Патент на изобретение №2170586
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА АЛЬФА-ФЕТОПРОТЕИНА
(57) Реферат: Абортную сыворотку человека смешивают в соотношении 10:1 с продуктом, полученным путем смешивания сыворотки с антителами к альфа-фетопротеину человеческому с нормальной человеческой сывороткой. Смесь центрифугируют, осадок растворяют в физрастворе рН 2, в раствор добавляют в соотношении 1:1 охлажденный этиловый спирт, центрифугируют, в оставшийся раствор снова добавляют охлажденный этиловый спирт в пропорции 2:1, после центрифугирования получают осадок, представляющий собой альфа-фетопротеин человеческий с чистотой не ниже 90%, в который затем вводят полисахарид и осуществляют фасовку и лиофильное высушивание. Технический результат: упрощение и удешевление способа при высокой чистоте и качестве целевого продукта. 1 з.п.ф-лы. Изобретение относится к медицине и биотехнологии и может быть использовано для изготовления лекарственной формы альфа-фетопротеина (АФП) человеческого, используемого для лечения заболеваний с аутоиммунными нарушениями. Известен способ получения альфа-фетопротеина путем осветления исходного сырья центрифугированием и хроматографической очисткой целевого продукта на аффинном сорбенте в две стадии: сначала на сорбенте, содержащем антитела к альфа-фетопротеину, а затем на сорбенте, содержащем комплекс антител против белков крови человека, причем в качестве аффинного сорбента используют Br-CN-сефарозу, активированную глутаровым альдегидом (Патент РФ N 2100031, опубл. 27.12.97, бюл. N 36). Недостатки: способ сложен и предполагает использование дорогих реактивов. Изобретение направлено на решение задачи: упрощение и удешевление способа при высокой чистоте и качестве целевого продукта. Указанная задача достигается путем смешивания абортной сыворотки человека в соотношении 10:1 с продуктом, полученным путем смешивания сыворотки с антителами к АФП человеческому с нормальной человеческой сывороткой в соотношении 10:1, pH полученной смеси доводят до 11. Смесь центрифугируют, полученный осадок растворяют в физрастворе и доводят до pH 2, затем в раствор добавляют в соотношении 1:1 охлажденный до t -30oC этиловый спирт, смесь центрифугируют, в оставшийся раствор добавляют в пропорции 2:1 охлажденный этиловый спирт, смесь центрифугируют и получают осадок АФП не ниже 90%. Способ осуществляют следующим образом. Сыворотку крови с антителами к АФП человеческому, содержащую около 2 г указанных антител смешивают в соотношении 10:1 с нормальной человеческой сывороткой крови и в течение 30 минут выдерживают при t -37oC, затем pH полученной смеси доводят до 11 и смесь центрифугируют при 2500 об/мин в течение 20 минут. Полученный осадок отбрасывают, а pH жидкости доводят до 7. Затем эту жидкость смешивают в соотношении 1:10 с абортной сывороткой человека, содержащей 100 мг/л АФП и полученную смесь выдерживают в течение 30 минут при t -37oC. Далее рH полученной смеси доводят до 11 и смесь центрифугируют при 2500 об/мин в течение 20 минут. Полученный осадок растворяют в минимальном количестве физраствора и доводят до pH 2. Раствор выдерживают при t 37oC в течение 30 минут. В полученный раствор добавляют в соотношении 1:1 этиловый спирт, охлажденный до t -30oC. Смесь центрифугируют при охлаждении при 5000 об/мин в течение 30 минут. Осадок, содержащий антитела к АФП, хранят при t -6oC. В оставшийся раствор добавляют в соотношении 2:1 этиловый спирт, охлажденный до t -30oC. Смесь центрифугируют при охлаждении при 5000 об/мин в течение 30 минут. Полученный осадок представляет собой АФП-человеческий чистотой не ниже 90%. Далее в целевой продукт вводят полисахарид реополиглюкин или альбумин в количестве 3-10 мг на 75 мкг АФП. Раствор разводят физраствором до концентрации 75 мкг АФП в 1 мл, стерилизуют, расфасовывают в ампулы или флаконы по 1 мл и осуществляют лиофильное высушивание. Способ позволяет упростить и удешевить получение препарата АФП, сохранив при этом высокое качество, чистоту и стабильность целевого продукта. Формула изобретения
PC4A – Регистрация договора об уступке патента Российской Федерации на изобретение
Номер и год публикации бюллетеня: 5-2002
(73) Патентообладатель:
Дата и номер государственной регистрации перехода исключительного права: 04.12.2001 № 13607
Извещение опубликовано: 20.02.2002
QB4A Государственная регистрация договора о распоряжении исключительным правом
Дата и номер государственной регистрации договора: 26.01.2011 № РД0075710
Вид договора: лицензионный
Лицо(а), передающее(ие) исключительное право:
Лицо, которому предоставлено право использования:
Условия договора: НИЛ, на срок действия патентов на территории РФ.
Дата публикации: 10.03.2011
|
||||||||||||||||||||||||||