Патент на изобретение №2197730
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ ОЦЕНКИ АНТИБАКТЕРИАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА К ДИФТЕРИИ
(57) Реферат: Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологическим и биохимическим методам оценки напряженности антибактериального иммунитета к возбудителю дифтерии. Сущностью способа является определение иммуноферментным анализом в слюне пациента уровня специфических секреторных IgА к корд-фактору коринебактерий дифтерии, по величине которого проводят оценку антибактериального иммунитета. Техническим результатом является повышение эффективности и специфичности оценки напряженности антибактериального иммунитета к дифтерии. Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологическим и биохимическим методам исследования биологических жидкостей человека для оценки напряженности антибактериального иммунитета к дифтерии. Наиболее близким является способ определения антибактериальных антител при дифтерийной инфекции (Кондрашина Н. Н., Шмелева Е.А., Берестень С.Ф. ЖМЭИ, 1987, N 9, c.115-117). По этому способу при оценке антибактериального иммунитета к коринебактериям дифтерии в сыворотке крови исследуют количество антител к белку клеточной стенки с Мм 64 кДа. Определение антител класса IgG проводят в сыворотке крови с использованием иммуноферментного анализа (ИФА). Недостатком этого способа является то, что исследование уровня антибактериальных антител проводится в сыворотке крови, тогда как местом локализации возбудителя является слизистая носоглотки. По этому способу определяют антитела класса IgG, в то время как специфическими, протективными антителами слизистых являются секреторные IgA (SIgA). В прототипе в качестве антигена используется белок клеточной стенки коринебактерий, функциональное значение которого неизвестно, следовательно, протективная значимость антител к нему необоснованна. Таким образом, этот способ является недостаточно информативным, специфичным и точным при оценке напряженности антибактериального противодифтерийного иммунитета. Целью предлагаемого способа является повышение эффективности и специфичности оценки напряженности антибактериального иммунитета к дифтерии. Нами предлагается исследование протективно значимых специфических секреторных антител изотипа IgA к коринебактериям дифтерии в слюне к корд-фактору (трегалозо-6,6′-димиколат) – фактору патогенности, играющему ведущую роль в адгезии и колонизации микроорганизмов на слизистых. Для достижения этой цели проводят иммуноферментный анализ (ИФА) слюны лиц, подлежащих обследованию. Используют иммунологические планшеты, сорбированные в качестве антигена корд-фактором коринебактерий дифтерии. Определяют секреторные IgA к корд-фактору в слюне и по их наличию оценивают устойчивость организма к колонизации слизистых коринебактериями дифтерии. Способ осуществляется следующим образом. Суспензию высокочищенного корд-фактора (трегалозо-6,6′-димиколат) с концентрацией 1,0 ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() – контроль фона (ФСБ-БСА) – 0,06; – отрицательный контроль (слюна новорожденных) – 0,11; – положительный контроль (слюна реконвалеспента) – 1,89; – слюна пациента “А” – 0,39; – слюна пациента “В” – 1,98. Индекс антител к корд-фактору для положительной контрольной слюны (отношение величины ОП положительной контрольной слюны к ОП отрицательной контрольной слюны) составляет 1,89/0,11=17,2. Затем определяют индекс уровня антител к корд-фактору в слюне пациента “А” (отношение величины ОП слюны пациента “А” к ОП отрицательной контрольной слюны (слюна новорожденного)) : 0,39/0,11=3,5. Аналогичным образом определяют индекс антител в слюне пациента “В”, у которого индекс антител к корд-фактору составил 1,98/0,11=18,0. Таким образом, в слюне пациента “В” содержание антибактериальных противодифтерийных антител оказалась высоким, сопоставимым с их концентрацией в положительной контрольной слюне. В слюне пациента “А” содержание антибактериальных противодифтерийных антител оказалось низким. Таким образом, предлагаемый способ позволяет осуществлять более объективную оценку антибактериального иммунитета к дифтерии, так как основан на определении протективно значимых специфических антител в слюне к бактериальному антигену, фактору патогенности, ответственному за процессы адгезии и колонизации микроорганизмов на слизистых. С эпидемиологической точки зрения важно, что исследование проводится с использованием неинвазивных методов. Исследование уровня секреторных антител изотипа IgA, имеющих протективное значение, к патогенетически значимому антигену коринебактерий дифтерии корд-фактору обеспечивает высокую точность, надежность и специфичность диагностики напряженности антибактериального противодифтерийного иммунитета. Использование с этой целью метода иммуноферментного анализа обеспечивает высокую методическую чувствительность, точность, воспроизводимость и быстродействие диагностики. Возможность широкого практического применения обеспечивается использованием широко распространенного в учреждениях практического здравоохранения типового оборудования для иммуноферментного анализа. Высокое быстродействие при достаточной точности наряду с комплексной автоматизацией дает возможность эффективно использовать предлагаемый способ при массовых эпидемиологических и клинических обследованиях населения для исследования колонизационной резистентности, формировании носительства, эффективности вакцинопрофилактики, при конструировании и оценке различных вакцинных препаратов и так далее, а также для проведения научных исследований. Метод разработан и апробирован в лаборатории иммунохимии и отделении микробиологии и биохимии бактерий Нижегородского НИИ эпидемиологии и микробиологии им. академика И.Н. Блохиной. Разработаны и оформлены методические рекомендации “Комплекс методов оценки антибактериального и антитоксического популяционного иммунитета к коринебактериям дифтерии” (Немов В.В., Дегтева Г.К., Ивашкина С.Г., Никитина З.И. , Беляева Е.В., Ермолина Г.Б.). Формула изобретения
MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 04.01.2007
Извещение опубликовано: 7.01.2008 БИ: 03/2008
|
||||||||||||||||||||||||||