Патент на изобретение №2171679

(54) ЛЕКАРСТВЕННЫЙ СБОР, ОБЛАДАЮЩИЙ ГИПОЛИПИДЕМИЧЕСКИМ И АДАПТОГЕННЫМ СВОЙСТВАМИ

(57) Реферат:

Изобретение относится к области медицины и касается создания сбора для лечения и профилактики гиперлипидемии. Сбор включает аир болотный, ромашку аптечную, шиповник, одуванчик лекарственный, боярышник кроваво-красный, бадан толстолистный, горец птичий при определенном соотношении. При приеме данного сбора снижается уровень атерогенных липидов, уменьшается артериальное давление на 20 – 25%, кроме того, отмечалось уменьшение головных болей, головокружения. 9 табл.

Изобретение относится к области фармации и касается создания сбора из растительного сырья, обладающего гиполипидемическим и адаптогенным свойствами.

Известно средство полиспонин, представляющее собой экстракт из корневищ и корней диоскореи ниппонской [Регистр лекарственных средств России (РЛС). /Под ред. Крылова Ю.Ф. – М.: Инфармхим. -1993. -989 с.], которое используется в качестве гипохолестеринемического средства. Для уменьшения всасывания холестерина и ограничения его проникновения в эндотелий сосудов назначают сбор: цветки боярышника (15 ч.); трава хвоща полевого (15 ч.); трава омелы белой (15 ч.); листья барвинка малого (15 ч.); трава тысячелистника (30 ч.). Стакан настоя принимают глотками в течение дня. Используют при атеросклерозе также настойку чеснока, спиртовую вытяжку из репчатого лука – аллилчеп. Однако достоверных данных, подтверждающих эффективность этих препаратов, не имеется [Соколов С.Я., Замотаев И.П. Справочник по лекарственным растениям, 2-е изд. – М.: Медицина. -1988. -464 с.].

Предлагаемый сбор регулирует липидный обмен, стимулирует работоспособность при выраженных стрессовых и физических нагрузках, состоит из следующих компонентов:
1. Аир болотный (корневища) – 15
2. Ромашка аптечная (цветки) – 10
3. Шиповник (плоды) – 30
4. Одуванчик лекарственный (корни) – 15
5. Боярышник кроваво-красный (плоды) – 20
6. Бадан толстолистный (черные листья, перезимовавшие) – 5
7. Горец птичий (трава) – 5
Конкретный пример получения сбора.

Для приготовления 1000 г предлагаемого сбора берут: корневища аира – 153 г; цветки ромашки – 102 г; плоды шиповника – 306 г; корни одуванчика – 153 г; плоды боярышника – 204 г; трава горца – 51 г; листья бадана – 51 г, смешивают, измельчают на мельнице до размера частиц 1,0-2,0 мм, просеивают через сито с диаметром отверстий 2 мм и взвешивают. Потери сырья при измельчении составляют 2%.

Для доказательства обоснованности предложенного состава сбора, содержащего биологически активные вещества, которые ответственны за выраженную гиполипидемическую и адаптогенную активность, авторами проведены серии экспериментов, данные которых приведены ниже.

Анализу были подвергнуты образцы сбора, изготовленного из лекарственного растительного сырья, качество которого соответствует действующим статьям ГФ XI и ГОСТам.

Методика определения экстрактивных веществ в сборе.

Содержание экстрактивных веществ определяли по ГФ XI, т.1, с.235.

За основу выбрана методика приготовления отваров. Постоянные константы: горячая дистиллированная вода, доведенная до кипения, температура экстракции – кипящая водяная баня, время экстракции – 30 мин, настаивание – 10 мин, кратность – однократно, соотношение сырье:экстрагент – 1:10.

Около 5,0 г (точная навеска) помещают в коническую колбу вместимостью 300 мл, прибавляют 50 мл дистиллированной воды, колбу соединяют с обратным холодильником, нагревают на водяной бане, поддерживая слабое кипение в течение 30 мин. После охлаждения извлечение фильтруют через бумажный фильтр в сухую колбу вместимостью 100 мл. 25 мл полученного фильтрата пипеткой переносят в предварительно высушенную при температуре 100-105^oC до постоянной массы и точно взвешенную фарфоровую чашку и выпаривают досуха на водяной бане. Чашку с остатком переносят в сушильный шкаф и сушат при температуре 100-105^oC до постоянной массы, охлаждают и взвешивают.

