Патент на изобретение №2196587

(54) СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ДЕСТРУКТИВНОЙ ФОРМЫ ПАНКРЕАТИТА

(57) Реферат:

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной абдоминальной хирургии, и может быть использовано для профилактики и лечения тяжелых деструктивных форм панкреатита. Способ отличается тем, что в желудочно-кишечный тракт три раза в день вводят по 1 мл коллоидного раствора, содержащего 0,02 г хитозана пищевого “Амидан” с мол.м. 10000-15000 дальтон и степенью деацетилирования 90-95%. Предложенный способ позволяет снять тяжелую воспалительную реакцию крови и снизить летальность. 4 ил., 1 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной абдоминальной хирургии, и может быть использовано для профилактики и лечения тяжелых деструктивных форм панкреатита (панкреонекроза).

Известны способы энтеросорбции при тяжелых формах острого экспериментального панкреатита (Н.А. Беляков. Энтеросорбция.- Л., 1991.- 336 с.). Автор на 4 сериях белых крыс моделировал острый панкреатит путем замораживания железы по методике В.А.Малхасяна с соавт. (1972) (Малхасян В.А., Симаворян П. С., Манукян С.А. Труды Ереванского ин-та усоверш. врачей, 1972.- вып. 5.- С. 57-63) и вводил через желудочный зонд однократно ваулен, хитин, энтеродез или полифепан в дозе 0,2 г. В течение первых двух суток развития заболевания в контроле (без энтеросорбции) летальность животных составила 32%. В 1-е сутки после воспроизведения острого панкреатита контрольные животные были вялыми, плохо принимали пищу и воду. Летальность составила 24%. На 2-е сутки у части животных увеличивалась двигательная активность, перемещение по клетке, потребление большого количества воды, сохранялся отказ от пищи. Дыхание частое и поверхностное, цианоз ушных раковин, кончиков носа и лап. На вторые сутки еще 8% животных погибало. Остальные животные (68%) выздоравливали без какого-либо лечения. На вскрытии у погибших животных в брюшной полости регистрировалось большое количество бляшек жирового некроза на париетальной брюшине, на брюшине внутренних органов, у части животных – выпот в брюшной полости.

Однократное введение в желудок 0,2 г водной взвеси ваулена снижало летальность животных в течение 2-х суток до 18%. Уровень активности амилазы в сыворотке крови в течение первых суток по сравнению с контролем снижался на 9%.

Однократное введение в желудок 0,2 г водной взвеси полифепана понижало летальность животных в те же сроки до 15% по сравнению с контролем. Снижение уровня амилазы в крови в первые сутки заболевания составляло 11% по сравнению с контролем. При этом величина лейкоцитоза на 3-и сутки течения заболевания понижалась на 19,5% по сравнению с контролем.

Прототипом настоящего технического решения является использование в терапии панкреатита хитина – линейного высокоацетилированного полимера естественного происхождения (из хитинового скелета краба, криля, креветки, высших или низших грибов и т.п.) (Н.А. Беляков. Энтеросорбция.- Л., 1991.- 336 с.). Однократное введение в желудок 0,2 г водной взвеси хитина снижало летальность крыс в течение 2-х суток до 20% по сравнению с контролем (32%). Активность амилазы в периферической крови в течение 1-х суток снизилась по сравнению с контролем на 13,2%.

Однако известные способы энтеросорбции острого панкреатита не позволяют предотвращать развитие деструктивного панкреатита (жирового панкреонекроза), снижать до нормы воспалительную реакцию в периферической крови и степень эндогенной интоксикации, существенно снижать летальность.

Цель изобретения – предотвратить развитие деструктивной формы панкреатита, снять тяжелую воспалительную реакцию крови и поджелудочной железы, степень эндогенной интоксикации, предотвратить летальность.

