Патент на изобретение №2391915

(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РИСКА РАЗВИТИЯ ДЕСТРУКТИВНЫХ ИЗМЕНЕНИЙ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ГАСТРОДУОДЕНАЛЬНОЙ ЗОНЫ

(57) Реферат:

Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии и клинической иммунологии, и может быть использовано для прогнозирования риска развития деструктивных изменений слизистой оболочки гастродуоденальной зоны. Способ предусматривает определение абсолютного количества позитивных по CD80-рецепторам нейтрофильных гранулоцитов периферической крови, и при условии значения этого показателя выше 999 клеток/мл устанавливают наличие риска развития деструктивных изменений слизистой оболочки гастродуоденальной зоны. Данный способ может быть использован для скрининговой оценки выраженности и характера воспаления в слизистой оболочке при Helicobacter pylori-ассоциированных воспалительных заболеваниях гастродуоденальной зоны, позволяя быстро, без больших материальных и технических затрат с высокой вероятностью (75%) выявить среди пациентов с Н. pylori-ассоциированными воспалительными заболеваниями гастродуоденальной зоны группу риска по развитию деструктивного воспаления (эрозии, язвы) в слизистой оболочке. 1 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии и клинической иммунологии, и может быть использовано для прогнозирования риска развития деструктивных изменений слизистой оболочки гастродуоденальной зоны.

С морфологической точки зрения, а также по характеру противоинфекционной иммунобиологической защиты организма нозологические формы воспалительных заболеваний гастродуоденальной зоны, таких как гастриты, дуодениты, гастродуодениты, язвенная болезнь желудка и/или двенадцатиперстной кишки (ДПК), могут быть объединены в зависимости от степени поражения слизистой оболочки, когда определяется либо поверхностное (катаральное), либо деструктивное (эрозивно-язвенное) воспаление [Аруин Л.И., Капуллер Л.Л., Исаков В.А. Морфологическая диагностика болезней желудка и кишечника. – М., 1998; Исаков В.А., Домарадский И.В. Хеликобактериоз. – М., 2003].

⁺vacA⁺6. – С.364-367].

Аналогом предлагаемого способа является использование для оценки выраженности и характера воспалительного процесса в слизистой оболочке желудка и ДПК эзофагогастродуоденоскопии (ЭФГДС) с биопсией [Назаров В.Е. и др. Эндоскопия пищеварительного тракта. – М: Триада-Фарм, 2002. – 176 с.]. Этот метод позволяет определить также локализацию, размер и выраженность очага воспаления и является единственным при установке нозологической формы воспалительного заболевания гастродуоденальной зоны.

Однако существуют медицинские ограничения в применении данного метода. Проведение ЭФГДС затруднено у пациентов с хроническими заболеваниями дыхательной, сердечно-сосудистой системы у пожилых пациентов и у детей. Кроме того, ЭФГДС – инвазивная процедура, – и значит, существует риск инфицирования (ВИЧ, гепатит, Hp) при ее проведении.

Однако основное предназначение Гастропанели – это выявление степени и локализации атрофии слизистой оболочки желудка, установить же наличие уже имеющегося деструктивного воспалительного процесса (язвы, эрозии) в слизистой оболочке гастродуоденальной зоны с помощью данной панели затруднительно. Кроме того, этот метод требует чрезвычайно дорогостоящих импортных реактивов, что делает практически невозможным его использование в качестве скрининга во многих лечебных учреждениях.

Задачей настоящего изобретения является расширение арсенала способов, используемых для скрининговой оценки выраженности воспаления и прогнозирования развития деструктивных изменений в слизистой оболочке при Hp-ассоциированных воспалительных заболеваниях гастродуоденальной зоны.

Сущностью изобретения является определение абсолютного количества позитивных по CD80-рецепторам нейтрофильных гранулоцитов (НГ) периферической крови, и при условии значения этого показателя выше 999 клеток/мл устанавливают наличие риска развития деструктивных изменений слизистой оболочки гастродуоденальной зоны.

Техническим результатом изобретения является разработка скринингового, малоинвазивного, не требующего больших материальных затрат способа выявления пациентов с высокой степенью риска (75%) развития деструктивного воспаления (эрозии, язвы) в слизистой оболочке при Нр-ассоциированных воспалительных заболеваниях гастродуоденальной зоны.

Способ апробирован на 31 пациенте с воспалительными заболеваниями гастродуоденальной зоны обоего пола в возрасте от 21 до 59 лет. В группу с поверхностным воспалением вошли 20 пациентов с катаральным гастритом. В группу с деструктивными воспалительными изменениями слизистой оболочки гастродуоденальной области вошли 11 пациентов с хроническим эрозивным гастритом, язвенной болезнью желудка и/или двенадцатиперстной кишки в стадии обострения заболевания.

Диагноз определяли на основании клинических данных, ЭФГДС и гистологического исследования. ЭФГДС проводили в утренние часы, натощак, со взятием биоптатов из зоны поражения слизистой оболочки. При морфологическом исследовании гистологических препаратов были выявлены высокие показатели лейкоцитарной инфильтрации (полиморфно-ядерными нейтрофилами и лимфоидными клетками). Степень обсемененности слизистой оболочки Hp оценивали полуколичественно по 4-х балльной шкале: отсутствие бактерий обозначали «-», до 20 микроорганизмов в поле зрения – «+», 20-50 – «2+», более 50 – «3+». Наличие Hp в слизистой желудка подтверждалось в 70,9% случаев, и составило в среднем 2,4±0,09 балла.

