Патент на изобретение №2381813

(54) ПЕРОРАЛЬНЫЕ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ НА ОСНОВЕ ПРОДУКТОВ, СОДЕРЖАЩИХ ЛИПАЗЫ, ПРЕЖДЕ ВСЕГО ПАНКРЕАТИН, И ПАВ

(57) Реферат:

Настоящее изобретение относится к новым фармацевтическим композициям для перорального введения на основе продуктов, содержащих липазы, прежде всего панкреатин и панкреатинсодержащие продукты, или ферментсодержащие продукты, включающие по крайней мере одну липазу неживотного, прежде всего микробиологического происхождения. Указанные фармацевтические композиции характеризуются повышенной липолитической активностью, прежде всего стабилизацией липазы в кислотном интервале рН. Такие новые фармацевтические композиции содержат систему, включающую по крайней мере один ПАВ и один ко-ПАВ и необязательно липофидную фазу, которые самопроизвольно образуют эмульсии при контактировании с гидрофильной и липофильной фазами. Такие новые фармацевтические композиции предназначены для лечения и/или профилактики нарушений пищеварения, прежде всего нарушений пищеварения, вызванных хронической внешнесекреторной недостаточностью поджелудочной железы, у млекопитающих и человека. 3 н. и 27 з.п. ф-лы, 6 табл.

Настоящее изобретение относится к новым фармацевтическим композициям для перорального введения на основе продуктов, содержащих липазы, прежде всего панкреатин и панкреатинсодержащие продукты или ферментсодержащие продукты, включающие по крайней мере одну липазу неживотного, прежде всего микробиологического происхождения, причем фармацевтические композиции характеризуются повышенной липолитической активностью, прежде всего стабилизацией липазы в кислотном интервале рН. Такие новые фармацевтические композиции содержат систему, включающую по крайней мере один ПАВ и один ко-ПАВ, которые самопроизвольно образуют эмульсии при контактировании с гидрофильной и липофильной фазами. Такие новые фармацевтические композиции предназначены для лечения и/или профилактики нарушений пищеварения, прежде всего нарушений пищеварения, вызванных хронической внешнесекреторной недостаточностью поджелудочной железы, у млекопитающих и человека.

Нарушение пищеварения у млекопитающих и человека в большинстве случаев вызвано недостатком пищеварительных ферментов, прежде всего недостатком эндогенной липазы, а также протеазы и/или амилазы. Причина такого недостатка пищеварительных ферментов часто заключается в гипофункции поджелудочной железы (недостаточности поджелудочной железы), которая является органом, в котором продуцируется основная часть наиболее важных эндогенных пищеварительных ферментов. Патология недостаточности поджелудочной железы является врожденной или приобретенной. Приобретенная хроническая недостаточность поджелудочной железы возникает, например, вследствие алкоголизма. Врожденная хроническая недостаточность поджелудочной железы возникает, например, вследствие врожденного фиброза мочевого пузыря. Следствием недостатка пищеварительных ферментов является появление серьезных симптомов переедания или нарушения питания, которые могут сопрвождаться повышенной восприимчивостью к вторичным заболеваниям.

Установлено, что эффективным лечением недостатка эндогенных пищеварительных ферментов является замена их на действующие аналогичным образом экзогенные пищеварительные ферменты или их смеси. В большинстве случаев в настоящее время для данной цели применяют фармацевтические композиции (далее композиции), которые содержат свиной панкреатин (далее пакреатин). Указанные смеси пищеварительных ферментов, выделенные из поджелудочной железы свиньи, включают липазы, амилазы и протеазы и используются для лечения человека с использованием замены ферментов вследствие значительного сходства ферментов и сопутствующих веществ с компонентами поджелудочной железы человека. В патентах Германии DE 2512746 и DE 4203315 описаны, например, способы получения панкреатина в виде смеси природных ферментов при их экстракции из поджелудочной железы свиньи и при переработке по стандартным методикам в требуемый фармацевтический препарат. Ферменты поджелудочной железы в большинстве случаев вводят перорально в виде твердых композиций. Панкреатин является коммерческим препаратом, например под торговым названием Kreon®, и продается в виде гранул, пилюль или капсул, содержащих микропеллеты с энтеросолюбильным покрытием.

Для того чтобы при пероральном введении смеси ферментов не происходила их необратимая денатурация в желудке под действием желудочной кислоты и протеолитических ферментов, таких как пепсин, содержащийся в желудочном соке, существует необходимость в покрытии смеси ферментов энтеросолюбильной оболочкой. Такая оболочка обеспечивает прохождение смеси ферментов в неповрежденном виде через желудок до мишени, т.е. до двенадцатиперстной кишки, в которой вследствие наличия нейтральной или слабощелочной среды происходит разрушение защитного слоя и высвобождение ферментов. Таким образом, аналогично эндогенным ферментам поджелудочной железы здорового человека введенные пероральным способом ферменты способны проявлять ферментативную активность, прежде всего амилолитическую, липолитическую и протеолитическую активность. Такие твердые композиции на основе панкреатина с энтеросолюбильным покрытием описаны, например, в Европейском патенте ЕР 0021129 А1.

