Патент на изобретение №2188648
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЙОДИРОВАННОГО БЕЛКА
(57) Реферат: Изобретение относится к медицине, фармакологической и пищевой промышленности и может быть использовано в производстве пищевых добавок и для получения лекарственных препаратов, предназначенных для профилактики йодной недостаточности и регулирования йодного обмена. Сущность изобретения состоит в том, что способ йодирования белка включает растворение белка в щелочной среде, обработку полученного раствора йодсодержащим веществом и выделение готового продукта из реакционной смеси, при этом применяют йодсодержащее вещество, растворенное в кислоте, а выделение готового продукта осуществляют осаждением за счет снижения рН реакционной смеси до величины, не превышающей величину изоэлектрической точки готового продукта. Йодсодержащее вещество может быть растворенным как в соляной, так и в уксусной кислоте. Технический результат заключается в повышении производительности процесса йодирования белков и в получении сухого компактного продукта. 2 з.п. ф-лы. Изобретение относится к медицине, фармакологической и пищевой промышленности и может быть использовано в производстве пищевых добавок и для получения лекарственных препаратов, предназначенных для профилактики йодной недостаточности и регулирования йодного обмена. Известен способ получения йодированного белка, заключающийся в том, что белок растворяют 0,02 М фосфатном буфере с рН 7,2 до получения финальной концентрации 2 мг/л. Затем в полученный раствор добавляют эквивалентное количество раствора хлористого йода (ICl) с концентрацией 0,022 М в глициновом буферном растворе, рН 8,5. В результате реакции получается раствор йодированного белка, который очищают с использованием хроматографических методов (М. Е. Koshland, F.M. Englberder, M.J. Erwis and S.M. Gaddone. Modification of Amino Acid Residues in Anti-p-azobenzenearsonic Acid Antibody during Extensive lodination, the Journal of Biological Chemistry, April 1963 – volume 238, number 4). К недостатку известного способа можно отнести то, что конечный продукт имеет низкую концентрацию йодированного белка, а также недостаточную производительность процесса. Перед авторами стояла задача по созданию способа йодирования белков, лишенного указанных недостатков. Для решения поставленной задачи в способе йодирования белка, включающем растворение белка в щелочной среде, обработку полученного раствора йодсодержащим веществом и выделение готового продукта из реакционной смеси, предлагается применить йодсодержащее вещество, растворенное в кислоте, а выделение готового продукта осуществлять осаждением за счет снижения рН реакционной смеси до величины, не превышающей величину изоэлектрической точки готового продукта. Дополнительно предлагается применить йодсодержащее вещество, растворенное в соляной либо уксусной кислоте. Применение йодсодержащего вещества, растворенного в кислоте, и снижение рН реакционной смеси до величины, не превышающей величину изоэлектрической точки готового продукта, позволяет совместить два процесса: процесс йодирования и процесс осаждения йодированного белка. Таким образом достигается технический результат. Способ осуществляют следующим образом. Растворяют белок в буферном растворе с рН около 8, добавляют в этот раствор при перемешивании ICl, растворенный в кислоте. Количество кислоты (объем и концентрация) выбирают так, чтобы конечный рН реакционной смеси не превышал величину изоэлектрической точки готового продукта. В результате реакции происходит присоединение йода к ароматическим кольцам аминокислот – тирозин, фенилаланин, триптофан. В ходе реакции снижается рН и образуется осадок йодированного белка, который отделяют центрифугированием или фильтрованием. Казеин начинает выпадать в осадок при рН ниже 7,2, но максимальная степень йодирования наблюдается в области изоэлектрической точки (рН 4,5) и ниже. Пример 1. Один килограмм казеина растворяли в 10 л карбонатного буферного раствора с рН 8,2. В полученный раствор при интенсивном перемешивании добавляли 1 л 1 N раствора ICl в 4 N соляной кислоте. В ходе реакции наблюдали снижение рН до величины 2,5 (что значительно ниже изоэлектрической точки, которая равна 7,8) и образование суспензии йодказеина в течение 1,5 мин. Йодированный казеин выделяли из реакционной смеси фильтрованием с последующей сушкой до влажности 1,5%. Пример 2. Растворяли 100 мг человеческого сывороточного альбумина в 10 мл фосфатного буфера с рН 7,2. Затем в этот раствор добавляли 370 мкл 1 N раствора ICl в 4 N соляной кислоте. В ходе реакции наблюдали снижение рН до величины 2,2 (изоэлектрическая точка полированного альбумина равна 4,7) и образование осадка йодированного альбумина. Йодированный альбумин выделяли из реакционной смеси центрифугированием с последующей лиофильной сушкой. Пример 3. 95 г альбумина растворили в 4 л фосфатного буфера (0,05 М, pH 7,5), добавили 90 мл раствора хлористого йода (1 М) в 4 N соляной кислоте. При этом pH раствора снижался до величины 4,2 и образовался осадок йодированного альбумина. Йодированный альбумин отделяли от раствора центрифугированием (20 мин при 2500 об/мин). Содержание йода составило 6,4%. Применение способа позволит повысить производительность процесса йодирования белков с получением сухого компактного продукта. Формула изобретения
|
||||||||||||||||||||||||||