Кровь для исследования брали при первичном обращении до начала традиционного лечения. В качестве сравнения использовали показатели фенотипических характеристик НГ, полученные в группе здоровых добровольцев (n=17).

96/11. – Краснодар, 1996. – 22 с.] с использованием соответствующих моноклональных антител: анти-СD80 (ООО “Сорбент”, Москва). Для каждого образца крови производят подсчет общего количества лейкоцитов и определение морфологического состава крови по общепринятым методикам с целью дальнейшего определения абсолютного количества CD80⁺-НГ.

Определение количества CD80⁺-HГ у здоровых добровольцев позволило нам установить интервал нормы (Табл.1).

Анализ результатов, полученных при оценке аналогичных показателей НГ у пациентов с воспалительными заболеваниями гастродуоденальной зоны, выявил усиление экспрессии молекулы CD80, независимо от отсутствия или наличия деструктивных процессов в слизистой. Однако выраженность воспалительного процесса при эрозивных и язвенных поражениях слизистой оболочки, его деструктивный характер, обуславливает достоверное увеличение абсолютного количества НГ, экспрессирующих CD80-рецепторы в 3,2 по сравнению с контролем, превышая в 75% случаев верхние границы нормальных значений и в 1,8 раз (р<0,05), превышая аналогичные показатели в группе пациентов с поверхностным воспалением. При поверхностном гастрите этот показатель в большинстве случаев находится в пределах нормальных значений и достоверно не отличается от контроля (Табл. 1).

Таблица 1.
Характеристика рецепторной активности нейтрофильных гранулоцитов при воспалительных заболеваниях гастродуодельной области
Показатель	Контроль (n=17) (M±m)	Интервал нормы (5-й и 95-й процентили)	Поверхностное воспаление (n=20)	Деструктивное воспаление (n=11)
CD80-НГабс, кл/мл	413,3±58,5	211,7-998,9	745,4±92,7	1337±299,4 1,2)
Отклонение от нормы (в %)			15	75
Примечание: 1) – р<0,05 по сравнению с группой контроля; 2) – р<0,05 по сравнению с группой ПВ (критерий Стьюдента с поправкой Бонферрони).

Таким образом, проведенное исследование позволило выявить различия в характере и уровне реагирования поверхностной мембраны НГ на патологический процесс в зависимости от степени выраженности воспалительной реакции, наличия повреждений слизистой оболочки (язвы и эрозии). При значительном увеличении абсолютного количества CD80⁺-НГ с превышением верхней границы нормальных значений (свыше 999 клеток/мл) можно прогнозировать высокую степень риска развития деструктивного воспаления (эрозии, язвы) в слизистой оболочке гастродуоденальной зоны.

⁺⁺-НГ при деструктивном воспалении может быть механизмом негативной ауторегуляции через супрессию Th1-иммунного ответа для ограничения иммунопатологических повреждений.

Пример. Больная Г., 31 лет, история болезни 347, находилась на обследовании в Российском центре функциональной хирургической гастроэнтерологии (РЦФХГ) 21.03.07 с жалобами на боли в эпигастрии, преимущественно натощаковые, эпизодическую тошноту. После проведенного обследования выставлен диагноз: Грыжа пищеводного отверстия диафрагмы. Нр-ассоциированный гастрит.

УЗИ от 21.03.07. Ультразвуковые признаки незначительных диффузных изменений поджелудочной железы, колоптоза.

ЭФГДС от 21.03.07. Признаки грыжи пищеводного отверстия диафрагмы, катаральный гастрит, бульбит.

Цитологическое исследование мазка-отпечатка слизистой оболочки желудка от 21.03.07: Hp ++; слизь ++++.

Иммунологическое исследование НГ от 21.03.07: количество CD80⁺-НГ – 682 кл/мл. Определен низкий риск развития деструктивных изменений слизистой оболочки, подтвержденный данными ЭФГДС.

Пример. Больной Ш., 24 лет, история болезни 1681, находился на обследовании в РЦФХГ 12.04.07 с жалобами на боли в эпигастрии натощак и после еды, изжогу. После проведенного обследования выставлен диагноз: Гастро-эзофагеальная рефлюксная болезнь. Язвенная болезнь двенадцатиперстной кишки. Рубцовая деформация луковицы двенадцатиперстной кишки в стадии рубца. Эрозивный Hp-ассоциированный гастрит.

УЗИ от 12.04.07. Ультразвуковые признаки диффузных изменений поджелудочной железы, паренхиматозной кисты слева.

ЭФГДС от 12.04.07. Рубцовая деформация луковицы двенадцатиперстной кишки, бульбит. Эрозивный гастрит. Недостаточность кардии. Признаки грыжи пищеводного отверстия диафрагмы.

Цитологическое исследование мазка-отпечатка СОЖ от 12.04.07: Hp ++; слизь +++, клетки покровно-ямочного эпителия без признаков атипии.

Иммунологическое исследование НГ от 21.03.07: количество CD80⁺-НГ – 4199 кл/мл. Определен высокий риск развития деструктивных изменений слизистой оболочки (язвы, эрозии), подтвержденный данными ЭФГДС.

Формула изобретения

Способ прогнозирования риска развития деструктивных изменений слизистой оболочки гастродуоденальной зоны, включающий определение клинических показателей и иммунологическое исследование факторов крови, отличающийся тем, что определяют абсолютное количество позитивных по CD80-рецепторам нейтрофильных гранулоцитов периферической крови, и при условии значения этого показателя выше 999 клеток/мл устанавливают наличие риска развития деструктивных изменений.