Патент на изобретение №2178301
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГЕНТИАКАУЛЕИНА, ОБЛАДАЮЩЕГО ХОЛАТОСТИМУЛИРУЮЩИМ ДЕЙСТВИЕМ
(57) Реферат: Изобретение относится к области медицины. Сырье – горечавник бородатый экстрагируют этиловым спиртом, содержащим 1-2% HCl при кипячении. Экстракт упаривают и сумму ксантоновых агликонов извлекают хлороформом. Хлороформное извлечение хроматографируют на колонке силикагеля, упаривают. Выпавший технический гентиакаулеин очищают перекристаллизацией из метилового спирта. Изобретение позволяет повысить выход продукта. 3 табл. Изобретение относится к области медицины и касается способа получения биологически активного соединения из растительного сырья, обладающего холатостимулирующим действием. Задачей предлагаемого способа является повышение выхода целевого продукта из надземной части горечавника бородатого с холатостимулирующей активностью и расширение сырьевой базы. Указанная задача достигается следующим способом: растительное сырье экстрагируют 95% спиртом, содержащим от 1 до 2% соляной кислоты при кипячении, упаривания объединенных экстрактов и извлечения ксантоновых агликонов хлороформом. Хлороформное извлечение после упаривания и хроматографирования на колонке силикагеля с элюцией хлороформом позволяет получить готовый продукт с увеличением выхода до 1,5%. Этот способ приводит к увеличению выхода готового продукта в 2 раза, имеющего характеристики, представленные в табл. 1. Нижеследующие примеры иллюстрируют заявляемый способ. Пример 1. 100 г измельченной водушно-сухой части травы горечавника бородатого заливают по 300 мл 70% C2Н5ОН + 25 мл HCl (1%) трижды при нагревании по 2 часа. Объединенные извлечения фильтруют и упаривают до 400 мл, добавляют 100 мл воды и извлекают в делительной воронке хлороформом по 1 л трижды (три раза). Объединенные хлороформные извлечения упаривают досуха. Выход суммы ксантоновых агликонов – 18,7 г. Хлороформное извлечение наносят на колонку силикагеля L 40/100  и элюируют хлороформом. При 1300 мл хлороформа выделяется вещество гентиакаулеин, конец элюции 1600 мл. Фракции собирают, упаривают досуха, добавляют 20 мл 95% спирта. Осадок технического гентиакаулеина отфильтровывают и перекристаллизовывают (растворяют в 300 мл, упаривают до 100 мл и оставляют для кристаллизации на 10 часов при температуре 2-4oC в холодильнике). Осадок отфильтровывают, сушат в сушильном шкафу при 100-105oC в течение 3-х часов. Получают 1,50 г гентиакаулеина, что составляет 1,5% от массы исходного сырья.
Использование предлагаемого способа в сравнении с известным обеспечивает повышение выхода целевого продукта с 0,5% до 1,5%.
Пример 2 100 г измельченной воздушно-сухой травы горечавника бородатого заливают по 350 мл 95% C2H5OH+30 мл HCl (2%) трижды при нагревании по 2 часа. Объединенные извлечения фильтруют и упаривают до 400 мл, добавляют 100 мл воды и извлекают хлороформом по 1 л (три раза). Объединенные хлороформные извлечения упаривают досуха. Выход суммы агликонов – 17,6 г. Хлороформные извлечения наносят на колонку силикагеля L 40/100 и элюируют хлороформом. При 1300 мл хлороформа выделяется вещество гентиакаулеин, конец элюции 1600 мл. Фракции собирают, упаривают досуха, добавляют 20 мл спирта. Осадок технического гентиакаулеина отфильтровывают и перекристаллизовывают из спирта (растворяют в 300 мл, упаривают до 100 мл и оставляют для кристаллизации на 10 часов при температуре 2-4oC в холодильнике). Осадок отфильтровывают, сушат в сушильном шкафу при 100-105oC в течение 3-х часов. Получают 1,20 г исходного продукта, что составляет 1,2% от массы воздушно-сухого сырья.
ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ ВЫДЕЛЕННОГО ГЕНТИАКАУЛЕИНА.
50 гентиакаулеина проведено по методике, описанной Ивановым Ю. И. , Погорелюк О. Н. [Иванов Ю. И. , Погорелюк О. Н. Статистическая обработка результатов медико-биологических исследований на микрокалькуляторах по программам. – М. : Медицина, 1990. – 224 с. ] .
Установлено, что введение гентиакаулеина в дозе 10 мг/кг не оказывало существенного влияния на холеретическую реакцию у крыс (табл. 2). Отмечено лишь повышение концентрации в желчи животных билирубина на 74% и проявилась тенденция к увеличению экскреции холестерина и стимуляции синтеза желчных кислот. На этом фоне, в спектре отдельных желчных кислот возрастали доли конъюгированных, так и не неконъюгированных холатов (табл. 3). Гентиакаулеин в дозе 50 мг/кг массы оказывал умеренное желчегонное действие при введении его интактным белым крысам (табл. 2). Так, скорость секреции желчи через час после его введения возрастала на 15% по сравнению с контролем. Затем холеретическая реакция у крыс имела тенденцию к повышению и только через 4 часа после введения гентиакаулеина возрастала на 11% по сравнению с контролем. При этом возрастало общее количество выделенной желчи, а также ускорялась экскреция билирубина. Гентиакаулеин в указанной дозе стимулировал синтез и выделение общих желчных кислот, концентрация которых в желчи повысилась почти в 1,5 раза по сравнению с контролем. При анализе спектра отдельных желчных кислот, гентиакаулеин наиболее существенно влиял на синтез конъюгированных желчных кислот (табл. 3). При увеличении дозы исследуемого ксантона до 100 мг/кг не было отмечено изменений холеретической реакции у крыс. Гентиакаулеин способствовал ускорению выделения билирубина на 40% и экскреции холестерина (табл. 2). Одновременно установлена умеренная стимуляция синтеза и секреции общих желчных кислот за счет повышения в спектре отдельных желчных кислот только конъюгированных холатов (табл. 3). На основании полученных данных, гентиакаулеин оказывает холатостимулирующее действие.
Установлено, что ЕД50 гентиакаулеина соответствует 31,5  5,9 мг/кг массы.
Формула изобретения
РИСУНКИ
MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 07.06.2006
Извещение опубликовано: 10.05.2007 БИ: 13/2007
|
||||||||||||||||||||||||||
