Патент на изобретение №2382076
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
(54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ МИКОБАКТЕРИЙ ТУБЕРКУЛЕЗА
(57) Реферат:
Изобретение относится к ветеринарной микробиологии. Сущность изобретения сводится к тому, что в состав среды Левенштейна-Йенсена дополнительно вводят в качестве стимулятора роста фитопрепарат – 10%-ный экстракт полыни в дозе 0,2-0,3 мл на объем среды следующего состава: 1000 мл яйца (16 целых и 6 желтков), 20 мл 2%-ного раствора малахитовой зелени, 30 г картофельной муки, 2,4 г одноосновного фосфорнокислого калия, 0,34 г сернокислой магнезии, 0,6 г лимоннокислой магнезии, 3,6 г аспарагина, 12 мл глицерина х.ч. и 600 мл воды дистиллированной. Экстракт полыни наслаивают на поверхность готовой среды. Использование изобретения позволит сократить сроки культивирования и повысить выделяемость культур микобактерий из биоматериалов на 8-10%. 2 табл.
Изобретение относится к ветеринарной микробиологии и может быть использовано для лабораторной диагностики туберкулеза. Известна плотная питательная среда Левенштейна-Йенсена, содержащая в своем составе яйца куриные, желтки яиц, картофельную муку, малахитовый зеленый, раствор минеральных солей, включающий глицерин двойной перегонки и аспарагин [1, 2]. Однако известная среда не позволяет выявить микобактерий с измененными морфологическими, культуральными свойствами и ослабленной жизнеспособностью. Задача изобретения. – сокращение сроков роста и повышение выделяемости микобактерий туберкулеза из биоматериалов животных. Это достигается путем добавления к среде Левенштейна-Йенсена в качестве стимулятора роста фитопрепарата 10% экстракта полыни в дозе 0,2-0,3 мл, при следующем соотношении компонентов.
Фитопрепарат представляет собой 10% стерильный водный экстракт, приготовленный из сухих растений, собранных во время цветения, относящихся к роду полыней – Artemisia, семейству астровых Asteraceae Dumort. Химический состав полыней изучен достаточно хорошо [3] и содержит широкий набор биологически активных соединений: каучук, фенолкарболовые кислоты и их производные, эфирное масло и др., которые в определенной дозе обладают стимулирующим действием на рост микроорганизмов. Пример 1 Было испытано влияние различных доз водного экстракта полыни на скорость роста музейных культур М. bovis шт.8, М. bovis шт.14. Для этого были приготовлены питательные среды при следующем соотношении компонентов:
Суспензии, приготовленные из музейных культур, в разведении 10-3 засевали по 0,2 мл на испытуемую питательную среду с фитопрепаратом (10% водный экстракт полыни) и контрольную (среда Левенштейна-Иенсена без фитопрепарата). Результаты исследований приведены в таблице 1, из которой следует, что добавление фитопрепарата в дозе 0,1 мл на пробирку не влияет на сроки роста культур М. bovis, в дозе 0,2-0,3 мл наблюдается рост единичных белых колоний на 4-5 дней раньше, чем на контрольной среде, в последующем на средах с фитопрепаратом отмечалось интенсивное накопление бакмассы.
Таким образом, предлагаемый фитопрепарат в дозе 0,2-0,3 мл способствует ускорению и интенсивности роста микобактерий в 2 раза по сравнению с контролем. Пример 2 Для изучения диагностических качеств испытуемой питательной среды исследовали 79 проб биоматериалов от крупного рогатого скота с туберкулезными поражениями и 25 проб без туберкулезных поражений из хозяйств неблагополучных по туберкулезу. После проведения предпосевной обработки биоматериала по методу Гона-Сумиоши суспензии высевали на среду Левенштейна-Йенсена в оригинальной прописи (контроль) и на испытуемые среды с фитопрепаратом по 0,2 мл и 0,3 мл на пробирку. Результаты исследований представлены в таблице 2.
Из таблицы видно, что из 79 проб с туберкулезными поражениями на контрольной среде Левенштейна-Йенсена выделены 51 культура на 25-28 сутки, что составило 64,5% от исследованных проб. При внесении фитопрепарата (10% водного экстракта полыни) в дозе 0,2 мл рост культур отмечали в 57 случаях (72,1%) и в более ранние сроки – на 18-19 сутки. При добавлении 0,3 мл также увеличивалось число выделенных культур – 58 (73,4%), а рост отмечался на 19-21 сутки. При посеве 25 проб биоматериалов без туберкулезных поражений на контрольных пробирках выделено 12 культур, что составило 48,0% от исследованных проб, а на средах с фитодобавкой в дозе 0,2 мл и 0,3 мл выделено по 14 культур (56%) на 25-27 сутки и 23-25 сутки соответственно. Таким образом, предлагаемая питательная среда, которая дополнительно содержит фитопрепарат в дозе 0,2-0,3 мл на пробирку, способствует сокращению сроков роста в среднем на 3-4 дня и повышает выделяемость микобактерий из биоматериалов животных на 8-10%, что позволяет сделать вывод о соответствии заявленного решения критериям новизна, изобретательский уровень, промышленная применяемость. Источники информации 1. Наставление по диагностики туберкулеза. Москва, 2002. С.44-47. 3. Лавренов В.К., Лавренова Г.В. Полная энциклопедия лекарственных растений. Т.II/СПб.: Издательский дом «Нева»; М.: «Олма-ПРЕСС», 1999. С.242-266.
Формула изобретения
Питательная среда для культивирования микобактерий туберкулеза, содержащая яйца куриные, желтки куриных яиц, картофельную муку, калий одноосновной фосфорно-кислый, магнезию серно-кислую, аспарагин, глицерин, воду дистиллированную, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит 10%-ный раствор водного экстракта полыни в дозе 0,2-0,3 мл на поверхности среды при следующем соотношении компонентов:
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
