Патент на изобретение №2208787
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ ОЦЕНКИ ТЯЖЕСТИ СОСТОЯНИЯ ТРАВМАТОЛОГИЧЕСКОГО БОЛЬНОГО
(57) Реферат: Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии и ортопедии. Сущность способа: в плазме крови больного определяют количество общих липидов и малонового диальдегида, хемилюминесценцию продуктов перекисного окисления липидов по общей светосумме за 60 с, на основании полученных показателей рассчитывают диагностический коэффициент k по формуле k=МДАХЛ-ОЛ1000, где МДА – содержание малонового альдегида в мкмоль/л, ХЛ – хемилюминесценция продуктов перекисного окисления липидов плазмы за 60 с в кфотон, ОЛ – общее количество липидов, г/л, и при значении k>1,5 состояние пациента оценивают как тяжелое. Способ позволяет повысить точность диагностики. 1 табл. Предлагаемое изобретение относится к области медицины, а именно к ортопедии и травматологии, и может быть использовано для оценки тяжести состояния травматологических больных. Известен способ определения степени тяжести травмы у детей по биохимическому исследованию биологической жидкости на концентрацию дофамина [1]. Недостатками данного способа является то, что определяется тяжесть состояния только у детей и метод не показывает тонкие структурные изменения, которые происходят при перекисных окислительных реакциях липопротеидов. Наиболее близким к предлагаемому способу является способ биохимической оценки гипоксического повреждения головного мозга при хирургическом лечении облитерирующих заболеваний брахиоцефальных артерий [2]. Указанный метод имеет неоспоримое достоинство в том, что оценка повреждений головного мозга производится по общему количеству липидов, что позволяет иметь представление о нарушениях клеточного метаболизма. Недостатком этого способа является то, что данный способ не может быть применен в оценке степени тяжести повреждений у травматологического больного в силу того, что кровь берется изолированно только из яремной вены, что показывает изменения, происходящие в головном мозге и не дает информации о патологических состояниях в других отделах организма. При травматических повреждениях, особенно если они множественные, сочетанные или комбинированные, в организме наступают патологические процессы, приводящие к нарушению биохимических реакций [3]. Особенно показательны при этом изменения общего перекисного окисления. Нами предлагается новый способ оценки тяжести состояния травматологического больного путем определения изменений в организме, связанных с нарушением липидного обмена. Предложенный способ позволяет улучшить качество диагностики травматологического больного. Поставленная задача достигается тем, что в плазме крови определяется содержание малонового диальдегида и количество общих липидов. Способ отличается от ранее предложенных тем, что в исследование включен важный качественный показатель общих перекисных окислении, хемилюминисценция плазмы. Для повышения специфичности и достоверности диагностики вводится коэффициент. Предлагаемый способ позволяет определить уровень и тяжесть повреждений в организме, а также уловить начало и конец патологического состояния, связанных с травмой. Предложенный способ осуществляется следующим образом. Определяется количество общих липидов по известным методикам. К 0,02 мл сыворотки крови прибавляют 1,5 мл концентрированной серной кислоты. Содержимое перемешивают и помещают на 15 минут в водяную баню. После охлаждения гидролизата отмеривают 0,1 мл (контрольная проба 0,1 мл концентрированной серной кислоты), который переносят в другие пробирки, содержащие 1,5 мл фосфорнованилинового реактива. После перемешивания пробы оставляют стоять 50 мин при комнатной температуре. Оптическую плотность пробы (А1) и эталонного раствора (А2) измеряют на фотоэлектроколориметре при длине волны 510-550 нм в кювете толщиной слоя 10 мм против контрольного раствора. Расчет производят по формуле [х=А1/А28(г/л)]. Для определения малонового диальдегида в