Патент на изобретение №2187816
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СТЕРОИДРЕЗИСТЕНТНОСТИ У БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ
(57) Реферат: Изобретение относится к области медицины, а именно к пульмонологии, и может быть использовано для решения вопроса об эффективности терапии глюкокортикоидными гормонами и подбора адекватной дозы препаратов глюкокортикоидных гормонов у больных бронхиальной астмой (БА). Проводят исследование биологической жидкости в динамике на фоне проведения курса терапии глюкокортикоидными гормонами, при этом в качестве биологической жидкости берут мокроту, определяют в ней содержание интерлейкина 8 (IL-8) и при отсутствии снижения его содержания диагностируют стероидрезистентность. Способ позволяет осуществлять диагностику стероидрезистентности у больных в условиях in vivo с высокой информативностью, оценивать влияние гормональной терапии на воспалительные клетки дыхательных путей пациента. 1 табл. Изобретение относится к медицине, а именно к пульмонологии, к способам диагностики стероидрезистентности, и может быть использовано для решения вопроса об эффективности терапии глюкокортикоидными гормонами и подбора адекватной дозы препаратов глюкокортикоидных гормонов у больных бронхиальной астмой (БА). Использование глюкокортикоидных гормонов в качестве базисной терапии БА в настоящее время является общепризнанным. В клинической практике к гормонозависимым относят те случаи заболевания, которые не удается контролировать противовоспалительной терапией с использованием мембраностабилизаторов (интала, тайледа) в сочетании с обычной бронхолитической терапией, и улучшение состояния больных достигается только с помощью глюкокортикоидных препаратов системного действия. Больные гормонозависимой БА, нуждающиеся в постоянной терапии системными глюкокортикоидами, различаются по чувствительности к этой терапии. Среди них выделяют кортикочувствительных и стероидрезистентных пациентов. К кортикочувствительным относят больных, у которых на фоне приема системных или ингаляционных кортикостероидов ремиссия достигается быстро и поддерживается длительно. Многочисленные осложнения гормональной терапии являются дозозависимыми, именно поэтому вопрос о подборе адекватной дозы препаратов глюкокортикоидных гормонов и диагностике стероидрезистенности является одной из самых актуальных проблем пульмонологии. Известен способ диагностики стероидрезистентности у больных БА, согласно которому стероидрезистентными считают пациентов, у которых после 7-дневного курса лечения преднизолоном в дозе не менее 20 мг в сутки, объем форсированного выдоха за первую секунду (0ФB1 Известен способ диагностики стероидрезистентности у больных БА, основанный на оценке связывающей способности глюкокортикоид-рецепторных комплексов с соответствующими сайтами на ДНК методом изменения электрофоретической подвижности образцов (Adcock IM, Lane SJ, Brown CR, Peters MJ, Lee TH, Barnes, PJ. Differences in binding of glucocorticoid receptor to DNA in steroid-resistant asthma. J Immunol. – 1995. – Vol. 154. – P. 3500-3505). Известен способ диагностики стероидрезистентности у больных БА, основанный на количественном определении соотношения глюкокортикоидных рецепторов ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() Результаты исследования представлены в таблице. Способ осуществляют следующим образом. На первой стадии калибровочные пробы с известной концентрацией IL-8, a также исследуемые образцы инкубируют в лунках стрипованного планшета с иммобилизованными на поверхности лунок высокоспецифичными антителами к IL-8. На второй стадии связавшийся в лунках с антителами IL-8 обрабатывают антителами к IL-8, меченными биотином. На третьей стадии в лунки вносят конъюгат авидин-пероксидазы. После удаления избытка конъюгата в лунки вносят субстратную смесь, содержащую перекись водорода и о-фенилендиамин, для выявления комплекса “Антиген- IL-8-Конъюгат”. При этом о-фенилендиамин окисляется с образованием красителя, интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации IL-8 в анализируемом образце. Ферментативную реакцию останавливают добавлением стоп-реагента, а интенсивность окраски измеряют на фотометре для иммуноферментного анализа при длине волны 492 нм. При отсутствии снижения содержания IL-8 диагностируют стероидрезистентность у обследуемого больного. Способ иллюстрируется следующими клиническими примерами. Пример 1. Больная П., 53 года. Болеет бронхиальной астмой в течение 7 лет. Течение бронхиальной астмы тяжелое. Доза пероральных глюкокортикоидов в пересчете на преднизолон составляет 25 мг в сутки. Уровень IL-8 в мокроте при поступлении составил 1731, 726 пг/мл, в динамике, на фоне проводимой терапии, – 4313, 574 пг/мл. Исследование IL-8 в мокроте показало, что уровень IL-8 многократно превышал норму исходно, на фоне терапии снижения уровня IL-8 в мокроте не наблюдали, наоборот, содержание IL-8 в мокроте повысилось в 2,5 раза. Пациентка была расценена как больная стероидрезистентной БА. Диагноз был подтвержден следующими исследованиями. Показатели функции внешнего дыхания: OФB1 при поступлении 46,2% должной величины. OФB1 динамике равнялось 42,9% должной величины. Таким образом, терапия пероральными глюкокортикоидами в дозе 25 мг в сутки в пересчете на преднизолон не привела к повышению OФB1 на 15% от исходной величины и показатели функции внешнего дыхания оставались существенно ниже 60% должной. Показатели гормонального гомеостаза: уровень 11OКС в плазме крови составил 201 нмоль/л при поступлении и 295 нмоль/л в динамике (норма 350 – 372 нмоль/л). Уровень 110КС в плазме крови несмотря на терапию пероральными глюкокортикоидами вырос в 1,5 раза, однако оставался ниже нормы. Пример 2. Больная О., 52 года. Болеет бронхиальной астмой 8 лет. Течение бронхиальной астмы тяжелое. Доза пероральных глюкокортикоидов в пересчете на преднизолон составляет 10 мг в сутки. Уровень IL-8 в мокроте при поступлении составил 1010, 273 пг/мл, на фоне проводимой терапии 67,223 пг/мл. Исследование IL-8 в мокроте показало, что исходный уровень IL-8 многократно превышал норму, на фоне терапии наблюдалось достоверное снижение (в 15 раз) содержания IL-8 в мокроте, который почти приблизился к верхней границе нормы. Пациентка была расценена как больная кортикочувствительной БА. Диагноз был подтвержден следующими исследованиями. Показатели функции внешнего дыхания составили: OФB1 при поступлении 59,8% должной величины. В динамике ОФB1 69,4% должной величины. Из приведенных данных видно, что терапия пероральными глюкокортикоидами в дозе 10 мг в сутки в пересчете на преднизолон привела к стабилизации состояния и улучшению показателей функции внешнего дыхания: ОФB1 возросло на 16,1% от исходной величины. Показатели гормонального гомеостаза: уровень 11ОКС в плазме крови составил 254 нмоль/л при поступлении и 361 нмоль/л в динамике. Уровень 11ОКС в плазме крови вырос в 1,4 раза и достиг нормальной величины. Использование предложенного способа позволяет осуществлять диагностику стероидрезистентности у больных БА в условиях in vivo, оценивать влияние гормональной терапии на воспалительные клетки дыхательных путей пациента.Формула изобретения
РИСУНКИ
MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 02.06.2003
Извещение опубликовано: 7.04.2005 БИ: 12/2005
|
||||||||||||||||||||||||||