В Европейском патенте ЕР 0583726 А1 описаны микропеллеты панкреатина с энтеросолюбильным покрытием, содержащие 65-85, прежде всего 75-80 мас.% панкреатина, объемная плотность которых составляет от 0,6 г/мл до 0,85 г/мл и в основном содержащие панкреатин, полиэтиленгликоль 4000 и парафин низкой вязкости, содержащие на 100 мас. част. панкреатина: 15-50, прежде всего 20-30 мас. част., полиэтиленгликоля 4000 и 1,5-5, прежде всего 2-3 мас. част., парафина низкой вязкости, характеризующиеся сферической или эллипсоидной формой, при этом диаметр сферы или величина малой оси эллипса составляет от 0,7 до 1,4 мм, предпочтительно от 0,8 до 1,2 мм, и характеризующиеся распределением частиц по размерам, в котором по крайней мере 80% микропеллетов панкреатина характеризуется отношением малой оси эллипса к большой оси эллипса в интервале от 1:1 до 1:2.

В другом варианте, в Европейском патенте ЕР 0826375 А1 описано применение лецитина в качестве стабилизирующего агента, который добавляют в водорастворимые фармацевтические композиции на основе смесей пищеварительных ферментов, содержащих смеси протеазы/липазы, прежде всего панкреатина, и которые являются пригодными для получения водных растворов для непрерывного введения в желудочно-кишечный тракт через зонд. Лецитин добавляют для стабилизации смесей пищеварительных ферментов, чтобы исключить снижение липолитической активности под действием влаги.

Установлено, что в случае фармацевтических композиций, не покрытых энтеросолюбильной оболочкой, активной является только очень незначительная доля липазы, содержащейся в фармацевтической композиции, доставленная к мишени, в двенадцатиперстную кишку. Таким образом, как описано в патенте Германии DE 3642853 А1, дезактивация такого фермента вызвана недостаточной нейтрализацией желудочной кислоты в двенадцатиперстной кишке. В то время как величина рН в двенадцатиперстной кишке здорового человека после приема пищи составляет приблизительно 6, аналогичная величина рН у пациентов с недостаточностью поджелудочной железы составляет только 4. При данной величине рН активность липазы, содержащейся в фармацевтических композициях, составляет одну пятую часть от активности липазы при рН 6.

Таким образом, объектом изобретения является получение фармацевтических композиций, содержащих ферменты или смеси ферментов, обладающие по крайней мере липолитической активностью и характеризующиеся повышенной липолитической активностью и, прежде всего, обеспечивающие стабилизацию активности липазы в кислотном интервале рН.

В настоящем изобретении предлагаются фармацевтические композиции, предназначенные для перорального введения, включающие ферменты или смеси ферментов, которые обладают по крайней мере липолитической активностью, и систему, включающую по крайней мере один ПАВ и по крайней мере один ко-ПАВ, характеризующуюся способностью к самопроизвольному образованию эмульсии при контактировании с гидрофильной фазой и липофильной фазой. Предпочтительно гидрофильную фазу используют для получения конечной эмульсии после расщепления фармацевтической композиции физиологической жидкостью пищеварительной среды. В другом варианте осуществления настоящего изобретения липофильную фазу применяют для получения конечной эмульсии в пищеварительном тракте после по крайней мере частичного расщепления фармацевтической композиции липидами продуктов питания. Прежде всего, для достижения данной цели в настоящем изобретении предлагаются фармацевтические композиции, содержащие системы, включающие по крайней мере один ПАВ, один ко-ПАВ и липофильную фазу.

Неожиданно было установлено, что содержащие липазу фармацевтические композиции на основе указанной системы обладают повышенной липолитической активностью, а также липолитической активностью, стабилизированной в кислотном интервале рН. Применение таких систем в фармацевтических композициях на основе ферментов или смесей ферментов, обладающих по крайней мере липолитической активностью, кроме того, характеризуется преимуществом, которое заключается в возможности применения фармацевтических композиций на основе таких ферментов или смесей ферментов без энтеросолюбильной оболочки, как описано, например, в Европейском патенте ЕР 0583726 А1. Снижение липолитической активности фармацевтических композиций по настоящему изобретению при прохождении через желудок намного ниже по сравнению с фармацевтическими композициями, не содержащими указанные выше системы. Липолитическая активность фармацевтических композиций по настоящему изобретению является более стабильной в кислотном интервале рН желудочного сока по сравнению со стандартными композициями за счет наличия системы, включающей ПАВ, ко-ПАВ и необязательно липофильную фазу.

