Патент на изобретение №2397711

(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ВНУТРИПЕЧЕНОЧНОГО ХОЛЕСТАЗА ПРИ ПОЛИВИРУСНЫХ ГЕПАТИТАХ

(57) Реферат:

Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии. Для диагностики внутрипеченочного холестаза при поливирусных гепатитах проводят биохимическое и иммунологическое исследования. Дополнительно проводят морфологическое исследование. При повышении уровня щелочной фосфатазы до 200 Е/л и более гаммаглутамилтранспептидазы до 100 Е/л и более, уровня иммуноглобулина IgM до 215 мг% и выше, при выраженной жировой дистрофии гепатоцитов с преимущественным увеличением уровня средних и мелкокапельных частиц слабоокрашенных липидов с внутриклеточным холестазом, вакуольной дистрофии гепатоцитов и наличии пенистых клеток и деформированных темноокрашенных эритроцитов в синусоидах, дистрофии холангиоцитов диагностируют внутрипеченочный холестаз. Способ повышает точность диагностики внутрипеченочного холестаза при поливирусных гепатитах. 2 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии, и может быть применено при диагностике внутрипеченочного холестаза при поливирусных гепатитах.

Известен способ диагностики гепатита С с помощью аппарата FibroScan, принятый за аналог (1 – Kettaneh A. Et al. Features associated with seiscass rate and performance of FibroScan, measurements for the duiagnosis of cirrhosis in HCV patients: A prospective study of D35 patients. J Hepatol. 2007; 46:628-634).

Известен способ диагностики поливирусных гепатитов путем обнаружения маркеров вирусной инфекции, принятый за прототип (2 – Nousbaum J.B., Pol S., Nalpas В. et al. Hepatitis С virus type 1b (II) infection in France and Italy. Collaborative Study Group. Ann Intern Med. 1995 Feb 1; 122(3):161-8). Однако данный способ не обладает достаточной точностью.

Целью настоящего изобретения является повышение точности диагностики внутрипеченочного холестаза при поливирусных гепатитах.

Технический результат достигается тем, что дополнительно проводят морфологическое исследование и при повышении уровня щелочной фосфатазы до 200 Е/л и более, гаммаглутамилтранспептидазы до 100 Е/л и более, уровня иммуноглобулина IgM до 215 мг % и выше, при выраженной жировой дистрофии гепатоцитов с преимущественным увеличением уровня средних и мелкокапельных частиц слабоокрашенных липидов с внутриклеточным холестазом, вакуольной дистрофии гепатоцитов и наличии пенистых клеток и деформированных темноокрашенных эритроцитов в синусоидах, дистрофии холангиоцитов диагностируют внутрипеченочный холестаз.

Способ осуществляют следующим образом.

При поступлении выясняют наличие жалоб на чувство тяжести в области правого подреберья, горечь во рту. Из анамнеза выясняют употребление наркотиков, возможность гемотрансфузии, перенесенные гепатит В, С, G, ТТ и другие.

При осмотре состояние удовлетворительное. Субиктеричность склер. Пальмарная эритема. В легких дыхание везикулярное, хрипов нет, ЧДД 16-18 в мин. Тоны сердца звучные, ритм правильный. ЧСС 72-80 в мин. АД – 120-130 на 70-80 мм рт.ст. Язык слегка обложен белым налетом. Живот мягкий, при пальпации болезненный во всех отделах. Печень не увеличена или выступает из-под края реберной дуги. Селезенка не пальпируется. Возможны отеки голеней, асцит не определяется.

На основании PCR ставят диагноз: Хронический гепатит сочетанной С+В+G+ТТ – вирусной этиологии умеренной активности.

Биохимический анализ крови – увеличение щелочной фосфатазы 200 Е/л и выше, ГГТП – 100 Е/л и выше, иммуноглобулины IgM – 215 мг % и выше.

УЗИ: Печень – увеличена в размерах, эхогенность ткани печени умеренно повышена. Сосудистый рисунок обеднен. Воротная вена не расширена. Желчный пузырь: форма не изменена, размеры не изменены, стенки не изменены, эхогенность средняя, структура однородна, конкрементов нет. Калибр общего желчного протока 3-5 мм. Поджелудочная железа: расположение обычное, размеры не изменены. Контуры – ровные, четкие, структура однородная, эхогенность не изменена. Вирсунгов проток в норме. Селезенка – размеры не изменены. Контуры – ровные, четкие. Площадь – 25-30 см². Селезеночная вена не расширена.

Заключение: диффузное поражение печени.

