Патент на изобретение №2178178
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ БЕЛКА В МОЧЕ
(57) Реферат: Изобретение относится к области медицины, в частности к клинической лабораторной диагностике. Способ позволяет упростить и сократить время определения белка в моче. Проводят исследование мочи, при этом измеряют ее электросопротивление до и после ее фильтрации через фильтр с порами в 2-3 нм, после чего по разнице электросопротивлений определяют концентрацию белка в моче. 3 табл. Изобретение относится к способам экспресс-диагностики, и может быть использовано в лабораторных условиях и в операционной при экстренном измерении концентрации белка в моче (например, при операции пересадки почки). Из известных способов определения концентрации белка в моче наиболее точным является фотометрический. Он основан на биуретовой реакции. Для его реализации необходим ряд реактивов: 1 – изотонический раствор NaCl, 2 – 0,2 моль/л раствор NaOH, 3 – 0,5% раствор KJ, 4 – К, Na виннокислый, 4-х водный (сегнетова соль) 5 – CuSO4  5H2O,6 – калибровочный раствор альбумина (100 г/л в физрастворе). Ход определения концентрации белка в моче. Из реактивов 2, 3, 4, 5 приготавливают биуретовый реактив. 0,1 мл исследуемой мочи смешивают с 5 мл рабочего биуретового раствора. Через 30 мин производят измерение на фотометре при длине волны 500-550 нм против холостой пробы. Расчет количества белка ведется по калибровочному графику. Недостатками этого способа являются необходимость в расходуемых реактивах, большая трудоемкость и длительность (не менее 40 мин) исследования. Кроме того, ручной фотометрический метод исключает возможность мониторинга измерений и автоматического вывода информации на компьютер или принтер [1] . Задачей предложенного способа измерения концентрации белка в моче является упрощение и сокращение времени определения белка. Поставленная задача в способе определения концентрации белка в моче, включающем исследование мочи, достигается измерением электросопротивления мочи до и после ее фильтрации через фильтр с порами в 2-3 нм, после чего по разнице величин электросопротивлений определяют концентрацию белка в моче. Предлагаемый способ в медицинской и патентной литературе на обнаружен, что позволяет сделать вывод о соответствии его критерию “новизна”. Сущность предлагаемого изобретения состоит в том, что электросопротивление мочи измеряют до и после ее фильтрации через фильтр с порами в 2-3 нм, после чего по разнице величин электросопротивлений определяют концентрацию белка в моче. Измерение электросопротивления мочи до и после ее фильтрации позволяет определить электросопротивление мочи, содержащей белок и очищенной от него, а разница величин электросопротивлений линейно соответствует концентрации белка в моче. Это доказано нами в ходе экспериментальных работ. Концентрация белка в моче прямо пропорционально связана с электросопротивлением мочи (табл. 1), а абсолютная разница величин электросопротивлений соответствует концентрации белка в моче (табл. 2). Использование фильтра с порами в 2-3 нм (2 l0-9м) позволяет достичь полной очистки мочи от белка. Размеры молекулы белка, например альбумина, составляют 4-6 нм. Уменьшение размеров пор фильтра увеличивает время фильтрации и может привести к отфильтровыванию других веществ, что повлияет на изменение суммарного электросопротивления.
Способ осуществляется следующим образом: исследуемую мочу вводят шприцом в датчик измерения электросопротивления и определяют общее электросопротивление мочи, после чего мочу пропускают через фильтр с порами в 2-3 нм и повторно определяют ее электросопротивление. Затем по разнице величин электросопротивлений определяют концентрацию белка в моче (табл. 2).
Сравнительное определение концентрации белка в моче фотометрическим и предлагаемым способом:180 мл мочи здорового человека разделены на 9 порций по 20 мл. В 8 порций добавлен альбумин и в них получена концентрация белка от 10 до 80 г/л. Измерение концентрации белка в каждой порции проводились трижды фотометрическим и предлагаемым способом. Полученные результаты отражены в табл. 3. Анализ полученных данных показывет, что точность предлагаемого способа определения белка в моче примерно на 1% выше фотометрического, а затрачиваемое на измерение время в 9-10 раз меньше. Измерение электросопротивлений и пересчет разницы в концентрацию белка легко автоматизируются, что позволяет создать автоматический анализатор белка. Предлагаемый способ позволяет значительно сократить время определения концентрации белка в моче (до 5 мин), отказаться от использования химических реактивов, и упростить процесс измерения (табл. 3). Предлагаемый способ определения концентрации белка в моче прошел испытания в отделении пересадки почки РНЦХ РАМН и найдет широкое применение в лабораторной и клинической практике. Источники информации 1. Справочник. Лабораторные методы исследования в клинике. Под редакцией проф. В. В. Меньшикова. М. , 1987, с. 174, 175. Формула изобретения
РИСУНКИ
MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 22.06.2006
Извещение опубликовано: 10.05.2007 БИ: 13/2007
|
||||||||||||||||||||||||||
