Патент на изобретение №2182172
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) ШТАММ БАКТЕРИЙ BACILLUS SUBTILIS, ОБЛАДАЮЩИЙ ШИРОКИМ СПЕКТРОМ АНТАГОНИСТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ
(57) Реферат: Изобретение относится к микробиологии и биотехнологии и представляет собой штамм бактерий Bacillus subtilis, являющийся антагонистом по отношению к штаммам болезнетворных микроорганизмов, вызывающих заболевания у растений, людей и сельскохозяйственных животных. Штамм выделен из здорового растения пшеницы в Уфимском районе и депонирован под номером ВКМ В-2218Д во Всероссийской коллекции микроорганизмов ИБФМ РАН. 6 табл. Изобретение относится к микробиологии и биотехнологии и представляет собой новый штамм из бактерий рода Bacillus, являющийся антагонистом по отношению к штаммам болезнетворных микроорганизмов, вызывающих заболевания у людей, сельскохозяйственных животных и растений. В настоящее время препараты-пробиотики из бактерий рода Bacillus, подавляющие развитие патогенных микроорганизмов, находят широкое применение в сельском хозяйстве для подавления фитопатогенных бактерий и грибов (бациспецин-БМ, фитоспорин) (1, 2), в медицине (биоспорин, бактиспорин, споробактерин) (3-5), ветеринарии для лечения различных заболеваний птиц и сельскохозяйственных животных (БЦЛ бактоцеллолактин, субалин, споролакт) (6-8). В основе вышеперечисленных препаратов – пробиотиков предложены разные штаммы бактерий рода Bacillus, обладающие антагонизмом в отношении патогенных бактерий и грибов, вызывающих заболевания либо растений, либо животных и людей. Однако нет штаммов, обладающих спектром антагонистической активности, достаточным для одновременной защиты от патогенных микроорганизмов, вызывающих заболевания у растений, людей и животных. Задачей изобретения является селекция штамма из бактерий рода Bacillus, обладающего антагонистической активностью против патогенных штаммов бактерий и грибов, вызывающих заболевания растений, человека и сельскохозяйственных животных и который можно использовать для защиты от комплекса болезней, вызываемых грибами и бактериями. Наиболее близким к изобретению является штамм В. subtilis 10 ВИЗР (9), обладающий широким спектром антагонистической активности к фитопатогенным грибам, на основе которого получен биопрепарат алирин Б. Однако штамм не подавляет роста патогенных бактерий и неизвестна его антагонистическая активность в отношении штаммов грибов, вызывающих заболевания человека и животных. Целью изобретения является новый штамм бактерий рода Bacillus, обладающий антагонистической активностью в отношении патогенных грибов и бактерий, вызывающих заболевания растений, человека и сельскохозяйственных животных. Штамм Bacillus subtilis 11 В выделен из здорового растения пшеницы в Уфимском районе. Идентификацию штамма проводили по “Определителю бактерий Берджи” М. Мир, 1997. Штамм депонирован под номером ВКМ В-2218Д во Всероссийской коллекции микроорганизмов ИБФМ РАН 19.08.1999 г. Культура штамма характеризуется следующими свойствами: В. subtilis ВКМ В-2218 Д – грамположительные аэробные спорообразующие палочки, продуцирующие каталазу. На мясо-пептонном агаре (МПА), сусло-агаре дают обильный рост. На МПА образует серовато-белые мелкоморщинистые колонии с волнистыми краями, слегка врастающими в агар, вязкой консистенции. Рост в жидкой среде сопровождается помутнением среды, образованием пленки и осадка. Через 18 часов роста в мазках культуры обнаруживаются прямые палочковидные клетки, размером 2-3х0,6 мкм, расположенные одиночно, попарно или цепочкой. Клетки подвижны. При спорообразовании клетка не раздувается. Споры овальные, размер 0,9х0,6 мкм, расположены в клетке эксцентрично. Культура ферментирует глюкозу, в-галактозу, лактозу, сахарозу и мальтозу. Не разлагает маннит, инозит, сорбит и арабинозу. Дает положительную реакцию Фогес-Проскауэра, гидролизует крахмал, желатину, не гидролизует мочевину, утилизирует цитрат натрия с глюкозой, пропионат и малонат натрия не использует, слабо растет в анаэробных условиях. Характеризуется наличием аргининдегидролазы, лизиндекарбоксилазы, отсутствием фенилаланилдезамилазы, орнитиндекарбоксилазы. Образует ацетилметилкарбинол. Редуцирует нитраты, не образует газ на среде с нитратами в анаэробных условиях. Не образует индол и сероводород. Культура штамма была проверена на безвредность (вирулентность, токсичность и токсигенность). Для исследования вирулентности штамм выращивали на мясо-пептонном агаре в течение 24 часов при температуре 37oС. Выросшую биомассу смывали 0,9%-ным раствором натрия хлорида и готовили бактериальные суспензии с концентрацией клеток от 0,5 до 5,0 млрд/ в мл. Полученные суспензии вводили белым беспородным мышам массой (16 ![]() ![]() 1. Вялых Л.К., Мелентьев Л.И. Индукция устойчивости к ржавчине у ячменя и пшеницы, вызываемая препаратом Бациспецин БМ / Микробиол. охрана биосферы в регионах Урала и Сев. Прикаспия: Тез. докл. Всес. симп. -Оренбург, 1991. -С. 23-24. 2. Менликеев М.Я., Смирнов В.В., Байгузина Ф.А. и др. Биопрепарат Фитоспорин для защиты растений от болезней / Патент N 2099947, RU, C 12 N/20, опубл. 25.12.97, бюл. N 12. 6. Ивановский А. А., Вепрева Н.С., Зимирева В.В., Лагунова О.П. Способ получения пробиотика для ветеринарии / RU Патент N 2084233, опубл. 20.07.97. – Бюл. N 20. 7. Смирнов В.В., Резник С.Р., Сорокулова И.Б. и др. Профилактический биопрепарат субалин / RU Патент N2035185, опубл. 31.01.92. – Бюл. N 14. Формула изобретения
РИСУНКИ
MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 06.04.2004
Извещение опубликовано: 10.03.2005 БИ: 07/2005
|
||||||||||||||||||||||||||