Патент на изобретение №2391666
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РИСКА ИЗЪЯЗВЛЕНИЯ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ЖЕЛУДКА
(57) Реферат:
Изобретение относится к области медицины, в частности к экспериментальной фармакологии. Для прогнозирования риска изъязвления слизистой оболочки желудка оценивают уровень осмотической стойкости эритроцитов (ОСЭ). При значениях ОСЭ в 1-м разведении 17,36±2,36%, 2-м – 38,739±3,6%, 3-м – 69,58±4,30%, 4-м – 84,13±2,0%, 5-м – 91,88±0,89%, 6-м – 99,08±0,55%, 7-м – 100±0% прогнозируют высокий риск изъязвления слизистой. Способ упрощает и расширяет диагностические возможности по определению риска изъязвления тканей желудка. 7 табл.
Область применения: медицина, экспериментальная фармакология. Существуют различные методы прогнозирования и контроля над процессами изъязвления желудочно-кишечного тракта. К ним относятся в основном визуальные методы исследования, такие как гастроскопия, контрастная рентгенография, фиброгастродуоденоскопия, в процессе выполнения которых измеряется диаметр эрозивно-язвенного дефекта. Однако эти методы имеют существенные ограничения в применении, которые обусловлены сопутствующей патологией и тяжестью состояния пациента [1]. В последние годы разрабатываются клинико-биохимические методы диагностики и прогнозирования изъязвлений слизистой желудочно-кишечного тракта. Среди них самые известные: определение перекисного окисления липидов и антиоксидантной активности. Для оценки системы перекисного окисления липидов (ПОЛ) и антиоксидантной защиты организма необходимо определять ряд показателей, таких как малоновый диальдегид (МДА), диеновые конъюгаты, церулоплазмин, трансферрин, супероксиддисмутаза (СОД), каталаза [3]. Нами было определено содержание каталазы, диеновых конъюгатов, МДА, СОД в крови из подключичной вены и тканях желудка у шестнадцати крыс линии Вистар массой 180-200 г в исходном состоянии и при экспериментальной язве желудка через 7 суток с момента моделирования ацетатной язвы (Окабэ С., 1971) (табл.1).
Как видно из таблицы 1, достоверные различия между исходным состоянием и при экспериментальной язве желудка через 7 суток в эритроцитах из подключичной вены статистически достоверны при определении диеновых конъюгатов, МДА, СОД. Определение активности каталазы не выявляет достоверных различий между исходным состоянием и при экспериментальной язве желудка через 7 суток. В тканях желудка достоверные различия наблюдаются при определении диеновых конъюгатов, МДА, каталазы. При определении СОД достоверных различий между исходным состоянием и при экспериментальной язве желудка через 7 суток нет. Эти методы чрезвычайно трудоемки, реактивы дорогостоящи и токсичны. Для оценки интенсивности перекисного окисления и активности антиоксидантной системы этими способами потребуется целый рабочий день врача-лаборанта. В этой связи в практическом здравоохранении эти методы используются редко. Интенсивность ПОЛ и активность антиоксидантной системы влияет на состояние клеточной мембраны. В литературе предложен интегративный тест определения проницаемости эритроцитарных мембран, отражающий уменьшение антиокислительной защиты организма, активацию ПОЛ, липаз, фосфолипазы и др. [2, 4]. Целью предложенного изобретения является расширение и упрощение диагностических возможностей по определению риска изъязвления тканей желудка. Эксперименты выполнены на 21 крысах линии Вистар обоего пола весом от 147 до 235 г под нембуталовым наркозом (30 мг/кг нембутала). Животных содержали в условиях вивария при постоянной температуре и влажности воздуха. Кровь для исследования забирали из подключичной вены, в которой определяли осмотическую стойкость эритроцитов (ОСЭ). В исходном состоянии моделировалась ацетатная язва желудка по методу Окабэ С. (1971) [5]. По состоянию исходного уровня ОСЭ животные разделены на две группы. У 9 крыс (группа 1) ОСЭ была высокая, у 13 крыс ОСЭ низкая (табл.2).
Сравнительный анализ ОСЭ первой и второй группы выявил значительное снижение осмотической стойкости у крыс второй группы. Через 7 суток с момента моделирования язвы проводился забор крови из подключичной вены. Процесс язвообразования оценивали по площади язвенного дефекта. В крови из подключичной вены определяли осмотическую стойкость эритроцитов (ОСЭ) [2]. Через 7 суток с момента моделирования язвы сохраняется разделение крыс на две группы (табл.3).
