Патент на изобретение №2199741
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЖЕЛЕЗИСТО-КИСТОЗНОЙ ГИПЕРПЛАЗИИ
(57) Реферат: Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии. Способ заключается в следующем: готовят фиксированные препараты соскобов эндометрия, определяют в них количество клеток с апоптозом и патологическими митозами в процентах по отношению к общему числу клеток железистого эпителия, вычисляют метофазно-профазное отношение в ядрах железистого эпителия, при количестве клеток с апоптозом, равном 0,64%, количестве патологических митозов 0,68% и метофазно-профазном соотношении 0,48 и более диагностируют железисто-кистозную гиперплазию. Способ позволяет повысить точность диагностики и выявить лиц высокого онкологического риска. 2 табл. Изобретение относится к области медицины и может быть использовано в гинекологии, гистологии. Рост заболеваемости раком тела матки в последние годы диктует необходимость более углубленного изучения патологических состояний слизистой тела матки с целью раннего выявления предопухолевых процессов и выявления групп высокого риска по раку эндометрия среди больных с гиперпластическими процессами [1, 4, 8]. Ведущая роль в распознавании патологического процесса в эндометрии принадлежит морфологическому исследованию, однако в настоящее время дополнительные данные об особенностях роста тканей являются отправной точкой при выборе метода лечения и прогноза [6]. Гиперпластические процессы эндометрия представляют собой пролиферативные изменения [9]. Процессы тканевого гомеостаза и гиперплазии регулируются факторами роста, отвечающими за жизнеспособность клеток, и апоптозом, контролирующим размеры ткани [5]. Смерть биологической клетки как естественный, запрограммированный природой процесс, не связанный с патологией, впервые был описан почти полвека назад, а термин “апоптоз” предложил Kerr и соавторы [11]. Принято считать, что основное предназначение апоптоза как физиологического процесса – поддержание постоянного количества клеточных элементов в органах и тканях организма и удаление клеток, прошедших свой жизненный цикл. Исследования последних лет позволяют сделать вывод о существовании двух фундаментальных типов клеточной смерти – апоптоза и некроза. В отличие от некроза процессы апоптоза происходят в ядре и цитоплазме при сохранении целостности клеточной оболочки [3, 7]. Большинство касающихся апоптоза исследований посвящено злокачественным неопластическим процессам эндометрия. Работы по изучению апоптоза при фоновых процессах эндометрия в доступной нам литературе не найдены. Задачей изобретения является выявление цитоморфологических факторов риска развития рака эндометрия. Поставленную задачу решают за счет того, что вычисляют количество апоптозных и некротических клеток, правильных и патологических митозов в процентах по отношению к общему числу эпителиальных клеток при фоновых процессах эндометрия, высчитывают метофазно-профазное соотношение в каждом индивидуальном случае, количество клеток с апоптозом и патологическими митозами, равное 0,6%, и метофазно-профазное соотношение большее 0,48 считают цитоморфологическими критериями высокого риска развития рака эндометрия. Способ осуществляют следующим образом: материалом для исследования служит слизистая оболочка матки, полученная при раздельном диагностическом выскабливании. Гистологические срезы окрашивают гематоксилин-эозином для определения соединительной ткани – по Ван-Гизону. Исследование проводят на световом микроскопе при самом малом и большом увеличении (40 и 300 соответственно). Диагноз гиперпластических процессов эндометрия ставят на основании общепринятых критериев [10] . Под иммерсионным объективом при увеличении х1350 в фиксированных препаратах, нескольких срезах и полях зрения на общее число эпителиальных клеток не менее чем 2000 проводят подсчет: апоптозных клеток, некротических клеток, клеток с патологическими митозами, определяют все формы митоза при фоновых процессах эндометрия. Объект исследования: изучены соскобы эндометрия 102 больных с нарушением менструальной функции в репродуктивном возрасте, у которых диагностированы полипы и гиперплазия эндометрия, составившие основную группу. В зависимости от гистологического диагноза все обследованные были разделены на 3 группы. В 1 группе были объединены женщины с полипами эндометрия – 70 человек. Эта группа больных в зависимости от гистоструктуры последних была разделена на две подгруппы: 1a – с железистыми полипами – 34 женщины; 1в – с железисто-фиброзными полипами – 36 женщин. 32 пациентки с железисто-кистозной гиперплазией составили вторую группу. Группу сравнения составили 50 женщин без патологии эндометрия. В контрольной группе ткань эндометрия для гистологического изучения была получена у 30 в I фазу менструального цикла и у 20 во II фазу. Средний возраст больных с железистыми полипами составил 32,1  1,4 года; с железисто-фиброзными полипами – 33,51,5; железисто-кистозной гиперплазией – 34,71,3; средний возраст здоровых женщин был 29,31,09.
Среди 102 обследованных больных длительность заболевания в течение 1 месяца отмечена у 66; до 6 месяцев – у 11; от года и более – 22 и лишь трое обратились с жалобами к гинекологу впервые. Лечебно-диагностические выскабливания эндометрия ранее производились 12 больным от 1 до 3 раз.
В результате проведенного исследования (табл. 1) установлено, что в фазе пролиферации эндометрия отмечается высокая митотическая активность в железистом эпителии, равная 7,7%, которая в фазе секреции достоверно (р<0,001) снижается до 1,6%. Это не удивительно, поскольку общеизвестно, что в фазе пролиферации эндометрия женщин наблюдается усиленное размножение клеток, сменяющееся в фазе секреции их дифференцировкой и затем отторжением. При железисто-кистозной гиперплазии эндометрия в эпителии желез количество правильных митозов колебалось от 2,0% до 18,4% и в среднем составило 8,6%. При железистых полипах эндометрия и железисто-кистозной гиперплазии количество митозов было одинаковым 8,62% и 8,6%, что свидетельствует, по-видимому, о сходных изменениях уровня пролиферации клеток при этих патологических состояниях. При железисто-фиброзных полипах выявлено достоверное (р<0,05) снижение митотической активности по сравнению с группами 1а и 2, что объясняется меньшим количеством желез и преобладанием стромального компонента в структуре полипа.
