Патент на изобретение №2187815
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЭНТЕРОБИОЗА
(57) Реферат: Изобретение относится к медицине, в частности к медицинской паразитологии. Способ обеспечивает повышение специфичности диагностики энтеробиоза и достоверного контроля за эффективностью лечения. На произведенный с помощью скотч-пленки соскоб с перианальных складок наносят сначала специфические антитела сыворотки морской свинки, затем флуоресцирующий антивидовой конъюгат, после чего препарат просматривают в люминесцентном микроскопе и при наличии флюоресценции зеленого цвета яиц остриц определяют энтеробиоз. Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской паразитологии, и может быть использовано при выявлении яиц остриц (Enterobius vermicularis) у взрослых и детей. Недостатки метода: при исследовании соскобов и смывов при световой микроскопии возможны диагностические ошибки, обусловленные, с одной стороны, нахождением различных включений и образований, напоминающих яйца остриц, но не принадлежащие гельминтофауне (споры съедобных грибов, растительные элементы, яйца мучного и сырного клещей); с другой стороны, изменение формы яиц других гельминтов, напоминающие яйца остриц (недоразвитие яиц, наличие яиц псевдопаразитов); в-третьих – отсутствие ассиметрии (дифференциального признака яйца острицы) при расположении яиц остриц на уплощенной стороне. Перечисленные выше включения, образования и элементы пищи неопытным лаборантом не будут учтены и могут привести к постановке ошибочного диагноза. Изобретение направлено на решение задач: – повышение специфичности диагностики энтеробиоза; – достоверного контроля за эффективностью лечения этого гельминтоза. Выполнение поставленных задач достигается за счет нМФА – непрямого метода флюоресцентного анализа: с помощью применения специфической иммунной сыворотки, полученной путем иммунизации морских свинок яйцами остриц. Прореагировавшие с яйцами остриц специфические антитела морской свинки выявляют путем окраски флуоресцирующими иммуноглобулинами против иммуноглобулинов морской свинки. На предметном стекле образуется комплекс, состоящий из яиц остриц + немеченых антител морской свинки к яйцам остриц + флуоресцирующих антител к иммуноглобулинам морской свинки. Полученный препарат просматривают в люминесцентном микроскопе. При наличии в препаратах флуоресцирующих яиц остриц диагностируют энтеробиоз. Способ осуществляют следующим образом: на фиксированную на предметном стекле скотч-пленку с отпечатками кожи с перианальных складок наносят 20 микролитров сыворотки морской свинки к яйцам остриц в разведении 1:40. Стекла с мазками помещают во влажную камеру, которую выдерживают в течение 20 мин при температуре 37oС. Затем отпечатки промывают в забуференном физиологическом растворе рН 7,4 (ЗФР) дважды по 7 мин и удаляют капли раствора с помощью фильтровальной бумаги. После этого на отпечаток наносят 20 микролитров флуоресцирующих иммуноглобулинов против иммуноглобулинов морской свинки, взятых в рабочем разведении 1: 16. Предметные стекла с отпечатками помещают во влажную камеру и инкубируют в течение 20 мин при температуре 37oС. Затем предметные стекла с мазками вновь дважды по 7 мин промывают в ЗФР и удаляют капли фильтровальной бумагой. Высушенные препараты просматривают под иммерсионным объективом. При наличии яркой флуоресценции зеленого цвета двухслойной оболочки яиц со следующими характерными морфологическими признаками: яйцо продолговатой несколько ассиметричной формы (с уплощенной одной стороной), с гладкой поверхностью и размерами в диапазоне 0,052-00,06 ![]() 1. Положительный контроль – яйца остриц + немеченая сыворотка к яйцам остриц + флуоресцирующий антивидовой конъюгат. Наблюдается специфическая флуоресценция яиц остриц. 2. Отрицательный контроль – отпечаток с кожи плеча больного + немеченая сыворотка к яйцам остриц + флуоресцирующий антивидовой конъюгат. Специфическая флуоресценция отсутствует. 3. Контроль флуоресцирующего конъюгата – яйца остриц + ЗФР + флуоресцирующий антивидовой конъюгат. Специфическая флуоресценция отсутствует. Продолжительность постановки реакции 1ч 20 мин. Пример 1.: Больная Н., 9 лет. Находилась на лечении в детском гельминтологическом центре (ДГКИБ 3 г.Пермь) в ноябре 2000 г. Диагноз: Лямблиоз, сопутствующий диагноз: энтеробиоз. Жалобы: на боли в животе в околопупочной области, тошнота, избирательный аппетит. Анамнез жизни: от второй беременности и вторых срочных родов. Грудное вскармливание до конца 1 года. Перенесенные заболевания: Ветряная оспа, Краснуха, ОРВИ до 4 раз в год. Объективные данные: Телосложение нормальное. Кожные покровы бледные, чистые. Тени под глазами. Слизистые бледно-розовые. Дыхание везикулярное. Тоны сердца ритмичные, звучные. Живот мягкий, умеренная болезненность в околопупочной области. Печень + 0,5 см ниже края реберной дуги. Диурез сохранен. Стул нормальный. Общий анализ крови: Эритроциты – 4,4 ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() Формула изобретения
PD4A – Изменение наименования обладателя патента Российской Федерации на изобретение
(73) Новое наименование патентообладателя:
Извещение опубликовано: 27.08.2004 БИ: 24/2004
PD4A – Изменение наименования обладателя патента Российской Федерации на изобретение
(73) Новое наименование патентообладателя:
(73) Новое наименование патентообладателя:
Извещение опубликовано: 27.10.2004 БИ: 30/2004
TK4A – Поправки к публикациям сведений об изобретениях в бюллетенях “Изобретения (заявки и патенты)” и “Изобретения. Полезные модели”
Страница: 475
Напечатано: Адрес для переписки: 614600, г. Пермь, ул. Куйбышева, 39, ПГМА, Медицинская академия, патентный отдел
Следует читать: Адрес для переписки: 119021, Москва, Зубовский б-р, 4, ФГУП “НПО “Микроген”, патентно-лицензионный отдел
Номер и год публикации бюллетеня: 23-2002
Код раздела: FG4A
Извещение опубликовано: 7.04.2005 БИ: 12/2005
|
||||||||||||||||||||||||||