Патент на изобретение №2390019

(54) СПОСОБ ОЦЕНКИ ГИПОКСИИ

(57) Реферат:

Предложен способ оценки гипоксии у пациентов при заболеваниях, которые сопровождаются гипоксией, например, при сердечной недостаточности. Способ основан на оценке клеточной реакции органа иммунитета небных миндалин: степени пролиферации эпителия, количества участков пролиферации и уменьшении количества лимфоцитов. Клеточный состав получают с помощью соскоба с небных миндалин, делают мазок и окрашивают по Гимзе или Романовскому-Гимзе с последующим контролем с помощью светового микроскопа. Реакция клеток зависит от степени гипоксии при сердечной недостаточности, чем тяжелее гипоксия, тем существеннее степень изменения клеточных реакций небных миндалин. Пролиферация эпителия и уменьшение количества лимфоцитов небных миндалин не выявляются у здоровых людей, и существенно изменяются у пациентов, прошедших курс лечения по поводу сердечной недостаточности I и II A стадии. Пролиферация эпителия небных миндалин и указанные количественные показатели могут применяться как маркер качественного лечения заболевания, индуцировавшего гипоксию. 1 табл.

Изобретение относиться к области медицины, например к кардиологии, онкологии.

Для изучения сердечной недостаточности у людей применяются тесты с нагрузкой (велэргометрия): Niebauer J., Dark A.L., Webb-Peploe K.M., Boger R., Coats A.J. Home-based exercise training modulates pro-oxidant substrates in patent with chronic heart failure. / Eur J. Heart Fail. 2005; 7 (2): 183-188; Комаров Ф.И., Ольбинский Л.И. НАЧАЛЬНАЯ СТАДИЯ СЕРДЕЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ. – М.: Медицина, 1978, стр.67). Для этой пробы применяется велосипедный эргометр с прогрессивным непрерывным или поэтапным увеличением дозированных нагрузок. Рекомендуются следующие параметры для оценки максимальной нагрузки: 1) максимальная чистота пульса, 2) кислородный пульс, увеличиваясь параллельно увеличению мощности нагрузки, образует плато на высоте максимальной нагрузки. Перечисленные показатели основываются на динамике частоты пульс, потребления кислорода и состояния органов дыхания (выраженности гипоксии). Существенные недостатки этого метода являются 1) низкая производительность, 2) трудоемкость, 3) высокие материальные затраты. Их причины следующие: 1) у больных с поражением сердца максимальная нагрузка невыполнима (стр.69), т.к. низкий коронарный резерв у больных с ишемической болезнью сердца заставляет прекращать работу уже на первой ступени нагрузки (стр.72), 2) проба с нагрузкой предусматривает определенный медицинский риск и поэтому ее должен проводить специально подготовленный персонал в специально оборудованных кабинетах (стр.75), 3) эти тесты многоэтапные, занимают много времени, 3) также не учитываются изменения иммунной системы. Этот метод считается прототипом.

Конечный технический результат предлагаемого решения (СОГ) заключается: 1. Повысить производительность как минимум 10 раз за счет снижения материальных затрат (для СОГ не требуется специально оснащенной комнаты и дорогостоящего оборудования, например, как велэргометра, монитора и др.) и расширения показаний к СОГ (с инфарктами и лежачими пациентами СОГ показаны). 2. Повысить экономичность в 10 раз за счет не дорогостоящего оборудования и сокращения времени для проведения СОГ. 3) Повысить достоверность на 3 порядка за счет исследования клеток органа иммунитета – небных миндалин, в которых при сердечной недостаточности обнаруживается и определяется степень пролиферации эпителия небных миндалин и снижения числа лимфоцитов.

Способ оценки гипоксии (СОГ) выполняется в положении пациента сидя или лежа, в зависимости от его состояния. Пациент открывает рот и производится соскоб с небных миндалин под визуальным контролем с помощью, например, кюретки стоматологической. Клеточный материал переносится на предметное стекло и окрашивается по Романовскому-Гимзе или Гимзе. Клетки изучают с помощью светового микроскопа: 1) обнаруживают пролиферацию эпителия, 2) определяют степень пролиферации эпителия (учитывают количество этих участков и морфологические особенности клеток в них и 3) существенное уменьшение количества лимфоцитов. При тяжелой степени гипоксии пролиферация выраженная, количество участков (островков) пролиферации увеличивается, в них появляются клетки с признаками дискариоза и атипии. Такой реакции не выявляется у людей практически здоровых и у пациентов, которые успешно прошли курс лечения по поводу, например, I и II А стадии сердечной недостаточности.

Для достижения конечного технического результата решались следующие задачи. При этом оценка гипоксии осуществляется, с помощью изучения степени реакции клеток небных миндалин: 1) реакция эпителия небных миндалин в виде появления участков (островков) пролиферации, 2) изменение количества участков пролиферации и морфологии пролиферирующих клеток, 3) существенное снижение количества лимфоцитов. При этом также учитывалось следующее. Пролиферация – размножение клеток. Образование новых клеток на базе уже существующих клеток называется также и гиперплазией (А.И.Струков, В.В.Серов. Патологическая анатомия. – М.: Медицина, 1979, стр.99). Акцент на значимость этого критерия (показателя) также делается также и в книге Н.Н.Шиллер-Волковой «Цитологической диагностики злокачественных новообразований». – М.: Медицина, 1964, на стр.105: «Основываясь на изучении этих изменений с учетом расположения клеток в препарате, можно правильно определить степень выраженности пролиферации и даже отметить ее биологическую направленность». Этот тезис фундаментальный и потому не потерял своего значения в современных условиях. Там же: «для клинициста может представлять определенную ценность и характеристика пролиферативных процессов»; приводятся виды пролиферации эпителия: а) без атипии клеток; б) с атипией отдельных клеток или ядер. Дискариоз – морфологические описательные и связаны с появлением определенных морфологических признаков в измененной клетке: 1) непропорциональное увеличение ядра, 2) неправильная форма и контуры ядра, 3) гиперхромия, 4) неравномерная конденсация хроматина и утолщение мембраны, 5) аномалии в числе, размере и форме ядрышек, 6) многоядерность в сочетании с любым из перечисленных признаков.