ЭГДС: при осмотре пищевода патологии не выявлено. Слизистая оболочка желудка светло-розовая. Складки воздухом расправляются. Перистальтика сохранена. Привратник свободно проходим. Слизистая оболочка луковицы двенадцатиперстной кишки светло-розовая, складки эластичные. Заключение: патологических изменений в пищеводе, желудке и луковице двенадцатиперстной кишки не выявлено.

ЭКГ: нормальное положение электрической оси сердца, ритм синусовый, правильный, ЧСС 60-80 в мин.

Гистологическое исследование. Ткань для полутонких срезов фиксировали в 2% глютаровом альдегиде на 0,1 М какодилатном буфере (рН 7,2), постфиксировали в 1% четырехокиси осмия, обезвоживали в серии спиртов возрастающей концентрации и заключали в аралдит. Ориентировку в ткани проводили на полутонких одномикронных срезах, окрашенных 0,1% метиленовым синим.

Портальные тракты расширены, слабо инфильтрированы лимфоцитами с небольшой примесью макрофагов и сильно фиброзированы. Некоторые портальные тракты связаны тонкими соединительнотканными септами. Выраженная жировая дистрофия гепатоцитов с преимущественным увеличением уровня средних и мелкокапельных частиц слабоокрашенных липидов с внутриклеточным холестазом, вакуольной дистрофией гепатоцитов. Мелкие внутридольковые смешанноклеточные инфильтраты. Выявляют наличие пенистых клеток и деформированных темноокрашенных эритроцитов в синусоидах, дистрофию холангиоцитов. Заключение. Хронический портальный гепатит низкой степени активности. Выраженный фиброз и стеатоз печени.

Проводят биохимическое, иммунологическое и морфологическое исследование и при повышении уровня щелочной фосфатазы до 200 и более, гаммаглутамилтранспептидазы до 100 и более, уровня иммуноглобулина IgM до 215 и выше, при выраженной жировой дистрофии гепатоцитов с преимущественным увеличением уровня средних и мелкокапельных частиц слабоокрашенных липидов с внутриклеточным холестазом, вакуольной дистрофии гепатоцитов и наличии пенистых клеток и деформированных темноокрашенных эритроцитов в синусоидах, дистрофии холангиоцитов диагностируют внутрипеченочный холестаз при поливирусных гепатитах.

Проведенное лечение внутрипеченочного холестаза подтвердило правильность поставленного диагноза. Больные выписаны в удовлетворительном состоянии.

Способ далее подтверждают примеры его реализации.

Пример 1.

Больной Л., 1975 г.р., поступил с диагнозом: Хронический гепатит сочетанной С+В+G – вирусной этиологии умеренной активности РНК HCV позитивный.

При поступлении жалобы на чувство тяжести в области правого подреберья, горечь во рту.

АНАМНЕЗ. В 1999 г. перенес острый вирусный гепатит В. В 2003 г. пролечен по поводу перелома нижней челюсти. Впервые были выявлены AT к HCV. В марте 2008 г. выявлена РНК HCV. Количество – 5,3×10⁶ МЕ/мл или 2,13×10⁶ копий/мл. Генотип 3а. РНК HGV – обнаружено. ДНК ТТУ – отрицательно.

Биохимический анализ крови – АЛТ – 153, ACT – 90.

Осмотр: состояние удовлетворительное. Субиктеричность склер. Пальмарная эритема. В легких дыхание везикулярное, хрипов нет, ЧДД – 16 в мин. Тоны сердца звучные, ритм правильный. ЧСС – 76 в мин. АД – 120 и 70 мм рт.ст. Язык слегка обложен белым налетом. Живот мягкий, при пальпации безболезненный во всех отделах. Печень не увеличена, не выступает из-под края реберной дуги. Селезенка не пальпируется. Отеки голеней, асцит не определяется.

Данные обследования:

УЗИ: Печень – увеличена в размерах (толщина правой доли – 124 мм, толщина левой доли – 52 мм), эхогенность ткани печени умеренно повышена. Сосудистый рисунок обеднен. Воротная вена – 9,5 мм, не расширена. Желчный пузырь: форма не изменена, размеры не изменены. Длинник – 57 мм, поперечник – 21 мм, стенки не изменены, эхогенность средняя, структура однородна, конкрементов нет. Калибр общего желчного протока 3 мм. Поджелудочная железа: расположение обычное, размеры не изменены. Головка – 22 мм, тело – 10 мм, хвост – 17 мм. Контуры – ровные, четкие, структура однородная, эхогенность не изменена. Вирсунгов проток 1 мм. Селезенка – размеры не изменены. Контуры – ровные, четкие. Длинник – 106 мм, поперечник – 34 мм. Площадь – 25 см². Селезеночная вена – 5 мм, не расширена. Почки: правая почка – 102×40 мм, левая почка – 102×40 мм. Чашечно-лоханочная система не расширена. Конкрементов нет.