Поставленную цель достигают за счет того, что вводят через желудочный зонд в течение трех дней коллоидный раствор хитозана пищевого “Амидан” по 1 мл (0,02 г) три раза в день с молекулярной массой 10000-15000 дальтон и степенью деацетилирования 90-95%. Хитозан – продукт деацетилированного хитина – линейный полимер природного происхождения, у которого в полимерной цепи увеличено число аминогрупп (NH₂ ⁺) за счет удаленных ацетильных группировок (NHCOCH₃) (см. фиг. 1-4). Чем выше степень (%) замещения ацетильных групп на аминные, тем выше поликатионная активность полимера (т.е., тем выше сила электростатического притяжения отрицательно заряженных частиц, молекул в кишечном содержимом).

Способ осуществляют следующим образом. На белых крысах моделируют жировой панкреонекроз по методу И.Н. Большакова, Т.С. Белохвостиковой (А.с. 1259328, G 09 В 23/28) от 23.09.1986; Бюл. 35). После введения в проток поджелудочной железы смеси трипсина, 40% этилового спирта и 1% спиртового раствора бриллиантового зеленого в соотношении 55:5:1 проток не перевязывают. Летальность животных после моделирования заболевания составляла в течение 5 суток 100%, в течение первых трех дней – 70%. Послеоперационный период характеризовался полной адинамией, отказом от воды и пищи в течение 1-5 суток.

На вскрытии погибших животных в брюшной полости регистрировался значительный выпот (5-7 мл), множественные жировые (“стеариновые”) бляшки на париетальной и висцеральной брюшине, существенное увеличение размеров поджелудочной железы.

Опытные животные были разделены на серии по 10 особей в каждой. После операции и снятия нейролептанальгезии (наркоза) через желудочный зонд 70 крысам в течение 3-х дней вводились в количестве по 1 мл 3 раза в день следующие образцы хитозанов в качестве сравнительных контролей с лучшим образцом препарата:
1. Хитозан гелевый мелкодисперсный, молекулярная масса 180000-200000 дальтон, степень деацетилирования 75%, рН 7,0 (10 животных).

2. Хитозан гелевый мелкодисперсный, молекулярная масса 100000-120000 дальтон, степень деацетилирования 94-95%, рН 7,0 (10 животных).

3. Хитозан коллоидный, молекулярная масса 10000-150000 дальтон, степень деацетилирования 90%, рН 7,0 (10 животных).

4. Хитозан коллоидный, молекулярная масса 10000-150000 дальтон, степень деацетилирования 94-95%, рН 7,0 (10 животных).

5. Хитозан гелевый мелкодисперсный, молекулярная масса 100000-120000 дальтон, степень деацетилирования 75%, рН 7,0 (10 животных).

6. Хитозан гелевый мелкодисперсный, молекулярная масса 180000-2000000 дальтон, степень деацетилирования 94%, рН 7,0 (10 животных).

7. Контрольная группа животных (без лечения).

Результаты исследований представлены в таблице (см. в конце описания).

Все животные выведены из опыта на 4-е сутки. Результаты исследования образцов хитозана указывают на высокую эффективность препаратов 3 и 4. Применение этих образцов в течение трех дней предотвращает развитие деструктивной формы панкреатита, снимает тяжелую воспалительную реакцию крови и поджелудочной железы, степень эндогенной интоксикации, предотвращает летальность.

