, находящийся в причинно-следственной связи с существенными признаками изобретения.

Технический результат способа достигается таким образом, что начиная с 25-30-го дня послеродового периода осуществляется забор проб крови из яремной вены коров через три часа после утреннего приема корма и исследуется содержание общего холестерина и показатели альбумино-глобулинового коэффициента в крови; потом животных с высоким содержанием общего холестерина и имеющих величины альбумино-глобулинового коэффициента крови в оптимальных пределах значений для данного показателя отбирают для последующего обследования, при этом отбор коров осуществляют при наличии стойкого рефлекса неподвижности в предовуляторный период эстрального цикла, когда животные допускают на себя садку других коров стада, и в этот период выполняют забор цервико-вагинального секрета из влагалища и затем исследуют параметры, характеризующие состояние вагинальной среды – рН и рефрактометрический показатель преломления цервико-вагинального секрета в отраженном свете; одновременно проводят взятие мазков со стенок верхнебокового свода краниального отдела влагалища и подсчитывают процентное содержание различных типов клеток согласно прототипу. Животных, имеющих содержание общего холестерина на уровне 5,3-7,5 ммоль/л и величины альбумино-глобулинового коэффициента крови в пределах 1,0-2,2 и которые в предовуляторный период половой охоты проявляют стойкий рефлекс неподвижности и допускают на себя садку других коров стада, отбирают для последующего обследования; для диагностирования коров определяют рН и рефрактометрический показатель цервико-вагинального секрета и подсчитывают содержание поверхностных эпителиальных клеток на влагалищных мазках; при этом при величине рН цервико-вагинального секрета на уровне 5,0-6,8 и рефрактометрического показателя преломления цервико-вагинального секрета, равного 1,3342-1,3352 и при процентном содержании собственно-поверхностных клеток с четким ядром на влагалищных мазках до 7,5%, диагностируют наличие функционально активного фолликула со зрелой яйцеклеткой в яичниках циклирующих коров.

Способ осуществляется следующим образом: примерно с 25-30-го дня послеродового периода осуществляют забор проб крови из яремной вены коров через три часа после утреннего приема корма и определяют содержание общего холестерина и показатели альбумино-глобулинового коэффициента в крови; затем животных с содержанием общего холестерина на уровне 5,3-7,5 ммоль/л и имеющих величины альбумино-глобулинового коэффициента крови в пределах 1,0-2,2, а также при наличии стойкого рефлекса неподвижности (животные допускают на себя садку других коров стада) отбирают для дальнейших обследований; в предовуляторный период половой охоты у коров из влагалища, используя гинекологическое зеркало для животных с удлиненным влагалищем, проводят забор цервико-вагинального секрета, который собирают в стеклянный бюкс с нижней бранши зеркала, затем бюкс закрывают притертой крышкой и через 10-15 мин в условиях лаборатории исследуют параметры, характеризующие состояние вагинальной среды – рН с использованием рН-метра и рефрактометрический показатель преломления цервико-вагинального секрета в отраженном свете на рефрактометре. Одновременно осуществляют взятие мазков: пипетку для искусственного осеменения с обработанным шероховатым концом вводят через вагинальное зеркало с подсветкой под визуальным контролем. Затем пробы тонким слоем наносят на предметное стекло, клеточный материал фиксируют, окрашивают, дифференцируют и подсчитывают разные типы клеток по прототипу. При этом оптимальному времени осеменения (наличию функционально активного фолликула со зрелой яйцеклеткой в яичниках коров) соответствует величина рН цервико-вагинального секрета на уровне 5,0-6,8 и рефрактометрический показатель преломления цервико-вагинального секрета, равный 1,3342-1,3352, и процентное содержание собственно-поверхностных клеток с четким ядром на влагалищных мазках до 7,5%.

Эксперименты по определению оптимального времени половой охоты и овуляции у коров проводили на поголовье фермы Выльгородской научно-экспериментальной биологической станции (ВНЭБС) Коми научного центра УрО РАН (г. Сыктывкар). Апробацию предлагаемого способа осуществляли на коровах животноводческих комплексов совхозов “Пригородный” и “Сыктывкарский”. Использовали высококлассных племенных коров холмогорской породы со среднегодовой молочной продуктивностью 4000 кг и выше при удовлетворительных условиях содержания и кормления, прогулках на выгульных площадках.

В конце беременности и в определенные интервалы после родов у клинически здоровых животных фермы ВНЭБС определяли содержание общего холестерина крови. На восьмом-девятом месяце беременности и в начале первого месяца после родов у животных выявлены низкие концентрации холестерина крови в пределах 3-4 ммоль/л. При прохождении послеродового периода у коров без явных осложнений к концу первого – началу второго месяца после родов отмечали проявление первого эстрального цикла, при этом содержание холестерина крови увеличивалось и составило 5,4-6,2 ммоль/л (табл.1, подгруппа 1). У животных с увеличенным содержанием холестерина крови отмечали возобновление первого астрального цикла с нормальной половой охотой – с явной стадией возбуждения в начале охоты и наличием стойкого рефлекса неподвижности в предовуляторный период в конце охоты.

