Патент на изобретение №2384050

Published by on




РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ



ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА
ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ,
ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ
(19) RU (11) 2384050 (13) C1
(51) МПК

A01H4/00 (2006.01)
A01G7/00 (2006.01)

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ

Статус: по данным на 28.09.2010 – действует

(21), (22) Заявка: 2008148463/12, 08.12.2008

(24) Дата начала отсчета срока действия патента:

08.12.2008

(46) Опубликовано: 20.03.2010

(56) Список документов, цитированных в отчете о
поиске:
1, т.16, p.1-10.

Адрес для переписки:

430005, Республика Мордовия, г. Саранск, ул. Большевистская, 68, ГОУ ВПО “МГУ им. Н.П. Огарева”, отдел управления интеллектуальной собственностью

(72) Автор(ы):

Мокшин Евгений Владимирович (RU),
Лукаткин Александр Степанович (RU)

(73) Патентообладатель(и):

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования “Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарева” (RU)

(54) СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ ЛИЛИЙ IN VITRO

(57) Реферат:

Изобретение относится к области садоводства. В способе отделяют экспланты, обрабатывают их раствором препарата эпибрассинолид в концентрации 0,1 мг/л и времени экспозиции 1 ч, подвергают их стерилизации. Затем высаживают экспланты на агаризованную питательную среду Мурасиге-Скуга с содержанием регуляторов роста 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5 мг/л индолилуксусной кислоты. Затем отделяют микролуковицы от эксплантов и укореняют на питательной среде Мурасиге-Скуга с добавлением 10-11 моль/л тидиазурона и 0,5 мг/л -нафтилуксусной кислоты в темноте при температуре 14°С. Изобретение позволяет повысить выход размножаемого материала за счет увеличения количества образующихся микролуковиц при положительном влиянии оптимальных концентраций регуляторов роста. 5 табл.

Изобретение относится к области садоводства и может быть использовано для микроразмножения растений лилий in vitro.

2) в течение 10 минут, высаживали на среду Мурасиге и Скуга, дополненную сахарозой 20-60 г/л и регуляторами роста 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 1,5 мг/л -нафтилуксусной кислоты, и культивировали в световой комнате при температуре 25±1°С, 24-часовом освещении белыми люминесцентными лампами с интенсивностью света 3000 лк. Процесс ризогенеза индуцировали добавлением в питательную среду -нафтилуксусной кислоты в концентрации от 0,2 мг/л до 0,5 мг/л.

Недостатком данного способа является невысокий коэффициент размножения.

Технический результат заключается в повышении выхода размножаемого материала за счет увеличения количества образующихся микролуковиц при положительном влиянии оптимальных концентраций регуляторов роста.

Технический результат достигается тем, что в способе размножения лилий in vitro, включающем отделение эксплантов, стерилизацию, посадку на питательную среду Мурасиге-Скуга, отделение микролуковиц от эксплантов, их укоренение на питательной среде Мурасиге-Скуга, перед стерилизацией экспланты обрабатывают раствором препарата эпибрассинолид в концентрации 0,1 мг/л и времени экспозиции 1 ч, экспланты высаживают на агаризованную питательную среду Мурасиге-Скуга с содержанием регуляторов роста 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5 мг/л индолилуксусной кислоты, затем микролуковицы отделяют от эксплантов и укореняют на агаризованной питательной среде Мурасиге-Скуга с добавлением 10-11 моль/л тидиазурона и 0,5 мг/л -нафтилуксусной кислоты в темноте при температуре 14°С.

Способ осуществляют следующим образом.

Из луковицы лилии отделяют внутренние (сочные) чешуи, которые используют в качестве эксплантов, замачивают их в растворе препарата эпибрассинолид в концентрации 0,1 мг/л и времени экспозиции 1 ч. Длительность обработки и концентрация препарата эпибрассинолид подобраны на основании предварительных экспериментов (табл.1).

После этого чешуи стерилизуют и в стерильных условиях высаживают в пробирки на питательную среду Мурасиге-Скуга, содержащую 7,0 г/л агара, 60 г/л сахарозы и регуляторы роста – 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5 мг/л индолилуксусной кислоты. Состав среды, использованный при культивировании чешуи луковиц, является стандартным для микроразмножения растений в культуре in vitro, за исключением подобранных в предварительных опытах концентраций сахарозы (табл.2) и регуляторов роста (табл.3). Культивирование осуществляют при постоянном освещении люминесцентными лампами с интенсивностью около 3000 лк и при температуре 25°С (физические условия выращивания близки к оптимальным для культивировании эксплантов растений).

Таблица 2
Концентрация сахарозы, г/л Микролуковицы, штук/эксплант
10 1,6
20 1,8
30 2,4
40 2,5
50 2,6
60 2,9
70 2,7

При выращивании эксплантов на агаризованной питательной среде Мурасиге-Скуга с добавлением сочетания 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5 мг/л индолилуксусной кислоты в течение 4 недель культивирования образуется максимальное число микролуковиц – 8 штук/эксплант (табл.3).

В последующем микролуковицы отделяют от чешуй и пересаживают на питательную среду для укоренения. Укоренение проводят на агаризованной питательной среде Мурасиге-Скуга, дополненной 10-11 моль/л тидиазурона и 0,5 мг/л -нафтилуксусной кислоты в темноте при температуре 14°С. Эти условия были выбраны как наиболее способствующие укоренению пробирочных растений лилий (табл.4, 5). После укоренения размноженные растения переносят в почву и выращивают обычным способом.

Таблица 5
Длина светового дня, ч Процент укоренения
24 53,1±2,8
16 84,4±3,1
0 100±0,0
Температура, °С Процент укоренения
14 100±0,0
23 65,1±1,6

В результате использования предложенного способа повышается выход размножаемого материала (8 штук/эксплант) за счет увеличения количества образующихся микролуковиц при положительном влиянии предобработки чешуй лилий препаратом эпибрассинолид с последующим их культивированием на питательной среде в присутствии сочетания регуляторов роста 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5 мг/л индоуксусной кислоты. Культивирование микролуковиц на агаризованной питательной среде Мурасиге-Скуга, дополненной 10-11 моль/л тидиазурона и 0,5 мг/л -нафтилуксусной кислоты, в темноте при температуре 14°С приводит к 100% укоренению и высокой жизнеспособности растений – регенерантов при последующей высадке в почву.

Формула изобретения

Способ размножения лилий in vitro, включающий отделение эксплантов, стерилизацию, посадку на питательную среду Мурасиге-Скуга, отделение микролуковиц от эксплантов, их укоренение на питательной среде Мурасиге-Скуга, отличающийся тем, что перед стерилизацией экспланты обрабатывают раствором препарата эпибрассинолид в концентрации 0,1 мг/л и времени экспозиции 1 ч, экспланты высаживают на агаризованную питательную среду Мурасиге-Скуга с содержанием регуляторов роста 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5 мг/л индолилуксусной кислоты, затем микролуковицы отделяют от эксплантов и укореняют на агаризованной питательной среде Мурасиге-Скуга с добавлением 10-11 моль/л тидиазурона и 0,5 мг/л -нафтилуксусной кислоты в темноте при температуре 14°С.

Categories: BD_2384000-2384999