пробирку вносят 0,3 мл плазмы 0,3 мл 1% ортофосфорной кислоты, 0,1 мл 0,6% раствора 2 – тиобарбитуровой кислоты и 0,1 мл раствора сульфата железа. Пробирки ставят в водяную баню на 1 час. Пробы охлаждают, добавляют 4 мл бутанола, тщательно перемешивают и центрифугируют при 3000 об/мин в течение 10 мин, измеряют на спектрофотометре сф – 46 оптическую плотность верхней фазы при длине волны 535 н/м против бутанола (Еоп). Содержание малонового диальдегида – конечного продукта, характеризующего состояние перекисного окисления липидов, рассчитывается по формуле х=Еоп1064/к0,3=Еоп85,47 где х – содержание малонового диальдегида (в мкмоль/л или нмоль/мл), 4 – объем в мл бутанольной фазы, к – коэффициент молярной экстинкции триметинового комплекса малонового диальдегида=1,5610 моль/см, 0,3 – объем в мл плазмы взятой для анализа. Для повышения достоверности определения патологических процессов, происходящих в травмированном организме, определяют хемилюминисценцию плазмы. Для этого в кювету хемилюминометра последовательно вносят 0,2 мл фосфатного буфера рН 7,4; 0,1 мл плазмы; 0,4 мл сульфата железа (II), (28 мг в 10 мл диcт. воды) и 0,2 мл 3% раствора пероксида водорода. Определяют общую светосумму за 60 секунд в кфотон, среднюю скорость реакции за каждые 10 с измерения и максимальное значение интенсивности хемилюменисценции за время измерения. Наиболее информативным и общим показателем является показатель общей светосуммы за 60 с. Для подтверждения достоверности метода нами взяты две группы пациентов. Первая группа являлась контрольной, в нее входили тридцать абсолютно здоровых лиц различного возраста от 8 до 59 лет, из них четырнадцать лиц мужского пола, шестнадцать женского. Во вторую группу вошли 42 человека с повреждениями различной степени тяжести в возрасте от 8 до 68 лет. Биохимические исследования у них производили в момент поступления, в момент выраженных клинических проявлений травматического шока, в период нормализации гемодинамических показателей. Показатели биохимических исследований соответствовали следующим величинам. Для иллюстрации проводимых исследований приводим следующие клинические примеры, подтверждающие эффективность и достоверность указанного метода (таблица). При проведении исследований вышеперечисленные показатели не всегда изменялись все сразу: могло быть так, что менялся один или два показателя. Для того, чтобы проследить закономерность и получить определенный алгоритм исследования, авторами введен коэффициент, который равен отношению произведения количества малонового диальдегида и цифровых значений хемилюминисценции плазмы к количеству общих липидов, увеличенных в тысячу раз. k=МДАХЛОЛ1000 где МДА – малоновый диальдегид, ХЛ – хемилюминесценция плазмы, ОЛ – общие липиды. При исследовании группы больных и контрольной группы получены показатели коэффициента, которые соответствуют параметрам от 1 до 1,5 у здоровых людей и свыше 1,5 у пациентов, состояние которых соответствует тяжелому. Для иллюстрации приводим клинические примеры. 1. В приемное отделение доставлен мальчик С., 9 лет в 9 часов утра с диагнозом: Ранение правой ягодичной области. При осмотре: состояние удовлетворительное. А/Д 100/60 мм Hg, Ps – 82 уд. в минуту, t – 36,4. Язык влажный, чистый. В легких дыхание везикулярное, тоны сердца ясные, ритмичные. Живот мягкий безболезненный, симптомы раздражения брюшины отрицательные. При исследовании прямой кишки повреждений не обнаружено. В правой ягодичной области – колотая рана. Размеры 2 х 3 см. Произведена ПХО раны, наложены швы. У ребенка взята кровь на общеклинические исследования, в которых патологических изменений не обнаружено, взята плазма крови для биохимического определения тяжести состояния. Данные исследования (k – 1,85) показали, что состояние ребенка не соответствует объективному статусу. В 21 час больному стало хуже, появилась рвота, симптомы раздражения брюшины. Произведена лапаротомия, обнаружено повреждение подвздошной кишки. Кишка ушита. Дренирование брюшной полости. Биохимическое исследование производилось через 12 часов после операции (k – 2,07), что соответствовало по нашим данным тяжелому состоянию. Последнее биохимическое исследование производилось после перевода больного из реанимационного отделения (k – l,4), что соответствовало удовлетворительному состоянию. 