Патент на изобретение №2198505
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ РЕГЕНЕРАЦИИ РАСТЕНИЙ АБРИКОСА ИЗ НЕЗРЕЛЫХ ЗАРОДЫШЕЙ
(57) Реферат: Изобретение относится к сельскому хозяйству и биотехнологии, может быть использовано для микроклонального размножения ценных сортов абрикоса. Питательная среда, составленная по прописи среды Мурасиге-Скуга /1962/, дополнительно содержит в качестве стимулятора роста экстракт элеутерококка 0,5-2 мг/л. Сочетание компонентов и концентрация стимулятора роста обеспечивает значительное сокращение срока получения полноценных регенерантов, значительное повышение коэффициента размножения, снижение себестоимости питательной среды. 2 табл. Использование: в сельском хозяйстве и биотехнологии, в частности, для микроклонального размножения ценных сортов абрикоса. Сущность изобретения: питательная среда по рецепту среды Мурасиге-Скуга содержит дополнительно в качестве стимулятора роста экстракт элеутерококка жидкий 0,5-2 мл на 1 л среды (2 таблица). Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано для ускоренного размножения посадочного материала абрикоса на основе культуры ткани незрелых зародышей. Известны питательные среды для получения дополнительных побегов с целью микроклонального размножения и получения побегов нормальных параметров (Ja micropropagajione in ortoflorofruiticulturae, Riv, Fruttic. Ortofloric, 1989, 51,5,5-41; Dvorak A. Metody minozeni a zajistem zdraveho vychoziho materialu, Fruit grouring, Sullp, 1988, 311-315). Недостатками этих сред являются длительный период культивирования, часто встречающаяся витрифицированность побегов, дороговизна добавляемых в среды стимуляторов роста. Наиболее близкой по технической сущности к изобретению является питательная среда Мурасиге-Скуга /1962/ в полном объеме (R.Е.Pieterse. Regeneration of plants from callus anol embryos of “Royal” Apricot, Plant Cell, Tissue and Organ Culture, 19: 175-179, 1989. Состав среды прототипа следующий, в переводе миллимолей в мл/л: NН4NО3 – 1650 KNO3 – 1900 CaCl2 2H2O – 440 МgSО4 7Н2О – 370 KH2PO4 – 170 Н3ВО3 – 6,2 MnSO4 4H2O – 22,3 CoCl2 6H2O – 0,025 СuSO4 5Н2О – 0,025 ZnSO4 7Н2О – 8,6 Na2МоО4 2Н2О – 0,25 КI – 0,83 FеSO4 7Н2О – 27,8 Na2 ЭДТА 2Н2О – 37,3 Тиамин хлорид – 0,2 Пиридоксин хлорид – 0,5 Никотиновая к-та – 0,5 Миоинозитол – 100 2,4-Д – 1,0 6-БАП – 0,5  -НУК – 0,1Агар – 6000 Недостатками данной среды являются длительность процесса размножения, т. к. на ней возможно получение лишь каллуса, а для регенерации побегов нужен перенос на питательные среды другого состава, что намного усложняет и увеличивает длительность процесса получения сеянцев нормальных параметров. Целью изобретения является сокращение сроков размножения и уменьшение себестоимости питательной среды. Цель достигается тем, что предлагаемая питательная среда, составленная по основной прописи среды Мурасиге-Скуга /1962/, в качестве стимулятора роста содержит экстракт элеутерококка 0,5-2 мл/л, выпускаемый медицинской промышленностью для лечебных целей. Пример. Проводили исследования развития узелкового каллуса и регенерации побегов из незрелых зародышей Prunus armeniaca L. сорта Royal /как и в прототипе/. От свободно опыляемых деревьев зародыши брались через 35 дней после полного цветения. Семена стерилизовались в 0,5% р-ре сулемы в течение 7 минут, трижды промывались стерильной дистиллированной водой, после чего из них в асептических условиях вычленяли зародыши. В 2-3 местах делали неглубокие надрезы и высаживали на питательные среды составов, приведенных в табл.1. Маточные растворы макро- и микросолей готовили на бидистиллированной воде, а питательные среды готовили общепринятыми методами. Автоклавирование проводили при 1 атм в течение 20 минут. Пробирки с эксплантами ставили в термокамеру со следующими параметрами: температура 23-25oС, длительность светового периода 16 часов, освещенность 1500 лк, влажность 70%. Через 15-25 дней каждый эксплант в местах надрезов образовывал узелковый каллус. Для получения побегов зародыши с каллусом пересаживали на свежую питательную среду того же состава, в результате чего через 25-30 дней каждый комочек каллуса образовывал до 10-15 побегов длиной 15-25 мм. Регенеранты укореняли и высаживали в теплицу. В табл. 2 представлены основные параметры развития узелкового каллуса и дифференциации побегов при выращивании на испытуемых питательных средах. Из данных табл. 2 следует, что питательная среда предлагаемого состава обеспечивает значительное по сравнению с прототипом сокращение сроков образования узелкового каллуса до 15,8-0,3 дней вместо 90-120, увеличение коэффициента размножения до 1:40-50, а также повышение эффективности выхода стандартных черенков для укоренения в грунте. Использование изобретения позволяет сократить сроки размножения побегов, повысить эффективность выхода стандартных черенков при коэффициенте размножения 1:40-50, увеличить общую производительность селекционного процесса от высадки незрелых зародышей на питательную среду до укоренения и высадки растений в грунт, значительно снизить себестоимость питательной среды. Формула изобретения
Аммоний азотнокислый – 1640-1660 Калий азотнокислый – 1800-1900 Кальций хлористый двухводный – 430-445 Магний сернокислый семиводный – 360-390 Калий фосфорнокислый однозамещенный – 160-190 Борная кислота – 6,0-7,5 Марганец сернокислый четырехводный – 22,0-23,0 Кобальт хлористый шестиводный – 0,02 Медь сернокислая пятиводная – 0,02 Цинк сернокислый семиводный – 8,0-9,5 Натрий молибденовокислый двухводный – 0,2-0,5 Калий иодистый – 0,75-0,9 Железо сернокислое семиводное – 27,0-30,0 Тиамин хлорид – 0,2 Пиридоксин хлорид – 0,5 Никотиновая кислота – 0,5 Мезоинозит – 100 Экстракт элеутерококка – 0,5-2 Сахароза – 30000 Агар – 6000 Вода – До 1 лд РИСУНКИ
MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 10.08.1998
Извещение опубликовано: 27.09.2004 БИ: 27/2004
|
||||||||||||||||||||||||||