В контрольной группе женщин выявлено небольшое количество патологических митозов в эндометрии в стадии пролиферации (0,32%) и имеется достоверная (р<0,001) тенденция к их уменьшению (0,08%) в фазе секреции менструального цикла. При железисто-кистозной гиперплазии эндометрия процент патологических митозов колебался от 0,2% до 2,04% (в среднем составил 0,68%) и значительно превышал таковой в фазу пролиферации. Отмечается незначительное увеличение числа патологических митозов, в сравнении с контрольной группой, при железистых полипах эндометрия – до 0,44% и снижение при железисто-фиброзных – до 0,25% (соответственно группам 1в и 1а). Значения в этом случае достоверно были незначимы. Умеренное повышение числа патологических митозов в железистом эпителии слизистой тела матки связано с действием эстрогенов, активно влияющих на процессы клеточного размножения [2].
Очень важными в дифференциально-диагноситческом плане являются изменения метофазно-профазного отношения в ядрах железистого эпителия неизмененной слизистой тела матки и при гиперпластических процессах разной степени выраженности. В неизмененном эндометрии этот показатель в нашем исследовании равнялся 0,23-0,25, при железисто-кистозной гиперплазии эндометрия отмечается его увеличение в 2 раза (0,48). В случаях развития полипов эндометрия в зависимости от их гистоструктуры метофазно-профазное отношение равнялось 0,19 в группе 1в и 0,39 в группе 1а.
Процентное содержание клеток в состоянии апоптоза в фазе пролиферации согласно полученных нами результатов было равно 1,2%, некроза – 0,74%; в фазе секреции – 4,02% и 7,67% соответственно (р<0,01) и (р<0,001). В железисто-фиброзных полипах количество апоптозных клеток составило 1,44%, в железистых полипах – 1,2%; количество клеток, подвергшихся некрозу, – 1,64% и 2,94% соответственно. Апоптозные тела во 2-й группе выявлены в 0,64%, что достоверно отличалось от аналогичного показателя во всех остальных группах (р<0,01 с контролем), (р<0,05 по сравнению с группами 1а и 1в). Увеличение нормальной (апоптозной) гибели клеток в фазу секреторных изменений эндометрия логично связать с дифференцировкой, а усиление некроза с нарушением трофики и отторжением эндометрия в конце этой фазы. Снижение апоптозного индекса при железисто-кистозной гиперплазии может отражать атипичные изменения в клетках эпителия желез эндометрия. В нашем исследовании наблюдалась обратная корреляционная зависимость между апоптозным индексом и митотической активностью, количеством патологических митозов.
Таким образом, в результате проведенного исследования нами установлено, что:1) высокий митотический индекс, характерный как для неизмененного эндометрия в фазе пролиферации, так и для железистых полипов и железисто-кистозной гиперплазии не позволяет судить о степени патологической пролиферации клеток; 2) фоновые процессы эндометрия развиваются на фоне не усиления пролиферации клеток, а ингибировании их запрограммированной гибели, то есть апоптоза; 3) при преобладании железистого компонента (в железистых полипах и железисто-кистозной гиперплазии) происходит задержка деления ядра на стадии метофазы. Поскольку задержка деления ядра на стадии метофазы является одним из ранних признаков нарушения митотического деления клеток, то увеличение метофазно-профазного отношения может быть одним из критериев ранних признаков озлокачествления эпителия; 4) дифференциально-диагностическую ценность приобретает показатель – число патологических митозов (рассеивание, набухание и склеивание хромосом в метафазе); 5) апоптоз является более выгодным для ткани механизмом поддержания структурно-функционального гомеостаза. Усиление некротических изменений может индуцировать вторичные повреждения в ткани эндометрия. Отсюда следует, что при гиперпластических процессах эндометрия качественные изменения митотического режима (число патологических митозов, увеличение метофазно-профазного соотношения), апоптоза имеют дифференциально-диагностическую ценность, могут служить критериями оценки степени пролиферации клеток и могут быть использованы для дополнительной характеристики степени тяжести процесса, а также для выявления лиц высокого онкологического риска. Источники информации: 1. Бохман Я.В., Вишневский А.С., Волкова А.Г. Профилактика, ранняя диагностика и комплексное лечение рака тела матки./ Л. 1981. – С. 6-7. 4. Мерабишвили В.М., Бохман Я.В. Профилактика, ранняя диагностика и комплексное лечение рака тела макти./ Л. 1981. – С. 3-5. 5. Новожилова А.П., Плужников Н.Н., Новиков В.С. Программированная клеточная гибель / СПб: Наука, 1996.- 276 с. 8. Савельева Г.М. Профилактика, ранняя диагностика и комплексное лечение рака тела матки./ Л. 1981. – С. 18. 9. Савельева Г. М. Предрак эндометрия. / М.- 1980. – 200 с. 10. Хмельницкий O. K. Патоморфологическая диагностика гинекологических заболеваниий./СПб, СОТИС. 1994. – 180 с. 11. Kerr Y. F.R., Wyllie A.R. Apoptosis: a basic biological phenomenon with wide ranging implications in tissue kinetics. Br. J. Cancer. 1972, 26: 2: 239-257. Формула изобретения
РИСУНКИ
MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 11.04.2002
Номер и год публикации бюллетеня: 18-2004
Извещение опубликовано: 27.06.2004
|
||||||||||||||||||||||||||