Пример 1. Трем белым крысам массой 200 г под нейролептанальгезией (кетамин+дроперидол) введена в проток поджелудочной железы смесь трипсина, этилового спирта и бриллиантового зеленого согласно техническому решению ((А. с. 1259328, G 09 В 23/28, от 23.09.1986; Бюл. 35). После снятия нейролептанальгезии крысам 1 и 2 в послеоперационном периоде в течение трех дней через желудочный зонд по 1 мл 3 раза в день введены: хитозан гелевый мелкодисперсный с молекулярной массой 180000 дальтон, степенью деацетилирования 75%, рН 7,0 (крыса 1); хитозан коллоидный с молекулярной массой 10000-15000 дальтон, степенью деацетилирования 94%, рН 7,0 (крыса 2). Крыса 3 с воспроизведенной моделью панкреонекроза не получала лечения. Через три дня крыса 1 передвигалась по клетке, принимала самостоятельно воду и пищу (+). На слизистой полости рта регистрировались признаки геморрагий. В периферической крови количество лейкоцитов составило 9900/мкл, активность амилазы крови составила 200 ЕД. Крыса 2 после третьего введения хитозана с молекулярной массой 10000-15000 дальтон и степенью деацетилирования 94% активно передвигалась по клетке, активно самостоятельно принимала пищу и воду (+++). На слизистой полости рта регистрировались следы геморрагий. В периферической крови число лейкоцитов составило 5500/мкл, активность амилазы составила 148 ЕД. Животное 3 в течение трех дней не передвигалось по клетке, при свободном доступе к воде и пище не принимало пищу, слабо потребляло воду. На третьи сутки контрольное животное слабо реагировало на болевые раздражения, на слизистой оболочке полости рта – значительные кровоизлияния. Количество лейкоцитов в 1 мкл крови составило 16600, активность амилазы крови – 292 ЕД. На 4-е сутки все животные выведены из опыта.

Макро- и микроскопическая характеристика картины воспалительного процесса брюшной полости и поджелудочной железы.

На вскрытии в брюшной полости у крысы 1 – до 1 мл свободного экссудата, стенки главного панкреатического протока с выраженной воспалительной, преимущественно лейкоцитарной инфильтрацией, распространяющейся на более мелкие и междолевые протоки. В междольковой строме определяются немногочисленные цепочки из лейкоцитов, ацинусы не изменены (компьютерная система цветного изображения: парафиновый срез ткани поджелудочной железы 1, окраска гематоксилин-эозином, увеличение 1010) (фиг.1).

На вскрытии в брюшной полости у крысы 2 – свободного экссудата нет, кишечник не вздут, единичные мелкие стеариновые бляшки на капсуле поджелудочной железы, железа слабо отечна. В препарате ткани поджелудочной железы 2 ацинусы не изменены, в междолевой строме определяются слабо выраженная лейкоцитарная инфильтрация, в сосудах умеренное полнокровие, стаза крови нет, стенки междольковых протоков не изменены (компьютерная система цветного изображения: парафиновый срез ткани поджелудочной железы, окраска гематоксилин-эозином, увеличение 1010) (фиг.2).

На вскрытии у крысы 3 (нелеченный контроль) поджелудочная железа резко увеличена в размерах, отечна, на железе и тонкой кишке, париетальной брюшине большое количество стеариновых бляшек желтого цвета, на железе определяются геморрагические очаги, в брюшной полости до 8 мл мутного экссудата.

В гистологическом препарате 3″а” поджелудочной железы (компьютерная система цветного изображения: парафиновый срез ткани поджелудочной железы, окраска гематоксилин-эозином, увеличение 104): картина резко выраженного отека, массивная лейкоцитарная инфильтрация междолевой и междольковой стромы с дискомплексацией клеток ацинусов. Сосуды полнокровны, расширены, в строме – очаги некрозов и кровоизлияний (фиг.3).

В препарате 3″б” поджелудочной железы (парафиновый срез ткани поджелудочной железы, окраска гематоксилин-эозином, увеличение 1010): участки жировых некрозов с краевым демаркационным воспалением, представленным лейкоцитарньм валом (фиг.4).

Формула изобретения

Способ лечения деструктивной формы панкреатита путем введения в желудочно-кишечный тракт энтеросорбентов, отличающийся тем, что в желудочно-кишечный тракт три раза в день вводят по 1 мл коллоидного раствора, содержащего 0,02 г хитозана пищевого “Амидан” с мол. м. 10000-15000 дальтон и степенью деацетилирования 90-95%.

РИСУНКИ

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 11.08.2003

Извещение опубликовано: 27.09.2004 БИ: 27/2004