Заключение: диффузное поражение печени.

ЭГДС: при осмотре пищевода патологии не выявлено. Слизистая оболочка желудка светло-розовая. Складки воздухом расправляются. Перистальтика сохранена. Привратник свободно троходим. Слизистая оболочка луковицы двенадцатиперстной кишки светло-розовая, складки эластичные. Заключение: патологических изменений в пищеводе, желудке и луковице двенадцатиперстной кишки не выявлено.

ЭКГ: нормальное положение электрической оси сердца, ритм синусовый, правильный, ЧСС – 68.

Гистологическое исследование. Портальные тракты расширены, слабо инфильтрированы лимфоцитами с небольшой примесью макрофагов и сильно фиброзированы. Некоторые портальные тракты связаны тонкими соединительнотканными септами. Выраженная жировая инфильтрация гепатоцитов. Индекс стеатоза – 3. Единичные тельца Маллори. Мелкие внутридольковые смешанноклеточные инфильтраты.

Заключение. Хронический портальный гепатит низкой степени активности. Выраженньй фиброз и стеатоз печени.

Ткань для полутонких срезов фиксировали в 2% глютаровом альдегиде на 0,1 М какодилатном буфере (рН 7,2), постфиксировали в 1% четырехокиси осмия, обезвоживали в серии спиртов возрастающей концентрации и заключали в аралдит. Ориентировку в ткани проводили на полутонких одномикронных срезах, окрашенных 0,1% метиленовым синим.

Обнаружена выраженная жировая дистрофия гепатоцитов с преимущественным увеличением уровня средних и мелкокапельных частиц слабоокрашенных липидов, внутриклеточный холестаз, вакуольная дистрофия гепатоцитов, пенистые клетки. В синусоидах найдены деформированные темноокрашенные эритроциты, дистрофия холангиоцитов печеночных протоков.

Транзиентальная эластометрия. Заключение степень фиброза по МЕТАВИР F0.

Лабораторные данные
Исследуемый компонент	Поступле- ние	Выпис- ка	Норма	Исследуемый компонент	Поступление	Выпис- ка	Норма
Гемоглобин	16,1	15,8	12-16 г/л	Билирубин	12,1	11,4	3,4-21,0 мкмоль/л
Эритроциты	5,0	5,0	3,9-4,7×106/мм3	прямой			0-3,4
							мкмоль/л
Гематокрит	45,8	54,9	35-47%	Щ.ф.	250	200	30-120 Е/л
Лейкоциты	5,1	5,2	4-9×103/мм3	АсТ	40,3	38	5-35 Е/л
эозинофилы	1	2	0,5-5%	АлТ	86,1	74,0	5-45 Е/л
п/я	1	1	1-6%	ГГТП	128,4	100,0	7-42 Е/л
с/я	58	55	47-72%	Холестерин	3,29	2,68	1,4-5,2 ммоль/л
Лимфоциты	32	37	19-37%	Общ. белок	75,1	74,3	66-87 г/л
Моноциты	8	5	3-11%	альбумины			35-52 г/л
Тромбоциты	274	153	150-400×103/мм3	Кальций			2,2-2,7 ммоль/л
СОЭ	5	4	3-20 мм/ч	Мочевина	5,65	4,9	1,7-8,3 ммоль/л
Сахар	5,34		4,1-5,9 ммоль/л	триглицериды	1,03	1,0	0-1,7 мкмс ммоль/л
				ХС-ЛПВП	1,47	1,5	1,4-5,2 ммоль/л
Протромбин	86,6		80-105%	ХС-ЛПНП	0,74	0,7	2,3-3,36 ммоль/л
MHO			0,9-1,2	Хлор			98-106 ммоль/л
Фибриноген	1,8		2,0-4,0 г/л	Железо			10,7-32,2 мкмоль/л
Группа крови	А(2) Rh-полож. КеллАг-отр.	Амилаза			28-80 E/л

Общий анализ мочи: уд вес – 1026, сахар, белок – отр., Л – 2-4 в поле зрения.

Анализ кала на скрытую кровь – отрицательно.