2. В операционную взята на плановую операцию через трое суток после травмы женщина 65 лет с диагнозом: Закрытый трансцервикальный перелом шейки правой бедренной кости со смещением отломков. До этого она находилась в травматологическом отделении на скелетном вытяжении за бугристость большеберцовой кости. Больная полностью обследована, проведены общеклинические исследования, осмотрена терапевтом. Противопоказаний к оперативному методу лечения [Закрытая репозиция шейки бедренной кости под ЭОП, остеосинтез гвоздем Смитт-Петерсона] нет. У больной непосредственно в операционной перед операцией взята кровь на биохимическое исследование. Данные исследования (k – 2,94) показали, что состояние больной тяжелое, несмотря на нормальные предыдущие данные. Через два дня после операции у больной развилась двусторонняя нижнедолевая пневмония. После проведенного лечения биохимические показатели (k -1,5) соответствовали удовлетворительному состоянию. Больная выписана из стационара. Таким образом, предложенный способ позволяет точно оценить степень тяжести повреждений, полученных при травме, независимо от клинических показателей. Анализ В результате проведенных биохимических исследований плазмы крови у 72 пациентов получены показатели малонового диальдегида (МДА), количество общих липидов (ОЛ), а так же произведена хемилюминисценция плазмы (ХЛ). Исследования проводились у контрольной группы людей и у больных с травматическими повреждениями различной степени тяжести (таблица). По полученным вышеперечисленным биохимическим данным в отдельности довольно сложно судить о состоянии тяжести организма, так как не всегда меняются все три биохимических показателя одновременно. Для большей точности определения тяжести состояния организма введен малоново-диальдегид-липидно-хемилюменисцентного коэффициента, который учитывает даже незначительные биохимические отклонения. Значения коэффициента для здоровых людей соответствует 1,0-1,5, которые получены в результате исследования контрольной группы людей. При травме увеличиваются показатели малонового диальдегида или хемилюминисценции плазмы, а также уменьшается содержание общих липидов в плазме, выраженные в абсолютных цифрах. При этом значение коэффициента резко возрастает. Время исследования хемилюминисценции плазмы взято за 60 секунд, так как за данный отрезок времени получен наиболее объективный показатель. Практически предложенный способ оценки тяжести состояния организма при травме может быть использован в здравоохранении для улучшения качества диагностики тяжести состояния травмированного больного. Литература 1. Авторское свидетельство 1675766. Бюллетень изобретений 44, 1991 г. 2. Прототип Патент РФ 210998. Бюллетень изобретений от 20.04.1998 г. 3. Руководство по травматологии и ортопедии./ Под ред. Ю.Г. Шапошникова. – М.: Медицина, 1997. – Т.1 – 651 с. Формула изобретения Способ оценки тяжести состояния травматологического больного путем биохимического исследования крови, отличающийся тем, что в плазме крови больного определяют количество общих липидов и малонового диальдегида, хемилюминесценцию продуктов перекисного окисления липидов по общей светосумме за 60 с, на основании полученных показателей рассчитывают диагностический коэффициент k по формуле k=МДАХЛОЛ1000, где МДА – содержание малонового альдегида в мкмоль/л; ХЛ – хемилюминесценция продуктов перекисного окисления липидов плазмы за 60 с, кфотон; ОЛ – общее количество липидов, г/л, и при значении k>1,5 состояние пациента оценивают как тяжелое. РИСУНКИ
MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 20.09.2003
Извещение опубликовано: 20.11.2004 БИ: 32/2004
|
||||||||||||||||||||||||||