Содержание экстрактивных веществ в % (X) в пересчете на абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле

где м₁ – масса сбора, г;
м – масса сухого остатка, г;
ш – потеря в массе при высушивании сбора,%,
V_раств – объем воды, взятой для экстракции, мл,
V_пр – объем воды пробы, взятой для высушивания, мл.

Методика определения аскорбиновой кислоты в сборе.

Около 5,0 г (точная навеска) измельченного до размера частиц 1 мм сбора помещают в колбу вместимостью 300 мл, прибавляют 50 мл воды дистиллированной, колбу соединяют с обратным холодильником и нагревают на водяной бане, поддерживая слабое кипение в течение 30 мин. После охлаждения в течение 10 мин извлечение фильтруют через бумажный фильтр в сухую колбу вместимостью 100 мл. К 5 мл извлечения прибавляют 20 мл 96% этилового спирта, перемешивают и фильтруют через бумажный фильтр. 10 мл полученного фильтрата помещают в колбу мерную вместимостью 50 мл и доводят объем раствора водой до метки. В пробирки с притертыми пробками отмеривают: в первую пробирку 5 мл испытуемого раствора, во вторую – 5 мл раствора аскорбиновой кислоты стандартного образца, в третью – 5 мл воды, прибавляют по 5 мл реактива – желтого фосфорно-молибденового комплекса, ставят в кипящую водяную баню на 10 мин.

Затем охлаждают под струей холодной воды и измеряют оптическую плотность испытуемого и стандартного растворов с помощью фотоэлектроколориметра при длине волны 720 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

Содержание кислоты аскорбиновой в сборе вычисляют по формуле

где Д – оптическая платность испытуемого раствора;
Д_о – оптическая плотность раствора аскорбиновой кислоты;
ш – потеря в массе при высушивании;
м – навеска сбора,
Примечание. Приготовление раствора кислоты аскорбиновой стандартного образца. 0,100 г (точная навеска) кислоты аскорбиновой растворяют в 90 мл 70% этанола в мерной колбе вместимостью 100 мл и после растворения доводят объем раствора тем же спиртом до метки (раствор А). В день опыта 5 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора до метки водой. 1 мл раствора содержит 0,00005 г кислоты аскорбиновой.

Приготовление реактива. 0,05 г натрия фосфата двузамещенного растворяют в 100 мл воды в мерной колбе вместимостью 200 мл. После растворения прибавляют 10 мл кислоты серной концентрированной, затем прибавляют 0,8 г аммония молибдата. После растворения доводят объем раствора водой до метки.

Методика определения эфирных масел в сборе.

Около 15,0 г (точная навеска) измельченного до размера частиц 1 мм сбора помещают в широкогорлую круглодонную колбу, наливают 300 мл воды и закрывают резиновой пробкой с обратным холодильником. В пробке снизу укрепляют металлические крючки, на которые при помощи тонкой проволоки подвешивают градуированный приемник так, чтобы конец холодильника находился точно под воронкообразным расширением приемника на расстоянии около 1 мм, не касаясь его в течение 2 часов. Объем масла в градуированной части приемника определяют после окончания перегонки и охлаждения колбы до комнатной температуры.

Содержание эфирного масла (X) в абсолютно сухом сырье вычисляют по формуле

где V – объем эфирного масла, мл;
м – навеска сбора, г;
ш – потеря в массе при высушивании, %.

Методика определения дубильных веществ в сборе.

Около 2,0 г (точная навеска) измельченного до размера частиц 1 мм сбора помещают в коническую колбу вместимостью 500 мл, заливают 250 мл нагретой до кипения воды и нагревают с обратным холодильником на кипящей водяной бане в течение 30 мин при периодическом перемешивании. Жидкость отстаивают, охлаждая до комнатной температуры, декантируют около 100 мл в коническую колбу вместимостью 200 мл через вату, чтобы частицы сырья не попали в колбу. Затем отбирают пипеткой 25 мл полученной жидкости в другую коническую колбу вместимостью 750 мл, добавляют 500 мл воды, 25 мл раствора индигосульфокислоты и титруют при постоянном перемешивании 0,1 н. раствором калия марганцовокислого до золотисто-желтого окрашивания, сравнивая его с окраской раствора контрольного испытания. Для проведения контрольного испытания в коническую колбу вместимостью 750 мл наливают 525 мл дистиллированной воды, добавляют 25 мл раствора индигосульфокислоты и титруют при постоянном перемешивании 0,1 н. раствором марганцовокислого калия до золотисто-желтого окрашивания.