Дополнительное преимущество заключается в том, что при получении содержащих липазу композиций по настоящему изобретению можно исключить применение указанных энтеросолюбильных полимерных пленок и смягчающих агентов, которые в других случаях необходимы для получения пленочного покрытия для других лекарственных препаратов (гранул, пеллетов, мини-таблеток, таблеток и т.п.). Таким образом, показатели безопасности фармацевтической композиции повышаются за счет исключения применения энтеросолюбильных полимерных пленок и смягчающих агентов. Более того, содержание материала пленочного покрытия в лекарственных формах с энтеросолюбильным пленочным покрытием составляет 20-30% в расчете на общую массу лекарственной формы. Таким образом, отсутствие необходимости применения таких добавок приводит к снижению вводимого количества лекарственной формы, что, в свою очередь, приводит к повышению переносимости лекарственной формы пациентами.

Возможность применения ферментов или смеси ферментов без энтеросолюбильной оболочки характеризуется дополнительным преимуществом, которое заключается в том, что тщательное смешивание фармацевтической композиции с химусом происходит сразу при попадании в желудок. Затем происходит образование эмульсии или микроэмульсии с увеличенной площадью поверхности, на которой содержащаяся в фармацевтической композиции липаза распределена оптимальным образом, необходимым для расщепления триглицеридов химуса. Образованию эмульсии и микроэмульсии способствует также липолитический распад триглицеридов на ди- и моноглицериды и свободные жирные кислоты. Таким образом, повышенная активность липазы приводит к ускорению распада триглицеридов. Более высокая концентрация свободных жирных кислот, высвобождающихся из пищевых продуктов, приводит к повышенной абсорбции жира в двенадцатиперстной кишке. Для фармацевтической композиции по настоящему изобретению было установлено, что происходит возрастание липолитической активности in vitro на приблизительно 10% по сравнению со стандартными содержащими липазу фармацевтическими композициями. Таким образом, фармацевтические композиции по настоящему изобретению характеризуются стабилизацией липолитической активности в желудке и в двенадцатиперстной кишке, а также наблюдается дополнительное повышение липолитической активности за счет ускоренного образования (микро)эмульсии. Предварительно и независиомо образующаяся (микро)эмульсия в желудке приводит к повышенной активации липазы, содержащейся в фармацевтической композиции.

Фармацевтические композиции, самопроизвольно образующие эмульсию, в основном известны в предшествущем уровне техники. Таким образом, например, в Европейском патенте ЕР 0670715 описана вводимая пероральным способом композиция, пригодная для образования микроэмульсии in situ с биологической жидкостью организма и повышающая биологическую доступность активного компонента. Такие фармацевтические композиции известны под торговым названием SMEDDS^® (Self Microemulsifying Drug Delivery System) и в основном включают смесь одного или более активных компонентов с определенной липофильной фазой, определенным ПАВ и определенным ко-ПАВ, свойства которых подобраны таким образом, что конечный продукт образует микроэмульсии при контактировании с определенным объемом физиологической жидкости.

Более того, в Европейском патенте 1058540 В1 описана композиция SMEDDS® в определенной фармацевтической форме, называемой далее «пеллет». Такие пеллеты включают активный компонент, прежде всего индометацин, связующий агент, пригодный для повышения биологической доступности активного компонента, например Gelucire® 44/14, и разбавитель, например лактозу, в измельченной форме.

Цель систем, автоматически образующих микроэмульсии и известных в предшествующем уровне техники к настоящему моменту, всегда заключалась в повышении биодоступности большинства липолитически активных соединений, например в композиции SMEDDS®, за счет образования мицелл, способствующих улучшеной абсорбции активных компонентов через стенки двенадцатиперстной кишки в кровоток. Напротив, цель настоящего изобретения заключается в создании фармацевтической композиции, не содержащей липолитически активных веществ, способных абсорбироваться кровотоком, но содержащих в качестве активного агента ферменты или смеси ферментов, проявляющих по крайней мере липолитическую активность и действующих в желудочно-кишечном тракте. Неожиданно было установлено, что самопроизвольно образующие эмульсии фармацевтические композиции по настоящему изобретению обладают повышенной липолитической активностью и повышенной устойчивостью липазы в кислотном интервале рН. Такие фармацевтические композиции на основе липазсодержащих ферментов, которые самопроизвольно образуют эмульсии при контактировании с гидрофильной фазой и содержащие системы, включающие ПАВ, ко-ПАВ и необязательно липофильную фазу, не описаны в предшествующем уровне техники.