Иммунологическое обследование: HBsAg – отр, anti HCV IgG – выявлены, AT HCV IgM – выявлены, PB – отрицательно. Ат к ВИЧ – отрицательно. IgM – 215 (норма 50-130 мг%), IgG – 1700 (750-1300 мг%), IgA – 330 (90-230 мг%), РНК HCV – обнаружено, РНК HCV – количество 4,9×10⁴ МЕ/мл, 1,97×10⁵ копий/мл. Генотип – 1в. ДНК HBV – не обнаружена, AT HBs – не обнаружено, AT НВс IgG – обнаружено, AT НВс IgM – не обнаружено, НВе АГ не обнаружено, AT НВе – сомнительно.

Гормоны: Т3 – 1,76 (0,89-2,44 нмоль/л), Т4 – 92,28 (62,68-150,83 нмоль/л), ТТГ – 0,64 (0,4-4 мМЕ/л)

Данные биохимического и иммунологического исследования (уровень щелочной фосфатазы составляет 250 Е/л, гаммаглутамилтранспептидазы – 128,4 Е/л, иммуноглобулина IgM – 215 мг %) и морфологического исследования позволяют диагностировать внутрипеченочный холестаз при поливирусном гепатите.

Проведенное лечение внутрипеченочного холестаза подтвердило правильность поставленного диагноза. Больной выписан в удовлетворительном состоянии.

Пример 2.

Больной Л., 31 года, поступил с диагнозом: Хронический гепатит вирусной (C+G) этиологии, активный, РНК – позитивный. Хронический панкреатит, стадия обострения.

Поступил с жалобами на слабость, пожелтение глаз, судороги в нижних конечностях.

Анамнез: ОВГ и гемотрансфузий не было. В 1995-99 г.г. употреблял наркотики. В течение 3-х лет выявляются anti-HCV. Весной 2007 г. лечился в наркологическом отделении. Гепатоцеллюлярная недостаточность. Цитолиз. Желтуха. Интоксикация.

УЗИ: выраженная гепатомегалия, диффузные неспецифические изменения структуры печени, поджелудочной железы. Небольшая спленомегалия.

Биохимическое исследование. АЛТ – 306,5, ACT – 270,2, ГГТП – 1601,4, билирубин – 71,1, ЩФ – 347.

Объективный статус: Состояние удовлетворительное. Кожные покровы обычной окраски. Пальмарная эритема. В легких дыхание везикулярное, хрипов нет. ЧДД 16 в мин. Тоны сердца звучные, ритм правильный. ЧСС 76 в мин. АД 130/80 мм рт.ст. Язык влажный. Живот болезненный в проекции поджелудочной железы. Печень выступает из-под края реберной дуги на 1-2 см. Селезенка не пальпируется. Симптом поколачивания отрицательный с обеих сторон. Асцита нет.

Данные обследования:

УЗИ 31.08: Печень – увеличена 13,9×6,8 см. Структура неоднородная. Эхогенность повышена, эхо-сигналы расположены компактно. Сосудистый рисунок обеднен. Воротная вена не расширена, 12 мм. Желчные протоки не расширены. Холедох 3 мм. Желчный пузырь не изменен, 5,7×2,3 см. Стенки утолщены, 2,5 мм. Конкрементов нет. Поджелудочная железа – размеры в норме (головка 24 мм, тело 13 мм, хвост 25 мм), контуры неровные, нечеткие. Структура однородная. Эхогенность повышена, преобладание эхо-сигналов высокой интенсивности. Вирсунгов проток не расширен, 1 мм. Селезенка увеличена, 127×52 мм. Площадь 60 см. Селезеночная вена не расширена, 8 мм. Почки 104×42 мм. Звуковые свойства почек в норме.

Заключение: жировая дистрофия печени. Хронический панкреатит.

УЗДГ 12.09: СПИ=0,37 (норма), БСАП=0,74 (норма), ПВГД=6,5 (норма). Заключение: Показатели кровотока по сосудам портальной системы в пределах нормы.

ЭГДС 03.09: Патологических изменений в пищеводе, желудке и луковице двенадцатиперстной кишки не выявлено.

ЭКГ 29.08: Нормальное положение электрической оси сердца. Ритм синусовый, правильный, ЧСС – 74.