Содержание дубильных веществ (X) в % в абсолютно сухом сырье вычисляют по формуле

где V – объем 0,1 н. раствора перманганата калия, израсходованного на титрование извлечения, мл;
V₁ – объем 0,1 н. перманганата калия, израсходованного на титрование в контрольном опыте, мл;
м – навеска сбора, г;
ш – потеря в массе при высушивании, %.

Полученные экспериментальные данные по определению биологически активных веществ (БАВ) в предлагаемом сборе приведены в табл. 1.

Примеры конкретного выполнения
Пример 1. Измельченные и просеянные через сито с диаметром 0,5 мм корни аира болотного – 1,5 г, цветки ромашки – 1 г, плоды шиповника – 3 г, корни одуванчика – 1,5 г, плоды боярышника – 2 г, трава горца птичьего – 0,5 г, черные листья бадана – 0,5 г смешивают, помещают в колбу вместимостью 300 мл, прибавляют 100 мл воды дистиллированной, колбу соединяют с обратным холодильником и нагревают на водяной бане, поддерживая кипение в течение 30 мин. После охлаждения в течение 10 мин извлечение фильтруют через бумажный фильтр, полученный фильтрат используют для определения фармакологической активности. Полученные данные приведены в табл. 2.

Фармакологическое исследование сбора проводили в соответствии с общепринятыми методами. Гиполипидемическое действие сбора оценивали согласно методическим рекомендациям МЗ РФ [Методические рекомендации. Экспериментальное изучение гиполипидемических и антисклеротических средств. -М., 1988. -с.5-6] . Эксперименты проведены на белых беспородных крысах с исходной массой 200-220 г. Гиперлипидемию вызывали однократным введением внутрибрюшинно твина-80 в дозе 250 мг/кг массы животных. Отвар сбора вводили опытным животным внутрижелудочно в течение 7 дней до инъекции твина один раз в сутки в дозе 1 мл/100 г массы животных. Контрольная группа животных получала в эквиобъемном количестве дистиллированную воду. Препарат сравнения – отвар антиатеросклеротического сбора, состоящего из цветков боярышника (15 ч.); травы хвоща полевого (15 ч.); травы омелы белой (15 ч.); листьев барвинка малого (15 ч. ); травы тысячелистника (30 ч.) [Соколов С.Я., Замотаев И.П. Справочник по лекарственным растениям, 2-е изд. -М.: Медицина. -1988. -464 с. ] , вводили в дозе 1 мл/100 г массы крыс другой группе животных по аналогичной схеме. Показатели липидного обмена – общий холестерин (ОХС), триацилглицериды (ТГ), суммарная фракция липопротеидов низкой плотности и липопротеидов очень низкой плотности (ЛПНП + ЛПОНП) – определяли согласно унифицированным методам клинической химии [Колб В.Г., Камышников B.C. Справочник по клинической химии. – 2 изд. – Минск. -1982]. Полученные данные приведены в табл. 3.

Результаты опыта показали, что предлагаемый сбор в указанной дозе снижает содержание ОХС на 32%, ТГ – на 43%, ЛПНП + ЛПОНП – на 40% и обладает более выраженным гиполипидемическим действием, чем препарат сравнения.

Пример 2. Измельченные и просеянные через сито с диаметром 2 мм корни аира болотного – 1,5 г, цветки ромашки – 1 г, плоды шиповника – 3 г, корни одуванчика – 1,5 г, плоды боярышника – 2 г, трава горца птичьего – 0,5 г, черные листья бадана – 0,5 г смешивают, помещают в колбу вместимостью 300 мл, прибавляют 100 мл воды дистиллированной, колбу соединяют с обратным холодильником и нагревают на водяной бане, поддерживая кипение в течение 30 мин. После охлаждения в течение 10 мин извлечение фильтруют через бумажный фильтр, полученный фильтрат используют для определения фармакологической активности, содержания экстрактивных и флавоноидных веществ. Полученные данные приведены в табл. 4.