В работе Subramanian и Wasan описано, что продукт Gelucire® 44/14 in vitro оказывает ингибирующее влияние на активность липазы из поджелудочной железы (Subramanian R. и Wasan K.M. “Effect of lipid excipients on in vitro pancreatic lipase activity” Drug Dev. hid. Pharm., т.29(8), с.885-90 (2003)). Как описано в данной работе, определенный буферный раствор, содержащий липиды, смешивают с растворами продукта Gelucire® 44/14, липазы поджелудочной железы и ко-липазы и определяют влияние продукта Gelucire® на активность липазы. Вследствие снижения активности липазы авторы утверждают, что продукт Gelucire® и аналогичные липидные добавки в фармацевтические композиции могут оказывать неблагоприятный эффект на активность липазы из поджелудочной железы in vitro. Напротив, в настоящем изобретении установлено, что фармацевтические композиции, самопроизвольно образующие эмульсии и содержащие липазу смеси ферментов и систему, такую как, например, продукт Gelucire® 44/14, приводят к повышению липолитической активности фармацевтической композиции.

Ниже приведены определения некоторых терминов, использованных в контексте описания настоящего изобретения.

Термин «гидрофильный-липофильный баланс» (ГЛБ) означает эмпирический параметр, используемый в большинстве случаев для описания относительных гидрофильности и липофильности неионных амфифильных соединений. ПАВ или ко-ПАВ с более низкими величинами ГЛБ являются более липофильными и характеризуются большей растворимостью в маслах, в то время как ПАВ или ко-ПАВ с более высокими величинами ГЛБ являются более гидрофильными и характеризуются большей растворимостью в водных растворах. Следует понимать, что шкала ГЛБ не распространяется на анионные, катионные или цвиттерионные соединения.

В большинстве случаев величина ГЛБ для ПАВ или ко-ПАВ используется на практике при использовании композиции для получения промышленных, фармацевтических и косметических эмульсий. Однако для большинства важных ПАВ, включая несколько полиэтоксилированных ПАВ, было установлено, что величины ГЛБ могут различаться приблизительно не более чем на 8 единиц ГЛБ в зависимости от эмпирического способа, выбранного для определения величин ГЛБ (Schott, J. Pharm. Sciences, т.79(1), с.87-88 (1990)). Для некоторых полипропиленоксидсодержащих блок-сополимеров (полоксамеров) величины ГЛБ также могут не совсем точно отражать истинную физико-химическую природу соединений. Наконец, коммерческие ПАВ и/или ко-ПАВ в большинстве случаев не являются чистыми соединениями, а часто представляют собой сложные смеси соединений, и величина ГЛБ для определенного соединения может быть более точной характеристикой коммерческого продукта, основным компонентом которого является данное соединение. Различные коммерческие продукты, содержащие одинаковый ПАВ и/или ко-ПАВ в качестве основного компонента, в большинстве случаев характеризуются различными величинами ГЛБ. Даже для продукта, содержащего один коммерческий ПАВ и/или ко-ПАВ, следует ожидать определенное различие параметров от партии к партии.

Термин «ПАВ», использованный в данном контексте, означает химическое соединение, включающее две группы: одну гидрофильную и/или полярную или ионную и характеризующуюся высоким сродством к воде, и вторую, содержащую алифатическую цепь большей или меньшей длины и являющуюся гидрофобной (липофильной), т.е. ПАВ должно быть амфифильным. Такие химические соединения способны вызывать образование эмульсии типа масло-в-воде и стабилизировать их. ПАВ с более низкими величинами ГЛБ являются более липофильными и характеризуются большей растворимостью в маслах, в то время как ПАВ с более высокими величинами ГЛБ являются более гидрофильными и характеризуются большей растворимостью в водных растворах. Пригодные ПАВ, описанные в контексте настоящего изобретения, характеризуются величиной ГЛБ более 6 и менее 18, предпочтительно более 8 и менее 16. В качестве ПАВ применяют любые ПАВ, пригодные для использования в фармацевтических композициях. Пригодные ПАВ включают анионные, катионные, цвиттерионные и неионные ПАВ. Такие ПАВ могут быть сгруппированы в несколько общих химических классов, как описано ниже. Следует отметить, что настоящее изобретение не ограничивается ПАВ, описанными ниже, которые представлены только в качестве примеров.

