Патент на изобретение №2184972
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ ОЦЕНКИ ТЕЧЕНИЯ РАНЕВОГО ПРОЦЕССА
(57) Реферат: Изобретение относится к области медицины, а именно к хирургии и клинической иммунологии, и может быть использовано в практике лечения хирургических больных. Способ обеспечивает повышение точности и оптимизацию оценки течения раневого процесса у больных. Проводят исследование клеточного звена иммунитета больного, при этом осуществляют забор раневого содержимого после операции и определяют в нем содержание иммуноглобулинов А, М, G и фенотипические показатели лимфоцитов: Т лимфоцитов (CD-3+), Т-хелперов (CD-4+), Т-супрессоров (CD-8+), CD22, CD56, CD+HLA-DR+ и иммунорегуляторный индекс (хелперы/супрессоры) (ИИ) и при показателях содержания иммуноглобулинов: А – 2,3 + – 0,06 г/л; М – 4 + – 0,08 г/л; G – 18 + – 0,2 г/л и фенотипических параметров лимфоцитов: CD3 – 72 + – 6,5%, CD4 – 48 + -5,4%; CD8 – 24 + – 5,7%; CD22 -2 + -0,6%; CD56 – 4 + -0,4%; CD+HLA-DR + -14 + -1/2%; ИИ – 2,5% + -0,3 оценивают течение раневого процесса как неосложненное, а при отличии от данных величин оценивают как осложненное течение. Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии и клинической иммунологии, и может быть использовано в практике лечения хирургических больных. Известны способы контроля за течением раневого процесса с использованием биомикроскопии клеточного состава раневого отделяемого, показателей иммунитета сыворотки крови (Раны и раневая инфекция. Под ред. академика АМН СССР проф. М.И.Кузина, проф. Б.М.Костюченок, – М.: Медицина, 1981. с.688). Каждый из этих методов отражает либо местные, либо общие процессы, происходящие в организме больного, но не показывают специфику местной реакции на травму. Для оценки течения раневого процесса предложено иммунологическое исследование раневого отделяемого с определением показателей клеточного и гуморального иммунитета. Недостатками прототипа являются: наряду с реакцией на раневой процесс получает отражение реакция на сопутствующую патологию, инфекционное воспаление, аллергические и неопластические процессы; отсроченное отражение происходящих процессов в ране; неполное отражение динамики раневого процесса в интервале времени; проведение иммунологического исследования периферической крови сопряжено с необходимостью внутривенного забора крови. Сущность заявляемого способа заключается в оптимизации оценки течения раневого процесса у больных путем исследования раневого содержимого с помощью иммунологических методов. Способ осуществляют следующим образом: исследование клеточного звена иммунитета осуществляют с использованием проточно-лазерного цитометра FACStrak фирмы BECTON-DICKINSON с применением набора моноклональных антител Simultest данной фирмы. Анализ гуморального звена проводят по уровню иммуноглобулинов A, M, G, которые определялись методом Манчини с моноклональными антителами отечественных фирм. Объектом исследований является раневое содержимое. Проводят забор раневого содержимого для оценки клеточного звена иммунной системы в пробирку с антикоагулянтом в разведении 1:10, для оценки параметров гуморального звена – в пробирки для центрифугирования в количестве 8-10 мл с последующим получением сыворотки. Для дальнейшего исследования фенотипических характеристик лимфоцитов раневое содержимое по 100 мкл инкубируют с 10 мкл моноклональных антител в темноте в течение 15 мин с последующим добавлением лизирующего раствора по 1 мл в разведении 1:10 и инкубацией 10 мин в темноте с последующей двойной отмывкой буфером лимфоцитов в режиме центрифугирования 1000 об/мин 5 мин. С целью увеличения концентрации клеточных элементов в раневом содержимом перед проведением исследования последний подвергают центрифугированию в режиме 1000 об/мин в течение 15 мин. После осуществления подготовительной работы проводят цитофлуорометрическое исследование в программе Simulset с определением следующих параметров: абсолютного и относительного количества