Патент на изобретение №2206977

Published by on




РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ



ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА
ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ,
ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ
(19) RU (11) 2206977 (13) C1
(51) МПК 7
A01G7/00, A01H1/04
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ

Статус: по данным на 07.04.2011 – прекратил действие

(21), (22) Заявка: 2001126632/13, 01.10.2001

(24) Дата начала отсчета срока действия патента:

01.10.2001

(45) Опубликовано: 27.06.2003

(56) Список документов, цитированных в отчете о
поиске:
АЛЕШИН Е.П. и др. Изучение влияния пониженной температуры на фосфорный обмен как метод оценки сортов риса на холодостойкость. Труды Кубанского СХИ. – Краснодар, 1975, т. 98, вып.126, с. 25. САВИЦКАЯ Н.Н. О физиологической роли пролина в растениях. Научные доклады Высшей школы. – 1976, №2, с. 70. КУЗНЕЦОВ В.В. Пролин при стрессе: Биохимическая роль, метаболизм, регуляция. Физиология растений. – 1999, т. 46, №2, с. 332.

Адрес для переписки:

440014, г.Пенза, ул. Ботаническая, 30, Пензенская госсельхозакадемия, кафедра растениеводства, Стаценко А.П.

(71) Заявитель(и):

Пензенская государственная сельскохозяйственная академия,
Стаценко Александр Петрович

(72) Автор(ы):

Стаценко А.П.,
Кузин Е.Н.,
Кузнецов А.Ю.

(73) Патентообладатель(и):

Пензенская государственная сельскохозяйственная академия,
Стаценко Александр Петрович

(54) СПОСОБ ОЦЕНКИ ХОЛОДОСТОЙКОСТИ РАСТЕНИЙ


(57) Реферат:

Изобретение предназначено для использования в области сельского хозяйства. Способ включает двухнедельное проращивание семян испытуемых культур или сортов в термостате на увлажненной фильтровальной бумаге без доступа света. Проростки ступенчато охлаждают в холодильной камере в температурном режиме: первые сутки – при 10oС, вторые сутки – при 5oС. После этого определяют содержание свободного пролина в листьях и вычисляют коэффициент холодостойкости растений, который выражают отношением содержания этой аминокислоты в листовой массе после охлаждения растений к исходной. При этом выделяют три группы устойчивости: высокохолодостойкую – коэффициент холодостойкости 3,01 и выше; среднехолодостойкую – 1,51-3,00; низкохолодостойкую – 1,50 и ниже. Изобретение позволяет ускорить и упростить процесс оценки, а также повысить ее объективность. 1 табл.


Изобретение относится к области сельского хозяйства /растениеводства/ и может быть использовано для определения холодостойкости культурных растений различных систематических групп, а также новых сортов и селекционного материала.

Известны прямые и косвенные лабораторные методы определения холодостойкости растений, в основе которых лежит учет всхожести семян при низких температурах, скорость роста первичного корня при охлаждении, время наступления плазмолиза, величина центробежной силы смещения хлоропластов и др. [1].

Названные методы отличаются относительно низкой объективностью, продолжительным временем оценки, невозможностью проведения массовых /серийных/ анализов, что препятствует их широкому использованию в сельскохозяйственной практике.

Известен также биохимический метод оценки холодостойкости растений, основанный на учете изменчивости содержания макроэргических соединений фосфора в растительных тканях в процессе охлаждения [2].

Однако этот метод сложен в исполнении, требует высокой квалификации исполнителя и дорогостоящего лабораторного оборудования, что не позволяет широко использовать для серийной оценки холодостойкости растений.

Имеются также сведения о том, что в процессе охлаждения в вегетативных органах растений различных систематических групп накапливается в свободном виде аминокислота пролин, которая обладает свойством защищать клеточные структуры в условиях холодового стресса [3, 4]. Используя названные качества пролина, нами разработан наиболее совершенный, по сравнению с упомянутыми выше, способ оценки холодостойкости растений.

Целью предлагаемого изобретения является повышение объективности и существенное ускорение процесса оценки, а также его упрощение, что открывает перспективу для массовой /серийной/ оценки холодостойкости растений.