ПАВ на основе моноэфиров ПЭГ и жирных кислот

Несмотря на то, что сам полиэтиленгликоль (ПЭГ) не является ПАВ, ряд эфиров ПЭГ и жирных кислот характеризуется свойствами пригодных ПАВ. Наиболее предпочтительными являются моноэфиры ПЭГ и алифатических C₆-С₂₂карбоновых кислот, где 1 молекула полиэтиленгликоля включает от 6 до 60 этиленоксидных звеньев. Примеры коммерческих ПАВ на основе моноэфиров полиэтоксилированных жирных кислот включают ПЭГ-4 лаурат, ПЭГ-4 олеат, ПЭГ-4 стеарат, ПЭГ-5 стеарат, ПЭГ-5 олеат, ПЭГ-6 олеат, ПЭГ-7 олеат, ПЭГ-6 лаурат, ПЭГ-7 лаурат, ПЭГ-6 стеарат, ПЭГ-8 лаурат, ПЭГ-8 олеат, ПЭГ-8 стеарат, ПЭГ-9 олеат, ПЭГ-9 стеарат, ПЭГ-10 лаурат, ПЭГ-10 олеат, ПЭГ-10 стеарат, ПЭГ-12 лаурат, ПЭГ-12 олеат, ПЭГ-12 рицинолеат, ПЭГ-12 стеарат, ПЭГ-15 стеарат, ПЭГ-15 олеат, ПЭГ-20 лаурат, ПЭГ-20 олеат, ПЭГ-20 стеарат, ПЭГ-25 стеарат, ПЭГ-32 лаурат, ПЭГ-32 олеат, ПЭГ-32 стеарат, ПЭГ-30 стеарат, ПЭГ 4-100 монолаурат, ПЭГ 4-100 моноолеат и ПЭГ 4-100 моностеарат.

ПАВ на основе диэфиров ПЭГ и жирных кислот

Диэфиры полиэтиленгликоля (ПЭГ) и жирных кислот также являются пригодными в качестве ПАВ в композициях по настоящему изобретению. Наиболее предпочтительными являются диэфиры ПЭГ и алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот, где 1 молекула полиэтиленгликоля включает от 6 до 60 этиленоксидных звеньев. Примеры коммерческих ПАВ на основе диэфиров ПЭГ и жирных кислот включают ПЭГ-4 дилаурат, ПЭГ-4 диолеат, ПЭГ-6 дилаурат, ПЭГ-6 диолеат, ПЭГ-6 дистеарат, ПЭГ-8 дилаурат, ПЭГ-8 диолеат, ПЭГ-8 дистеарат, ПЭГ-10 дипальмитат, ПЭГ-12 дилаурат, ПЭГ-12 дистеарат, ПЭГ-12 диолеат, ПЭГ-20 дилаурат, ПЭГ-20 диолеат, ПЭГ-20 дистеарат, ПЭГ-32 дилаурат, ПЭГ-32 диолеат и ПЭГ-32 дистеарат.

Смеси моно- и диэфиров ПЭГ и жирных кислот

В большинстве случаев смеси ПАВ также являются пригодными по настоящему изобретению, включая смеси двух или более коммерческих ПАВ. Наиболее предпочтительными являются смеси моно- и диэфиров ПЭГ и алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот, где 1 молекула полиэтиленгликоля включает от 6 до 60 этиленоксидных звеньев. Некоторые эфиры ПЭГ и жирных кислот выпускаются в виде коммерческих продуктов, включающих смеси моно-и диэфиров. Примеры комерческих ПАВ включают ПЭГ 4-150 моно, дилаурат, ПЭГ 4-150 моно, диолеат и ПЭГ 4-150 моно, дистеарат.

Эфиры полиэтиленгликоля (ПЭГ) и глицеридов жирных кислот

Эфиры ПЭГ и глицеридов жирных кислот также являются пригодными ПАВ по настоящему изобретению, такие как ПЭГ-20 глицериллаурат, ПЭГ-30 глицериллаурат, ПЭГ-15 глицериллаурат, ПЭГ-40 глицериллаурат, ПЭГ-20 глицерилстеарат, ПЭГ-20 глицерилолеат и ПЭГ-30 глицерилолеат. Наиболее предпочтительными являются эфиры ПЭГ и глицеридов алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот, где 1 молекула полиэтиленгликоля включает от 6 до 60 этиленоксидных звеньев.

Алкиловые эфиры полиэтиленгликоля (ПЭГ) (простые моно- и/или диэфиры полиэтиленгликоля)

Эфиры полиэтиленгликоля и алкиловых спиртов являются пригодными ПАВ по настоящему изобретению. Наиболее предпочтительными являются моно- и/или диэфиры ПЭГилированных жирных кислот и алифатических С₆-С₂₂спиртов, где 1 молекула полиэтиленгликоля включает от 6 до 60 этиленоксидных звеньев. Примеры коммерческих ПАВ включают ПЭГ-2 олеиловый эфир (олет-2), ПЭГ-3 олеиловый эфир (олет-3), ПЭГ-5 олеиловый эфир (олет-5), ПЭГ-10 олеиловый эфир (олет-10), ПЭГ-20 олеиловый эфир (олет-20), ПЭГ-4 лауриловый эфир (лаурет-4), ПЭГ-9 лауриловый эфир (лаурет-9), ПЭГ-23 лауриловый эфир (лаурет-23), ПЭГ-2 цетиловый эфир, ПЭГ-10 цетиловый эфир, ПЭГ-20 цетиловый эфир, ПЭГ-2 стеариловый эфир, ПЭГ-10 стеариловый эфир и ПЭГ-20 стеариловый эфир.