Пункционная биопсия печени 11.09.07 г.: Материал фрагментирован. Обнаружена выраженная жировая дистрофия гепатоцитов с преимущественным увеличением уровня средних и мелкокапельных частиц слабоокрашенных липидов, внутриклеточный холестаз, вакуольная дистрофия гепатоцитов. Портальные тракты расширены, умеренно фиброзированы и инфильтрированы лимфоцитами, макрофагами и эозинофилами. Дистрофия эпителия мелких желчных протоков, между клетками эпителия встречаются лимфоциты. Целостность пограничной пластинки нарушена, воспалительный инфильтрат проникает вглубь дольки. Внутридольковые смешанноклеточные инфильтраты. Участки внутриклеточного холестаза в желчных капиллярах. Анизокариоз ядер, встречаются двуядерные гепатоциты. Умеренно выраженная гиперплазия клеток ретикулоэндотелиальной системы. Выявляются пенистые клетки. В синусоидах найдены деформированные темноокрашенные эритроциты, дистрофия холангиоцитов печеночных протоков.

Патогистологическое заключение: Хронический портальный, перипортальный и лобулярный гепатит умеренной степени активности.

Лабораторные данные
Исследуемый компонент	Поступле- ние	Выписка	Норма	Исследуемый компонент	Поступле ние	Выписка	Норма
Гемоглобин	14,7	15,0	12-16 г/л	Билирубин	55,8	19,78	3,4-21,0 мкмоль/л
Эритроциты	4,31	4,48	3,9-4,7×106/мм3	прямой	26	6,9	0-3,4 мкмоль/л
Гематокрит	41,6	43,3	35-47%	Щ.ф.	200	131	30-120 Е/л
Лейкоциты	5.7	7.3	4-9×103/мм3	АсТ	139,0	119	5-35 Е/л
эозинофилы	2	2	0,5-5%	АлТ	184,4	147	5-45 Е/л
п/я	1	2	1-6%	ГГТП	100,0	99,5	7-42 Е/л VW
с/я	52	56	47-72%	Холестерин	5,8		1,4-5,2 ммоль/л
Лимфоциты	38	34	19-37%	Общий белок	78,4	79,0	66-87 г/л
Моноциты	7	6	3-11%	альбумины
Тромбоциты	291	236	150-400×103/мм3
СОЭ	Ц6_	15	3-20 мм/ч	Мочевина	4,5	4,3	1,7-8,3 ммоль/л
Сахар	4,9		4,1-5,9 ммоль/л
Протромбин	88		80-105%
				Железо	43	45	12,5-32,2 мкмоль/л
	АЧТВ 29 Фибриноген 2,9	ОЖСС	67,8	66,0	44,8-71,6 мкмоль/л
Группа крови	B(III)Rh положи Келл – отрицат, т	НЖСС	24,75	23,0	27,8-53,7 мкмоль/л

Общий анализ мочи: уд. вес – 1016, белок – следы, сахар – нет, лейкоциты – 2-3-4 в поле зрения.

Иммунологическое обследование: HBsAg – отр, anti-HCV – обнаружены. RW, ВИЧ – не обнаружены. IgM – 230 мг % (норма 50-130), IgG – 1350 мг % (500-1300), IgA – 220 мг % (90-230).

Обследование 17.09.07 г. РНК HCV – обнаружено. РНК HGV – обнаружено.

Данные биохимического и иммунологического исследования (уровень щелочной фосфатазы составляет 200 Е/л, гаммаглутамилтранспептидазы – 100,0 Е/л, иммуноглобулина IgM – 230 мг %) и морфологического исследования позволяют диагностировать внутрипеченочный холестаз при поливирусном гепатите.

Проведенное лечение внутрипеченочного холестаза подтвердило правильность поставленного диагноза. Больной выписан в удовлетворительном состоянии.

Согласно способу диагностики внутрипеченочного холестаза при поливирусных гепатитах проведена диагностика 132 больных. Подтверждено достижение цели изобретения – повышение точности диагностики внутрипеченочного холестаза при поливирусных гепатитах.

Формула изобретения

Способ диагностики внутрипеченочного холестаза при поливирусных гепатитах, включающей биохимическое и иммунологическое исследование, отличающийся тем, что дополнительно проводят морфологическое исследование и при повышении уровня щелочной фосфатазы до 200 Е/л и более, гаммаглутамилтранспептидазы до 100 Е/л и более, уровня иммуноглобулина IgM до 215 мг% и выше, при выраженной жировой дистрофии гепатоцитов с преимущественным увеличением уровня средних и мелкокапельных частиц слабоокрашенных липидов с внутриклеточным холестазом, вакуольной дистрофии гепатоцитов и наличии пенистых клеток и деформированных темноокрашенных эритроцитов в синусоидах, дистрофии холангиоцитов диагностируют внутрипеченочный холестаз.