Т-лимфоцитов (CD-3+), В-лимфоцитов (CD19+), Т-супрессоров (CD-8+), Т-хелперов (CD-4+), Т-активных лимфоцитов (HLA-DR+). NK-клеток (CD16/56+), иммунорегуляторного индекса (хелперы/супрсссоры). С целью определения динамики изучаемых параметров исследования проводят непосредственно после операции и далее с недельным интервалом. Показатели раневого содержимого при неосложненном течении раневого процесса: Иммуноглобулины: G-18+0,2 г/л, М-4+0,08 г/л, А-2,3+0,06 г/л; Фенотипические параметры лимфоцитов: CD3 – 72+6,5%, CD4 -48+5,4%, CD8 – 24+5,7%, CD22 – 2+0,6%, CD56 – 4+0,4%, CD+HLA-DR+ – 14+1,2%, ИИ – 2,5+0,3. Клинические примеры. Пример 1. Больная М. , 59 лет (и.б. N 6447), пенсионерка, госпитализирована в хирургическое отделение ОКБ им. М.И.Калинина с диагнозом: невправимая огромная срединная послеоперационная вентральная грыжа; ИБС. Атеросклеротический кардиосклероз. Н 0-1; ожирение II-III степени, экзокринно-конституционального типа. Из анамнеза известно, что больной выполнялось кесарево сечение, впоследствии образовалась грыжа. 30.10.97. Операция N 582. Грыжесечение. пластика передней брюшной стенки комбинированным способом. Больной в предоперационном периоде забиралась кровь, а в послеоперационном периоде кровь и раневое отделяемое на иммунологическое исследование. Исследование раневого содержимого после операции. Иммуноглобулины: Ig G – 20,0 г/л; Ig А – 1,9 г/л; Ig M – 4,0 г/л. Параметры фенотипического типирования клеток иммунной системы: CD3 – 74%, CD4 – 57%, CD8 – 22%, CD22 – 1%, CD3+HLA-DR+ -17%, CD56 – 4%, ИИ – 2,6. Пример 2. Больная К., 60 лет (и.б. N6460), пенсионерка, госпитализирована в хирургическое отделение ОКБ им. М.И.Калинина с диагнозом: невправимая гигантская срединная многокамерная рецидивная послеоперационная вентральная грыжа; желчно-каменная болезнь, хронический калькулезный холецистит; опухоль правого яичника; спаечная болезнь брюшной полости; сахарный диабет II тип, впервые выявленный; ожирение III степени, экзокринно-конституционального типа. Из анамнеза установлено, что больной в 1984 г. выполнена гинекологическая операция (удаление кисты левого яичника), релапаротомия (абсцесс брюшной полости), выведение энтеро- и колостом. В 1985г. – закрытие кишечных свищей, в послеоперационном периоде произошла эвентерация. В 1986 г. грыжесечение, рецидив. В дальнейшем больная оперирована по поводу грыж 6 раз, последний раз в 1995 г. способом Янова деэпителизированным лоскутом методом шнуровки, в 1996 г. рецидив заболевания. 05.11.97. Операция N600. Грыжесечение, холецистэктомия, холангиография, дренирование холедоха по Пиковскому, удаление опухоли правого яичника, пластика передней брюшной стенки комбинированным способом с использованием полипропиленовой сетки. 23.11.97. Операция N633. Вскрытие и дренирование поддиафрагмального абсцесса. 02.12.97. Операция N657. Вскрытие и дренирование подпеченочного абсцесса. Больной в предоперационном периоде забиралась кровь, а в послеоперационном периоде кровь и раневое отделяемое на иммунологическое обследование. Исследование раневого содержимого после операции (от 05.11.97.). Иммуноглобулины: Ig G – 12 г/л, Ig М – 2,6 г/л, Ig A – 1,4 г/л. Фенотипические параметры лимфоцитов: CD3 – 58%, CD4 – 28%, CD8 – 18%, CD22 – 2%, CD56 – 3%, CD3+HLA-DR+ – 12%, ИИ – 1,6. Обращали на себя внимание признаки неадекватности иммунного ответа: низкие показатели содержания иммуноглобулина М, количества CD 4 + – клеток, ИИ. Существенными достоинствами предложенного способа оценки течения раневого процесса являются: доступность объекта исследования; оперативность мониторинга раневого процесса; способ позволяет выявить особенности местного иммунного ответа тканей на травму; способ позволяет в сочетании с клиническими данными прогнозировать течение раневого процесса. Формула изобретения
MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 08.06.2000
Номер и год публикации бюллетеня: 32-2003
Извещение опубликовано: 20.11.2003
|
||||||||||||||||||||||||||