Сравнительный анализ результатов ОСЭ, полученных через 7 суток с момента моделирования ацетатной язвы желудка у крыс 1-й и 2-й групп, показывает, что ОСЭ в 1 группе в разведениях 1, 2, 3, 5 значительно выше, чем в аналогичных разведениях во 2 группе. У крыс 1 группы, с высокой осмотической стойкостью, площадь эрозивно-язвенного повреждения составляла от 0 до 5 мм2, во 2 группе – от 7 до 19,6 мм2. Примеры конкретного выполнения экспериментов из подопытной серии Опыт 1 Половозрелого самца массой 190 г, находящегося на стандартной диете, наркотизировали нембуталом (30 мг/кг). В исходном состоянии кровь для исследования получали из подключичной вены объемом 2 мл. Определяли ОСЭ. После получения крови из подключичной вены была смоделирована ацетатная язва по Окабэ С. (1971) путем нанесения на серозную оболочку желудка 70% уксусной кислоты на 30 с, после чего уксусная кислота удалялась фильтровальной бумагой. Проводили послойное ушивание раны. В течение 6 последующих суток крыса имела свободный доступ к воде и пище. За сутки до окончания эксперимента животное находилось в состоянии пищевой депривации при свободном доступе к воде. Через 7 суток с момента моделирования язвы под нембуталовым наркозом была получена кровь из подключичной вены, извлечен желудок. Желудок вскрывался по большой кривизне, промывался холодной водой в течение 1 мин. Визуально проводилось измерение диагоналей зоны повреждения с последующим вычислением площади дефекта. В данном эксперименте на малой кривизне в антральной зоне обнаружен язвенный дефект площадью 1,77 мм2. ОСЭ определяли в первые 2 часа после получения крови. Полученные результаты представлены в таблице 4.
Высокие показатели ОСЭ позволяют отнести животное к 1-й группе. Опыт 2 Половозрелого самца массой 190 г, находящегося на стандартной диете наркотизировали нембуталом (30 мг/кг). В исходном состоянии кровь для исследования получали из подключичной вены объемом 2 мл. Определяли ОСЭ. После получения крови из подключичной вены была смоделирована ацетатная язва по Окабэ С. (1971) путем нанесения на серозную оболочку желудка 70% уксусной кислоты на 30 с, после чего уксусная кислота удалялась фильтровальной бумагой. Проводили послойное ушивание раны. В течение 6 последующих суток крыса имела свободный доступ к воде и пище. За сутки до окончания эксперимента животное находилось в состоянии пищевой депривации при свободном доступе к воде. Через 7 суток с момента моделирования язвы под нембуталовым наркозом была получена кровь из подключичной вены, извлечен желудок. Желудок вскрывался по большой кривизне, промывался холодной водой в течение 1 мин. Визуально проводилось измерение диагоналей зоны повреждения с последующим вычислением площади дефекта. В данном эксперименте на малой кривизне в антральной зоне обнаружен язвенный дефект площадью 7,065 мм2. ОСЭ определяли в первые 2 часа после получения крови. Полученные результаты представлены в таблице 5.
Низкие показатели позволяют отнести животное ко 2-й группе. Выявленные закономерности соответствия характера ОСЭ и степени предрасположенности к изъязвлению отмечались у 19 крыс из 21. У двух крыс эта закономерность не прослеживалась. 1) Половозрелый самец, масса животного 147 г (табл.6)
Высокий уровень ОСЭ позволяет отнести животное к 1-й группе, но площадь сформировавшегося у него язвенного дефекта достаточно большая и составляет 9,6 мм2. 2) Половозрелый самец, масса животного 150 г (табл.7)
Низкий уровень ОСЭ позволяет отнести животное ко 2-й группе, но площадь язвенного дефекта составляет 0 мм2 (регенерация). Таким образом, у крыс с более высокой ОСЭ (1-я группа) резистентность тканей желудка к действию повреждающих факторов большая, риск изъязвления низкий, о чем свидетельствует малая площадь эрозивно-язвенного дефекта (от 0 до 5 мм2). И наоборот, у крыс с низкой ОСЭ (2-я группа), резистентность тканей снижается, подтверждением чего служит большая площадь эрозивно-язвенного дефекта (от 7 до 19,6 мм2). Специфичность метода 90,5%. Литература 1) Неотложная гастроэнтерология: Руководство для врачей. / Крылов А.А., Земляной А.Г., Михайлович В.А., Иванов А.И. – Л.: Медицина, 1988. – 264 с.: ил. 2) Камышников В.С. Справочник по клинико-биохимической лабораторной диагностике: в 2 т. Т.2. – Ми.: Беларусь, 2000, с.195-211. 3) Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. – М.: Наука, 1972, 252 с. 4) Зайчик А.Ш. Чурилов Л.П. Основы общей патологии: Учеб. п. для мед. вузов: ч.1. – СПб. 1999.
Формула изобретения
Способ прогнозирования риска изъязвления слизистой оболочки желудка, заключающийся в оценке уровня осмотической стойкости эритроцитов, при значениях которого в 1-м разведении 17,36±2,36%, 2-м – 38,739±3,6%, 3-м – 69,58±4,30%, 4-м – 84,13±2,0%, 5-м – 91,88±0,89%, 6-м – 99,08±0,55%, 7-м – 100±0% определяется высокий риск изъязвления слизистой.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
6, с.12-15. ЕМУЗОВА М.С. Лечение, прогнозирование и профилактика острых изъязвлений желудка и двенадцатиперстной кишки убольных с хронической почечной недостаточностью. Автореф. дис. на соиск. учен. степ. канд. мед. наук, 2003, 21 С. SUTHERLAND L.R. et al. A simple, non-invasive marker of gastric damage: sucrose permeability, Lancet. 1994 Apr 23; 343(8904): 998-1000, (реферат), [он-лайн], [найдено 07.09.2009], найдено из базы данных PubMed.