Патент на изобретение №2188824

(54) 2-АМИНО-4-АЦЕТИЛТИАЗОЛО[5,4-B]ИНДОЛ, ЗАЩИЩАЮЩИЙ ОРГАНИЗМ ОТ ВОЗДЕЙСТВИЯ ГИПОКСИИ И ТОКСИЧЕСКОГО ОТЕКА ЛЕГКОГО

(57) Реферат:

Изобретение относится к области химии и фармакологии соединения, относящегося к ряду конденсированных гетероциклов-тиазолоиндолов, а именно к 2-амино-4-ацетилтиазоло[5,4-b]индолу формулы 1, обладающему антигипоксической активностью на уровне эталонного антигипоксанта и активно защищающего от токсического отека легкого. Технический результат – расширение арсенала лекарственных средств для борьбы с гипоксией и токсическим отеком легких. 3 табл.

Изобретение относится к химии конденсированных азотсодержащих гетероциклических систем и конкретно касается соединения формулы 1

Ранее была установлена гепатопротекторная активность гидробромида 2-амино-4-ацетилтиазоло[5,4-b] индола, другие сведения о биологической активности производных этой гетероциклической системы отсутствуют (патент РФ 2076867, МКИ³ 6 С 07 D 478/04, А 61 К 31/40. Гидробромид 2-амино-4-ацетилтиазоло[5,4-b] индола, защищающий печень от отравления четыреххлористым углеродом и способ его получения /Вележева B.C., Мельман А.И. Томчин А.Б., Смирнов А. В. , Оковитый С. В., Гайворонская В.В. РФ 5042409/04, заявлено 19.05.92).

Аналогом по действию является эталонный антигипоксант амтизол формулы 2 (Методические рекомендации по экспериментальному изучению препаратов, предлагаемых для клинического изучения в качестве антигипоксических средств /Под редакцией Л.Д.Лукьяновой. – М.: Б.И., 1990. – 18с.).

Отек легкого достаточно широко распространенная патология в неотложной практике, связанная с воздействием на организм прооксидантных токсикантов, используемых в промышленности и на оборонных объектах (перекись водорода, кислоты, окислы азота, гидразин, компоненты ракетного топлива и т.д.). Эта патология является жизнеугрожающей, патогенетической терапии в настоящее время не существует. Для лечения используют глюкокортикоидные препараты в высоких дозах, поэтому поиск и разработка препаратов для профилактики токсического отека легкого в настоящее время очень актуальны.

Целью данного изобретения является создание нового соединения ряда тиазоло[5,4-b] индола, эффективно защищающего организм от гипоксии и токсического отека легкого.

Поставленная цель достигается химической структурой соединения 1, обладающего вышеуказанными свойствами. При изучении биологической активности заявляемого соединения установлено, что оно защищает организм от воздействий гипобаричеекой гипоксической гипоксии и токсического отека легкого. Что, в свою очередь, позволяет предполагать возможность применения его для предотвращения вредных воздействий факторов гипоксии и прооксидантных токсикантов.

Заявляемое соединение 1 представляет собой белое кристаллическое вещество, трудно растворимое в воде, спирте, ацетоне, легко растворимое в диметилсульфоксиде.

Строение соединения подтверждено данными элементного анализа и спектральными характеристиками, приведенными в тексте примера.

Исследование защитного действия соединения 1 при воздействии гипобарической гипоксической гипоксии. Опыты выполнены на мышах линии C57BL/6J массой 18-20 г. Заявляемое соединение вводили внутрибрюшинно в виде тонкой суспензии с твином-20 в дозе 50 мг/кг за 30 мин до гипоксического эпизода. Оптимальную дозу выбрали на основании предварительных опытов. Эффект препарата сравнивали с известным антигипоксантом амтизолом в дозе 25 мг/кг. Мышам в контроле вводили эквивалентные объемы физиологического раствора.

Гипоксию моделировали в барокамере “поднятием” животных на высоту 10000 м со скоростью 50 м/сек и экспозицией в течение 90 мин. Оценку защитного действия изучали по средней продолжительности жизни и по выживаемости животных после гипоксического эпизода. Активность заявляемого соединения 1 в сравнении с известным аналогом представлена в табл.1.

Ввиду того, что молекулярная масса соединения 1 превосходит массу амтизола в два раза, полученные данные свидетельствуют о том, что заявляемое вещество равно по эффективности эталонному антигипоксанту амтизолу.