Простые эфиры полиэтиленгликоля и стерина

ПЭГилированные производные стерина являются пригодными ПАВ по настоящему изобретению. Примеры ПАВ данного класа включают ПЭГ-24 эфир холестерина, ПЭГ-3 0 холестанол, ПЭГ-25 фитостерин, ПЭГ-5 стерин из сои, ПЭГ-10 стерин из сои, ПЭГ-20 стерин из сои и ПЭГ-3 0 стерин из сои.

Сложные эфиры ПЭГилированного сорбита и жирных кислот

Ряд коммерческих эфиров ПЭГилированного сорбита и жирных кислот являются пригодными в качестве ПАВ по настоящему изобретению. Примеры таких ПАВ включают ПЭГ-10 сорбитлаурат, ПЭГ-20 сорбитмонолаурат, ПЭГ-4 сорбитмонолаурат, ПЭГ-80 сорбитмонолаурат, ПЭГ-6 сорбитмонолаурат, ПЭГ-20 сорбитмонопальмитат, ПЭГ-20 сорбитмоностеарат, ПЭГ-4 сорбитмоностеарат, ПЭГ-8 сорбитмоностеарат, ПЭГ-6 сорбитмоностеарат, ПЭГ-20 сорбиттристеарат, ПЭГ-60 сорбиттетрастеарат, ПЭГ-5 сорбитмоноолеат, ПЭГ-6 сорбитмоноолеат, ПЭГ-20 сорбитмоноолеат, ПЭГ-40 сорбитолеат, ПЭГ-20 сорбиттриолеат, ПЭГ-6 сорбиттетраолеат, ПЭГ-30 сорбиттетраолеат, ПЭГ-40 сорбиттетраолеат, ПЭГ-20 сорбитмоноизостеарат и ПЭГ сорбитгексаолеат.

Сложные эфиры сахаров

Эфиры сахаров, прежде всего моноэфиры, являются пригодными ПАВ по настящему изобретению. Примеры таких ПАВ включают дистеарат/моностеарат сахарозы, дипальмитат сахарозы, моностеарат сахарозы, монопальмитат сахарозы и монолаурат сахарозы.

Блоксополимеры полиоксиэтилена-полиоксипропилена

Блоксополимеры ПОЭ-ПОП являются уникальным классом полимерных ПАВ. Уникальная структура ПАВ, включающих звенья гидрофильного ПОЭ и липофильного ПОП в определенных соотношениях и положениях, обеспечивает широкий спектр ПАВ, пригодных для применения по настоящему изобретению. Общим названием таких полимеров является термин «полоксамер» (CAS 9003-11-6). Такие полимеры характеризуются формулой

НО(С₂Н₄O)_а(С₃Н₆О)_b(С₂Н₄O)_aН, где “а” и “b” означают количество полиоксиэтиленовых и полиоксипропиленовых звеньев соответственно.

В другом варианте амфотерные соединения, такие как жирные кислоты-амидоалкилбетаины, включающие С₂-С₂₂жирные кислоты, являются пригодными ПАВ.

Термин «ПАВ» означает или включает также в качестве компонента ионные ПАВ, включая катионные, анионные и цвиттерионные ПАВ. Предпочтительные анионные ПАВ включают соли жирных и желчных кислот. Предпочтительные катионные ПАВ включают карнитины. Предпочтительные ионные ПАВ включают олеат натрия, лаурилсульфат натрия, лаурилсаркозинат натрия, диоктилсульфосукцинат натрия, холат натрия, таурохолат натрия, лауроилкарнитин, пальмитоилкарнитин, миристилкарнитин, соли альгиновой кислоты, пропиленгликольальгинат, лецитины и гидрированные лецитины, лизолецитин и гидрированный лизолецитин, лизофосфолипиды и их производные, фосфолипиды и их производные, соли алкилсульфатов, докузат натрия, карнитины и смеси указанных соединений.

В другом варианте предпочтительные ионные ПАВ включают лецитин, лизолецитин, фосфатидилхолин, фосфатидилэтаноламин, фосфатидилглицерин, фосфатидную кислоту, фосфатидилсерин, лизофосфатидилхолин, лизофосфатидилэтаноламин, лизофосфатидилглицерин, лизофосфатидилинозит, лизофосфатидную кислоту, лизофосфатидилсерин, ПЭГ-фосфатидилэтаноламин, ПВП-фосфатидилэтаноламин, стеарил-2-лактилат, стеариллактилат, холат, таурохолат, гликохолат, дезоксихолат, тауродезоксихолат, хенодезоксихолат, гликодезоксихолат, гликохенодезоксихолат, таурохенодезоксихолат, урсодезоксихолат, тауроурсодезоксихолат, гликоурсодезоксихолат, холилсаркозин, N-метилтаурохолат, капроат, каприлат, капрат, лаурат, миристат, пальмитат, олеат, рицинолеат, линолеат, линолинат, стеарат, лаурилсульфат, тетрацетилсульфат, докузат, лаурилкарнитин, пальмитилкарнитин, миристилкарнитин и соли и смеси указанных соединений.