Изучено влияние гиполипидемического сбора на липидный обмен при этаноловой гиперлипидемии. В экспериментах использовали белых беспородных крыс-самцов с исходной массой 200-250 г. Опытным группам животных в течение 7 дней до введения этанола внутрижелудочно 1 раз в сутки вводили отвар изучаемого сбора в дозе 600 мг/кг (в пересчете на сухой остаток отвара 1:10), препарат сравнения – отвар антисклеротического сбора [Соколов С.Я., Замотаев И. П. Справочник по лекарственным растениям, 2-е изд. – М.: Медицина. -1988. -464 с. ] в той же дозе. Животные контрольной группы по аналогичной схеме получали эквиобъемное количество дистиллированной воды. Этанол в дозе 6 г/кг массы вводили однократно, внутрижелудочно после 24-часового голодания. Исследования липидного состава крови животных проводили через 18 часов после введения этанола. Результаты экспериментов даны в табл. 5.

Гиполипидемический сбор существенно снижает уровень ОХС на 42%; ТГ – на 47%; липопротеидов – на 40%, что свидетельствует о выраженном гиполипидемическом эффекте при этанольной гиперлипидемии.

Пример 3. Измельченные и просеянные через сито с диаметром 5 мм корни аира болотного – 1,5 г, цветки ромашки – 1 г, плоды шиповника – 3 г, корни одуванчика – 1,5 г, плоды боярышника – 2 г, трава горца птичьего – 0,5 г, черные листья бадана – 0,5 г смешивают, помещают в колбу вместимостью 300 мл, прибавляют 100 мл воды дистиллированной, колбу соединяют с обратным холодильником и нагревают на водяной бане, поддерживая кипение в течение 30 мин. После охлаждения в течение 10 мин извлечение фильтруют через бумажный фильтр. В полученном фильтрате определяют содержание экстрактивных и флавоноидных веществ. Полученные данные приведены в табл. 6.

Адаптогенные свойства предлагаемого сбора оценивали по улучшению физической работоспособности животных (Брехман, 1969). Опыты проведены на мышах с исходной массой 28 – 30 г. Влияние сбора оценивали на моделях динамической (плавание) и ортостатической нагрузки (вис на шесте). Отвар сбора вводили мышам 1 раз в сутки в течение 7 дней в объеме 1 мл/100 г массы животных. Препарат сравнения – отвар антисклеротического сбора [Соколов С.Я., Замотаев И.П. Справочник по лекарственным растениям, 2-е изд. – М.: Медицина. – 1988. -464 с. ] – вводили другой группе мышей по аналогичной схеме. Контрольная группа животных получала в эквиобъемном количестве дистиллированную воду. Результаты опытов представлены в табл. 7.

Полученные данные показывают увеличение длительности виса на шесте на 31% и плавания на 36% у подопытных животных при введении отвара гиполипидемического сбора. Применение препарата сравнения на фоне физической нагрузки оказывает аналогичное действие. Таким образом, гиполипидемический сбор оказывает выраженное адаптогенное действие, повышая силовую выносливость.

Изучение острой токсичности данного сбора проводили на 2-х видах животных (белые мыши и белые крысы) согласно нормативному документу GLP. Фитосбор вводили в форме отвара внутрижелудочно однократно в интервале доз 1000-6000 мг/кг (в пересчете на сухой остаток отвара 1:10) массы животного. Каждую дозу исследовали на 6 животных. При введении максимально возможного объема отвара фитосбора гибели животных и заметных признаков интоксикации не наблюдали в течение 14 суток. Это позволяет отнести исследуемый фитосбор к группе веществ практически нетоксичных по действующей классификации [Сидоров К.К. Токсикология новых промышленных химических веществ. -М., 1973].

Пример 4. Клинические исследования гиполипидемического действия предлагаемого сбора проведены на базе Республиканской клинической больницы (РКБ) им. Н.А. Семашко г. Улан-Удэ.

Учитывая, что артериальная гипертония (АГ), ишемическая болезнь сердца (ИБС) сопровождаются нарушениями липидного обмена, в исследования были включены две группы больных: 1-я – 28 пациентов с гипертонической болезнью II А стадии, ИБС; 2-я – 46 пациентов с гипертонической болезнью II Б стадии с редкими кризами – в среднем 1 раз в 2 месяца, ИБС. Давность заболевания больных составляет 14-25 лет. Возраст больных – 56-72 года. У всех больных диагностирована первичная гиперлипидемия. Все отобранные больные в период исходного наблюдения 1998-1999 гг. находились на стационарном лечении кардиологического отделения РКБ. Клиническое состояние больных: 75% больных с жалобами на постоянные головные боли, головокружения; у 25% больных спазмы сосудов головного мозга сопровождались болями в области сердца. Клиническая характеристика больных представлена в табл. 8.