Из приведенных в таблице данных видно, что количественные показания представленных параметров в группах 2 и 3 достоверно отличаются от количественных показаний параметров, приведенных в группах 1 и 4, как достоверно отличаются количественные показатели приведенных параметров в группе 2 в сравнении с группами 1, 3 и 4, соответственно тяжести процесса.

СОГ выполняется посредством микроскопического анализа клеточного материала небных миндалин, который получают посредством соскоба с небных миндалин с помощью кюретки, при этом пациент находится в положении лежа или сидя, рот открыт, язык высовывается из полости рта. Пролиферация эпителия (учитываются также количество участков пролиферации, их морфологические особенности и уменьшение количества лимфоцитов) выявляется у пациентов, страдающих сердечной недостаточностью. Степень гипоксии связана со степенью тяжести сердечной недостаточности. В этой связи изменяются соответственно и степень пролиферации клеток эпителия небных миндалин (изменение количества участков пролиферации, изменение морфологии клеток в этих участках, появление признаков дискариоза и атипии) и существенное уменьшение количества лимфоцитов (от 80±0,5% в контроле, до 18±0,15% при ХСН II-III стадии). Эти реакции зависят от степени тяжести гипоксии и являются обратимыми при эффективном лечении сердечной недостаточности.

Существенные преимущества СОГ.

1. СОГ противопоказаний не имеет. – Прототип не всегда до конца выполняется у пациентов с ишемической болезнью сердца, а больным стенокардией и низким болевым порогом нагрузки противопоказан. 3. СОГ проводится без осложнений. – Прототип, наоборот, всегда предполагает осложнения и врач всегда должен быть готов к ним и специально обучен. 4. СОГ учитывает изменения органа иммунитета, которые должны корректироваться. – Прототип не учитывает изменений иммунной системы в виде клеточной реакции небных миндалин. 5. СОГ недорогой. – Прототип использует дорогостоящую аппаратуру как велэргометр др. 6. СОГ выполняется без нагрузки на миокард. – Прототип выполняется с нагрузкой на миокард. 7. СОГ позволяет выявлять начальную стадию сердечной недостаточности без дополнительных нагрузок на сердце, не надо крутить педали. – Прототип выявляет начальную стадию сердечной недостаточности только при дополнительных нагрузках на сердце, необходимо крутить педали велэргометра.

Существенные отличия СОГ от прототипа.

1. В СОГ производится соскоб. – В прототипе – соскоб не производится. 2. СОГ не имеет противопоказаний. Прототип противопоказан у пациентов с инфарктом миокарда и тяжелой степенью сердечной недостаточности. 3. В СОГ анализируется клеточный состав небных миндалин. – В прототипе – электрокардиограмма. 4. В СОГ применяется кюретка, микроскоп, предметное стекло, окраска по Гимзе. В прототипе – велэргометр, монитор. 5. Б СОГ учитывается реакция гиперплазии эпителия и изменения количества лимфоцитов. – В прототипе – изменения кардиограммы, или величина потребления кислорода. Эти параметры зависят также от уровня гипоксии. 6. В СОГ пациент открывает рот.- В прототипе – крутит педали велэргометра. 7. В СОГ учитывается состояние клеток органа иммунитета – небных миндалин. – В прототипе учитываются параметры электрических сигналов миокарда. 8. СОГ проводится в условиях стационара, амбулаторий и у постели больного на дому в любом его положении. В прототипе только в специально оборудованных помещениях, в положении сидя, вращая педали. 9. СОГ позволяет выявлять начальную стадию сердечной недостаточности без дополнительных нагрузок на сердце. – Порототип выявляет начальную стадию сердечной недостаточности только при дополнительных нагрузках на сердце. 10. СОГ выявляет участки пролиферации клеток небных миндалин. – В прототипе этого приема нет. 11. В СОГ подсчитывается количество участков пролиферации, учитываются морфологические особенности клеток в них. – В прототипе этого приема нет. 12. В СОГ подсчитывают количество лимфоцитов небных миндалин. – В прототипе этого приема нет.

Формула изобретения

Способ оценки тяжести хронической сердечной недостаточности (ХСН), отличающийся тем, что выявляют и оценивают диаметр участков пролиферирующих клеток и относительное количество лимфоцитов в соскобе с небных миндалин, при этом величина диаметра участков пролиферации до (9±0,27) мкм и количество лимфоцитов (40±0,3)% соответствуют ХСН – I-IIA стадии, диаметр участков пролиферации (20±0,8) мкм и количество лимфоцитов (18±0,15)% соответствуют ХСН 2, 3 стадии, отсутствие островков пролиферации и количество лимфоцитов (75±0,6)% соответствуют контрольным величинам практически здоровых людей и после проведенной успешной терапии ХСН – I-IIA стадии.