Термин «ко-ПАВ» (иногда «ко-эмульгатор») по настоящему изобретению означает химическое соединение, которое включает гидрофобный (липофильный) и гидрофильный участки, причем превалирует гидрофобная (липофильная) природа. Предлагается получать водные и масляные фазы, совместно растворимые в микроэмульсии. Пригодные ко-ПАВ по настоящему изобретению характеризуются величиной ГЛБ менее 10, предпочтительно менее 8 и еще более предпочтительно менее 6. Ко-ПАВ включают любые частичные сложные эфиры и/или частичные простые эфиры многоатомных спиртов, таких как глицерин, пропиленгликоль (1,2-пропандиол, 1,2-дигидроксипропан), этилдигликоль или даже полиглицерины (такие как диглиперин, триглицерин, тетраглицерин и т.п.), и алифатических карбоновых кислот (жирных кислот) или алифатических спиртов (жирных спиртов).

Ниже приведен список ко-ПАВ, разделенных на группы по принципу общности химического строения. Следует отметить, что настоящее изобретение не ограничивается перечнем ко-ПАВ, приведенным ниже, которые представлены только в качестве примеров.

Моноглицериды

Важным класом ко-ПАВ являются моноглицериды, которые в основном являются липофильными соединениями. Наиболее предпочтительными являются смеси моноглицеридов с алифатическими С₆-С₂₂карбоновыми кислотами. Примеры ко-ПАВ данного класа включают монопальмитолеин (C16:1), моноэлаидин (C18:1), монокапроин (С6), монокаприлин, монокаприн, монолаурин, глицерилмономиристат (C14), глицерилмоноолеат (C18:1), глицерилмоноолеат, глицерилмонолинолеат, глицерилрицинолеат, глицерилмонолаурат, глицерилмонопальмитат, глицерилмоностеарат, глицерилмонопальмат, глицеринмоностеарат, глицерилкаприлат, глицерилкапронат и смеси указанных соединений.

Полиглицериды жирных кислот

Эфиры полиглицерина и жирных кислот, прежде всего моноэфиры полиглицерина, также являются пригодными ко-ПАВ по настоящему изобретению. Наиболее пригодными являются смеси эфиров полиглицерина и алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот. Примеры коммерческих эфиров полиглицерина включают полиглицерил-2-стеарат, полиглицерил-2-олеат, полиглицерил-2-изостеарат, полиглицерил-3-олеат, полиглицерил-4-олеат, полиглицерил-4-стеарат, полиглицерил-6-олеат, полиглицерил-2-диолеат и полиглицерил-6-диолеат.

Эфиры полипропиленгликоля и жирных кислот

Частичные эфиры пропиленгликоля и жирных кислот, прежде всего моноэфиры, являются пригодными ко-ПАВ по настоящему изобретению. Наиболее предпочтительными являются смеси эфиров пропиленгликоля с алифатическими С₆-С₂₂карбоновыми кислотами. Примеры ко-ПАВ такого класса включают пропиленгликольмонокаприлат, пропиленгликольмонолаурат, пропиленгликольолеат, пропиленгликольмиристат, пропиленгликольмоностеарат, пропиленгликольгидроксистеарат, пропиленгликольрицинолеат, пропиленгликольизостеарат, пропиленгликольмоноолеат, пропиленгликольдикаприлат/дикапронат, пропиленгликольдиоктаноат, пропиленгликолькаприлат/капронат, пропиленгликольдилаурат, пропиленгликольдистеарат, пропиленгликольдикаприлат и пропиленгликольдикапронат.

Термин «липофильная фаза», использованный в контексте настоящего изобретения, означает не смешивающуюся с водой жидкость. Липофильная фаза означает также липидную фазу. Для композиций по настоящему изобретению, в которых система включает также липофильный компонент, последний предпочтительно означает триглицерид или смесь триглицерида и диглицерида. Пригодные липофильные фазы предпочтительно включают ди- и триацилглицериды алифатических карбоновых кислот (жирных кислот), содержащих от 4 до 22 атомов углерода, прежде всего от 6 до 22 атомов углерода, и смеси указанных соединений.