Сведения в динамике получали путем активного неоднократного вызова больных, данные обследования заносили в специальную карту клинического испытания предлагаемого сбора.

39 больных принимали амбулаторно отвар предлагаемого сбора по 1/3 стакана 3 раза в день в течение 21 дня (3 недели), затем делали перерыв – 1 неделю, прием препарата повторяли дважды по 3 недели с перерывом – 1 неделю. 35 больных получали отвар антисклеротического сбора [Соколов С.Я., Замотаев И. П. Справочник по лекарственным растениям, 2-е изд. – М.: Медицина. -1988. -464 с. ] по сходной схеме. Все больные сочетали прием сборов с приемом однотипных гипотензивных, антиангинальных препаратов в течение всего периода наблюдения (3 месяца). У всех обследованных, кроме учета динамики клинических проявлений болезни (измерение артериального давления, ЭКГ в состоянии покоя), проводили биохимические исследования крови для определения показателей липидного обмена. Анализы крови натощак (12-14-часовое голодание) брали исходно, после 3-х, 6-ти, 9-ти недель лечения отварами сборов для определения уровней ОХС, ТГ, холестерин (ХС) липопротеидов высокой плотности (ЛПВП) и ХС липопротеидов низкой плотности (ЛПНП). Статистическая обработка результатов с использованием критерия Стьюдента.

Результаты биохимического исследования показателей липидного обмена у больных показаны в табл. 9.

Данные таблицы показывают, что через 3 недели после начала лечения испытуемым сбором отмечено достоверное снижение уровней ОХС, ТГ, ХС ЛПНП во всех группах больных, и степень снижения их сохраняется после 9-ти (3 месяцев) лечения сбором на достаточно высоком уровне, не уступая показателям, полученным в случае лечения препаратом сравнения. Следует отметить, что более значительно концентрация ОХС, ТГ, ХС ЛПНП снижается у больных 1-й группы по сравнению с соответствующими показателями у больных 2-ой группы. Снижение уровней ХС ЛПНП в 1-ой группе больных через 3 недели лечения испытуемым сбором составило – 9,2%, через 6 недель – 14,7%; через 3 месяца – 15%; во второй группе – 7,3%; 11% и 16,5% соответственно; снижение уровня ТГ в 1-ой группе составило через 3 недели – 4,3%; через 6 недель – 12,2%; через 3 месяца – 21,3%, а во второй группе – 4,5%; 12%; 18% соответственно.

В ходе лечения испытуемым сбором через 3 месяца достоверно увеличилась концентрация ХС ЛПВП в 1-ой группе – на 15,7%; во 2-ой группе – на 9,8%, что превышает показатели, полученные с применением препарата сравнения в 1-ой группе – на 4,2%; во 2-ой – на 2,1%.

Таким образом, испытуемый сбор достоверно снижает уровни атерогенных липидов и его гиполипидемическая эффективность не уступает таковой препарата сравнения.

У большинства больных (82%) на фоне приема препарата отмечалось уменьшение головных болей, головокружения, также уменьшение тяжести и частоты кризов. На ЭКГ у 72% больных проходят признаки ишемии миокарда: сегмент ST приходит к изолинии, возрастает амплитуда положительного зубца Т. Показатели цифр артериального давления при приеме препаратов уменьшались на 20-25% от исходных показателей.

Таким образом, клинические, биохимические методы исследования свидетельствуют о терапевтической эффективности предлагаемого сбора.

Формула изобретения

Лекарственный сбор, обладающий гиполипидемическим и адаптогенным свойствами на основе растительного сырья отличающийся тем, что в качестве растительного сырья содержит, мас. ч.:
Аир болотный (корневища) – 15
Ромашка аптечная (цветки) – 10
Шиповник (плоды) – 30
Одуванчик лекарственный (корни) – 15
Боярышник кроваво-красный (плоды) – 20
Бадан толстолистный (черные листья, перезимовавшие) – 5
Горец птичий (трава) – 5

РИСУНКИ

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 04.03.2002

Номер и год публикации бюллетеня: 11-2003

Извещение опубликовано: 20.04.2003