Поставленная цель достигается путем двухнедельного проращивания семян испытуемых культур /или сортов/ в термостате на увлажненной фильтровальной бумаге без доступа света с последующим ступенчатым охлаждением проростков в холодильной камере в температурном режиме: первые сутки при 10oС, вторые – при 5oС с последующим определением содержания свободного пролина в листьях и вычислением коэффициентов холодостойкости растений, которые вычисляются отношением содержания аминокислоты в листовой массе после охлаждения растений к исходной. При этом выделяется три группы устойчивости: высокохолодостойкая /коэффициент холодостойкости 3,01 и выше/; среднехолодостойкая /1,51-3,00/; низкохолодостойкая /1,50 и ниже/.

Для этого в партиях проростков до и после охлаждения с помощью скальпеля или лезвия отделяются первичные листья. Двухграммовые навески заливаются 20 мл 3%-ной сульфосалициловой кислоты и гомогенизируются на гомогенизаторе или растираются в ступке с кварцевым песком до получения однородной массы. После фильтрования к 2 мл фильтрата добавляется 2 мл кислого нингидрина и 2 мл ледяной уксусной кислоты. Кислый нингидрин готовится непосредственно перед анализом путем нагревания смеси из 1,25 г нингидрина, 30 мл ледяной уксусной кислоты и 20 мл 6-молярной ортофосфорной кислоты до кипения.

Приготовленная смесь выдерживается в течение одного часа на кипящей водяной бане с последующим резким охлаждением пробирок в проточной водопроводной воде.

Образовавшееся окрашенное соединение экстрагируется добавлением в пробирки по 4 мл толуола с последующим интенсивным взбалтыванием в течение 20 с. После 15-ти минутного отстаивания верхний слой сливается в кюветы /5 мм/ фотоэлектрокалориметра ФЭК-56М. Интенсивность окраски измеряется при длине волны 520 нм.

Концентрацию свободного пролина определяют по стандартной кривой и расчитывают в мг% на сырую массу листьев. На основании полученных данных расчитываются коэффициенты холодостойкости, которые позволяют оценить уровень устойчивости группы растений и отнести ее к той или иной группе устойчивости.

В качестве примера приводим сравнительную оценку холодостойкости культурных растений различных систематических групп.

Анализ оценки холодостойкости позволяет разделить все испытуемые культуры на три группы: высокохолодостойкие /ячмень, горох, свекла/, среднехолодостойкие /салат, бобы, гречиха/ и низкохолодостойкие /кукуруза, просо, огурец/, что вполне согласуется с данными, полученными при использовании традиционного метода холодового проращивания семян.

ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ
1. Диагностика устойчивости растений к стрессовым воздействиям /Под ред. Г.В. Удовенко, ВИР. – Л. – 1998. – /с.62/.

2. Алешин Е.П. Воробьев Н.В. Изучение влияния пониженной температуры на фосфорный обмен как метод оценки сортов риса на холодостойкость. – Труды Кубанского СХИ, 1975. – Краснодар. – Т.98. – Вып.126, – /с.25/.

Формула изобретения


Способ оценки холодостойкости растений, включающий двухнедельное проращивание семян испытуемых культур или сортов в термостате на увлажненной фильтровальной бумаге без доступа света, отличающийся тем, что используют ступенчатое охлаждение проростков в холодильной камере в температурном режиме: первые сутки – при 10oС, вторые сутки – при 5oС с последующим определением содержания свободного пролина в листьях и вычислением коэффициента холодостойкости растений, который выражают отношением содержания этой аминокислоты в листовой массе после охлаждения растений к исходной, а также выделяют три группы устойчивости: высокохолодостойкую – коэффициент холодостойкости 3,01 и выше; среднехолодостойкую – 1,51-3,00; низкохолодостойкую – 1,50 и ниже.

РИСУНКИ

Рисунок 1


MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 02.10.2003

Извещение опубликовано: 20.11.2004 БИ: 32/2004


Categories: BD_2206000-2206999