Проведена оценка токсического действия заявляемого соединения по величине средней летальной дозы. Исследование проведено на мышах линии C57BL/6J массой 18-20 г. Соединение 1 вводили внутрибрюшинно в виде водной суспензии с твином-20. В группу для введения одной дозы включали 8-10 животных. Наблюдение за состоянием экспериментальных животных проводили в течение суток. LD₅₀>1000 мг/кг. Полученные результаты позволяют заключить, что соединение 1 относится к малотоксичным веществам и обладает достаточной фармакологической широтой.

Исследование соединения 1 для профилактики токсического отека легкого (ТОЛ).

Опыты проводили на белых беспородных мышах-самцах массой 18-24 г. ТОЛ моделировали путем ингаляции мышам фосгена (Методические указания по экспериментальному моделированию ингаляционных поражений ВТВ. ГВМУ МО РФ, М., 1995. – 42 с.). Фосген использовали в дозе 4,2 мгмин/л, что соответствует LCt_50-84. Забой животных осуществляли через 3 и 24 часа после отравления. Оценивали выживаемость животных через 24 часа от начала эксперимента и легочный коэффициент (ЛК), по которому судили о степени отека легкого. ЛК вычисляли по формуле:

Препарат в виде тонкой суспензии в воде с твином-80 вводили внутрибрюшинно за 30-60 мин до индуцирования ТОЛ в дозах 5 и 25 мг/кг. Дозы подобраны в предварительных опытах. Контрольные животные получали инъекцию растворителя в эквивалентном объеме.

Полученные результаты обработаны статистически с использованием t-критерия Стьюдента и точного метода Фишера (Гублер Е.В., Генкин А.А. Применение критериев непараметрической статистики в медико-биологических исследованиях. – Л., 1965. – 58 с.) и приведены в табл.2 и 3.

Установлено, что в дозе 5 мг/кг введение экспериментальным животным заявляемого соединения сопровождалось их 100% выживаемостью по сравнению с контрольными животными, выживаемость которых составила 20% (Р<0,025). Надо отметить, что у животных, получивших заявляемый препарат и забитых через 3 и 24 часа после отравления фосгеном, отмечались наименьшие значения ЛК.

При использовании препарата в дозе 25 мг/кг через 24 часа после начала эксперимента у животных достоверно установлены более низкие значения ЛК (12,71,07) по сравнению со значением ЛК у контрольных животных (20,41,10). Кроме того, применение препарата сопровождалось 100% выживаемостью животных по сравнению с 60% в контрольной группе.

Полученные результаты позволяют заключить, что заявляемое соединение позволяет в значительной степени предотвратить формирование ТОЛ, вызванного фосгеном, и полностью предотвратить смертность отравленных животных.

Заявляемое соединение получают действием щелочного агента на гидробромид 2-амино-4-ацетилтиазоло[5,4-b]индола.

Пример. 5,5 г (0,0176 моль) гидробромида 2-амино-4-ацетилтиазоло[5,4-b] индола суспензируют в 45 мл воды и добавляют 30%-ный водный раствор ацетата натрия до рН 5-6 по универсальному индикатору, перемешивают и фильтруют. Осадок промывают водой (510 мл), сушат в вакууме над фосфорным ангидридом. Получают бледно-сиреневые кристаллы, вес 4 г (98%). Для аналитических целей вещество кристаллизуют из этанола, получают блестящие белые кристаллы. Проба Бейльштейна отрицательна. Температура плавления зависит от температуры внесения в прибор. В случае внесения при 230^oС вещество плавится при 247,5^oС (с разложением).

Вещество однородно по данным ТСХ. Адсорбент – силуфол УФ-254, растворитель для нанесения – диметилформамид, элюент – ацетон : гексан = 1:1; R_f 0,54.

Масс-спектр, m/z (1%): 231 (66, М⁺), 189 (100, М⁺-СОСН₂), 162 (42, М⁺-СОСН₂-HCN), 161 (9, М⁺-COCH₂-HCN-H), 129 (15, М⁺-СОСН₂-HCN-H-S), 102 (13, М⁺-COCH₂-HCN-H-S-HCN).

Спектр ПМР в ДМСО d₆. 200 МГц, м.д.: 2,74 с (3Н, СН₃), 7,20 с (2Н, NH₂), 7,30 т (2Н, Н⁵,Н⁶), 7,62 д (1H, Н⁴), 7,98 д (1H, Н⁷).

Найдено С 57,05, 57,18; Н 4,12, 4,10; N 18,20, 18,39; S 13,58, 13,81. C₁₁H₉N₃ОS. Вычислено: С 57,13, H 3,92, N 18,17, S 13,86.

Формула изобретения

2-Амино-4-ацетилтиазоло[5,4-b] индол формулы

защищающий организм от воздействия гипоксии и токсического отека легкого.

РИСУНКИ

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 19.12.2003

Извещение опубликовано: 20.04.2005 БИ: 11/2005