Увеличенное содержание холестерина в крови коров также отмечали во время прохождения овуляторного ‘стрального цикла непосредственно перед оплодотворением. Однако начиная с 25-го дня после родов примерно у 30-65% животных от обследованных определяли достоверно низкие значения холестерина (р<0,001), которые в среднем на 27% ниже величин холестерина в крови у коров с нормальным течением обменных процессов и послеродового периода (табл.1 и 2, вторые подгруппы). В послеродовой период у животных, имеющих содержание холестерина крови ниже оптимальных величин, отмечали возобновление овуляторных эстральных циклов в более поздние сроки после родов, а следовательно, у них удлиняется период от родов до оплодотворения (Василенко Т.Ф. Содержание холестерина в крови холмогорских коров. В кн.: Усвоение питательных веществ у жвачных животных. Сыктывкар, 1987. С. 92-97. (Труды Коми филиала АН СССР, 85).

Исследования показателей альбумино-глобулинового коэффициента крови животных фермы ВНЭБС в предовуляторный период эстрального цикла перед осеменением с последующим оплодотворением и на первых месяцах плодоношения показали, что эти величины должны находится в пределах оптимальных значений для данного показателя (табл. 3). Следовательно, способность организма коров удерживать величины альбумино-глобулинового коэффициента крови в пределах оптимальных значений – 1,0-2,2 – является одним из условий, необходимых для нормального функционирования отдельных структур яичника в предовуляторный период.

Исследования клеточного содержимого мазков из краниального отдела влагалища рН и рефрактометрического показателя преломления цервико-вагинального секрета в отраженном свете у коров фермы ВНЭБС в предовуляторный период эстрального цикла в ходе проведения осеменения с последующим оплодотворением показали, что количество собственно-поверхностных клеток выстилающего эпителия находилось в пределах 7,5%, а промежуточных клеток составляло менее 1,2%. Величины рН цервико-вагинального секрета изменялись в пределах от 5,0 до 6,8, а рефрактометрического показателя в более узких границах – от 1,3342 до 1,3352 (табл.4).

Пример. Предлагаемый способ определения функционального состояния яичников у сельскохозяйственных животных с исследованием содержания общего холестерина и величин альбумино-глобулинового коэффициента в крови и показателей, характеризующих состояние вагинальной среды – рН, и рефрактометрический показатель секрета половых путей и процентное содержание поверхностных эпителиальных клеток на влагалищных мазках был апробирован на коровах животноводческого комплекса совхоза “Сыктывкарский”. С целью контроля правильного отбора коров для проведения искусственного осеменения были проведены обследования 7 животных в предовуляторный период эстрального цикла, когда животные проявляли стойкий рефлекс неподвижности и допускали на себя садку других коров стада. Исследовали содержание общего холестерина и альбумино-глобулиновое отношение в крови с одновременным определением рН и рефрактометрического показателя цервико-вагинального секрета и особенностей клеточного состава влагалищных мазков (табл.5). Уровень сывороточного холестерина был ниже нормы у двух животных – 2 и 4. Величина альбумино-глобулинового отношения была выше нормы у двух животных – 1 и 3, и у одного животного – 4 заметно снижена по сравнению с оптимальным уровнем. Показатели рН и рефрактометрического показателя соответствовали оптимальным значениям у всех 7 животных, в то время как клеточный состав мазков из краниального отдела влагалища не соответствовал норме у 6 коров, из них выраженную форму воспаления (эндометрит) диагностировали у двух. Из 7 обследованных животных только у одной коровы все исследуемые параметры находились в пределах значений, оптимальных для нормального функционирования отдельных структур яичников, и именно это животное оплодотворилось.

Принимая во внимание результаты проведенных экспериментов, можно сделать следующий вывод, что отбор коров, имеющих высокое содержание общего холестерина крови и оптимальные значения величин альбумино-глобулинового коэффициента крови, начиная с 25-30 дня после родов, и проявляющих стойкий рефлекс неподвижности в период истинной половой охоты (предовуляторный период эстрального цикла), в сочетании с оптимальными значениями величин рН и рефрактометрического показателя преломления ЦВС и процентного содержания собственно поверхностных клеток влагалищного эпителия на мазках, позволяет выявлять животных с функционально зрелым фолликулом в яичниках и с высокой способностью к оплодотворению. Исследование предлагаемых параметров можно также использовать для точной диагностики нарушений обмена веществ или заболеваний репродуктивной системы (эндометриты) у коров в ранние сроки после родов.

Формула изобретения

Способ определения функционального состояния яичников у сельскохозяйственных животных, включающий взятие мазков со стенок верхне-бокового свода влагалища, подсчет процентного содержания отдельных типов поверхностных эпителиальных клеток и суждение о фазах репродуктивного цикла и функциональном состоянии яичников у коров, отличающийся тем, что предварительно, начиная с 25-30-го дня послеродового периода, исследуют содержание общего холестерина и показатели альбумино-глобулинового коэффициента крови, затем у животных с содержанием общего холестерина на уровне 5,3-7,5 ммоль/л и имеющих величину альбумино-глобулинового коэффициента в пределах 1,0-2,2, которые проявляют стойкий рефлекс неподвижности, дополнительно определяют рН и рефрактометрический показатель преломления цервико-вагинального секрета и при значении рН на уровне 5,0-6,8 и рефрактометрическом показателе преломления цервико-вагинального секрета, равном 1,3342-1,3352, а также при содержании собственно-поверхностных клеток с четким ядром на влагалищных мазках до 7,5% диагностируют наличие функционально активного фолликула со зрелой яйцеклеткой в яичниках циклирующих коров и судят о благоприятных условиях для оплодотворения.

РИСУНКИ

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 10.01.2004

Извещение опубликовано: 20.04.2005 БИ: 11/2005