Патент на изобретение №2170931

(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТИ К ФОРМИРОВАНИЮ ОПИАТНОЙ ЗАВИСИМОСТИ

(57) Реферат:

Изобретение относится к медицине, в частности к наркологии. Способ обеспечивает безопасность исследования и объективность прогноза. Для чего применяют тестовую нагрузку морфином, при этом определяют концентрацию циклического 3′, 5′-аденозинмонофосфата в мононуклеарных клетках периферической крови in vitro при тестовой нагрузке морфином и морфином с добавлением налоксона, рассчитывают индекс предрасположенности путем деления второго показателя на первый и при значении индекса не более 1,3 определяют высокую предрасположенность к формированию опиатной зависимости.

Изобретение относится к области медицины, а именно к наркологии, и может быть использовано с целью выявления лиц с высоким риском развития зависимости для повышения эффективности профилактических мероприятий.

Известен способ определения предрасположенности к формированию опиатной зависимости в экспериментальных условиях у крыс путем тестовой нагрузки морфином методом самовведения с последующим определением количества морфина, потребленного животным (в ж-ле: Бюллетень Экспериментальной Биологии и Медицины. 1992 Сентябрь 6; 114(9)стр. 296-298).

Недостатком этого способа является невозможность его использования у человека в связи с необходимостью искусственной морфинизации.

Техническим результатом предлагаемого решения является создание безопасного, объективного, прижизненного способа определения предрасположенности к формированию опиатной зависимости у человека.

Этот результат достигается тем, что определяют концентрацию циклического 3′, 5′-аденозинмонофосфата (цАМФ) в мононуклеарных клетках периферической крови in vitro при тестовой нагрузке морфином и морфином с добавлением налоксона, рассчитывают индекс предрасположенности путем деления второго показателя на первый и при значении индекса не более 1,3 определяют высокую предрасположенность к формированию опиатной зависимости.

Не вытекает из известного уровня техники тот факт, что значение индекса предрасположенности не более 1,3 может служить показателем высокой предрасположенности к формированию опиатной зависимости.

Способ осуществляют следующим образом:
Из крови донора, разбавленной равным объемом культуральной среды RPMI-1640 с EDTA, методом центрифугирования (400g х 45 мин) в градиенте плотности выделяют суммарную фракцию мононуклеарных клеток периферической крови (МПК); собранные МПК промывают в избытке RPMI-1640 (400g x 15′). 5 10⁵ МПК инкубируют в течение 30 минут при комнатной температуре в конечном объеме 100 мкл RPMI-1640, содержащей 10 мкМ форсколина, 1 mM EDTA, 6 mM теофиллина, 50 нМ морфина гидрохлорида. В части проб в инкубационную среду вносят 20 нМ налоксона. Реакцию останавливают внесением в пробу 1 мл охлажденного этанола. Пробы переносят в пробирки для анализа цАМФ, этанол выпаривают в токе азота и исследуют, например, с помощью коммерческого набора “Cyclic AMP [³H] assay system” (Amersham). Рассчитывают индекс предрасположенности путем деления концентрации цАМФ в мононуклеарных клетках периферической крови при тестовой нагрузке морфином с добавлением налоксона на концентрацию цАМФ при тестовой нагрузке морфином. При значении индекса не более 1,3 определяют высокую предрасположенность к формированию опиатной зависимости.

Пример 1.

В мононуклеарных клетках периферической крови донора in vitro определяют концентрацию цАМФ при тестовой нагрузке морфином и морфином с добавлением налоксона.

Концентрация цАМФ при тестовой нагрузке морфином составляет 4,5 пМ, при тестовой нагрузке морфином с добавлением налоксона – 5,85 пМ. Коэффициент ингибирования 5,85/4,5 = 1,3, что соответствует высокой предрасположенности к формированию опиатной зависимости.

Предлагаемый способ применен у 28 доноров. Совпадение прогнозируемого и реального результатов имело место в 82,1% случаев.

Предлагаемый способ имеет преимущество перед известными, заключающееся в том, что он позволяет безопасно, объективно, без морфинизации организма (испытуемого) оценить предрасположенность конкретного индивидуума к формированию опиатной зависимости.

Формула изобретения

Способ определения предрасположенности к формированию опиатной зависимости путем применения тестовой нагрузки морфином, отличающийся тем, что определяют концентрацию циклического 3′,5′-аденозинмонофосфата в мононуклеарных клетках периферической крови in vitro при тестовой нагрузке морфином и морфином с добавлением налоксона, рассчитывают индекс предрасположенности путем деления второго показателя на первый и при значении индекса не более 1,3 определяют высокую предрасположенность к формированию опиатной зависимости.

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 21.06.2003

Извещение опубликовано: 10.03.2005 БИ: 07/2005