Предпочтительные диглицериды по настоящему изобретению включают смеси диглицеридов с алифатическими С₆-С₂₂карбоновыми кислотами. Примеры включают глицерилдиолеат, глицерилдипальмитат, глицерилдилаурат, глицерилдилинолеат, глицерилдикаприлат, глицерилдикапронат, глицерилкаприлат/капронат, глицерилдистеарат, глицерилстеарат/пальмитат, глицерилолеат/линолеат и глицерилдимиристат.

Предпочтительные триглицериды включают вещества, которые отверждаются при комнатной температуре, содержащие или не содержащие соответствующие добавки, или вещества, которые отверждаются при комнатной температуре в комбинации с соответствующими ПАВ и/или ко-ПАВ и/или активными компонентами. Примеры триглицеридов, пригодных для применения по настоящему изобретению, включают масло Aceituno, миндальное масло, арахисовое масло, масло бабасу, пчелиный воск, масло из семян черной смородины, масло огуречника аптечного, бизоновое масло, масло свечного дерева, масло канола, касторовое масло, китайское растительное талловое масло, масло какао, кокосовое масло, масло из кофейных зерен, кукурузное масло, хлопковое масло, катрановое масло, масло Cuphea, масло энотеры, масло из семян винограда, арахисовое масло, конопляное масло, масло иллипе, масло из семян капока, масло из семян льна, масло из американской сельди, масло мовра, горчичное масло, масло oiticica, оливковое масло, пальмовое масло, пальмовое косточковое масло, арахисовое масло, маковое масло, рапсовое масло, масло из рисовых отрубей, сафлоровое масло, масло сореи кистевой, кунжутное масло, масло из печени акулы, масло масляного дерева, соевое масло, стилингиновое масло, подсолнечное масло, талловое масло, масло чайного дерева, масло семян табака, тунговое масло, масло Ucuhuba, масло Vernonia, масло из зародышей пшеницы, гидрированное кастровое масло, гидрированное кокосовое масло, гидрированное хлопковое масло, гидрированное пальмовое масло, гидрированное соевое масло, гидрированное растительное масло, гидрированное хлопковое и касторовое масло, частично гидрированое соевое масло, частично гидрированное соевое и хлопковое масло, глицерилмоно-, ди- и трибегенат, глицерилтрибутират, глицерилтрикапроат, глицерилтрикаприлат, глицерилтрикапронат, глицерилтриундеканоат, глицерилтрилаурат, глицерилтримиристат, глицерилтрипальмитат, глицерилтристеарат, глицерилтриархидат, глицерилтримиристолеат, глицерилтрипальмитолеат, глицерилтриолеат, глицерилтрилинолеат, глицерилтрикаприлат/капронат, глицерилтрикаприлат/капронат/лаурат, глицерилтрикаприлат/капронат/линолеат, глицерилтрикаприлат/капронат/стеарат, глицерилтрикаприлат/лаурат/стеарат, глицерил-1,2-каприлат-3-линолеат, глицерил-1,2-капронат-3-стеарат, глицерил -1,2-лаурат-3-миристат, глицерил-1,2-миристат-3-лаурат, глицерил-1,3-пальмитат-2-бутират, глицерил-1,3-стеарат-2-капронат, глицерил-1,2-линолеат-3-каприлат.

В объем настоящего изобретения включены также фракционированные триглицериды, модифицированные триглицериды, синтетические триглицериды и смеси триглицеридов. Предпочтительные триглицериды включают растительные масла, рыбий жир, животные масла, гидрированные растительные масла, частично гидрированные растительные масла, средне- и длинноцепные триглицериды и структурированные триглицериды.

В другом варианте следующие соединения используют в качестве липофильной фазы: алифатические углеводороды с низкой и высокой вязкостью, прежде всего олеиловый эфир олеиновой кислоты, изооктилстеарат, гексиловый эфир лауриновой кислоты, ди-н-бутиладипат, изопропилмиристат, изопропилпальмитат и изопропилстеарат, олеиловый спирт, эфирные масла, изопропилкаприлат, изопропилкапринат и изопропиллаурат.

Системы, включающие ПАВ, ко-ПАВ и липофильную фазу

Некоторые коммерческие композиции на основе ПАВ и/или ко-ПАВ включают ди- и триглицериды (от небольшого до среднего количества), в большинстве случаев полученные в результате обратимой реакции исходного триглицерида, например реакции переэтерификации. Такие коммерческие композиции на основе ПАВ и/или ко-ПАВ, так называемые «ПАВ» и/или «ко-ПАВ», в композициях по настоящему изобретению используются также в качестве составной части или целого липофильного компонента, то есть ди- или триглицеридов.

Специалистам в данной области техники известны другие коммерческие композиции на основе ПАВ и/или ко-ПАВ, содержащие значительное количество ди- и триглицеридов. Следует понимать, что такие композиции по настоящему изобретению, содержащие ди- и триглицериды наряду с ПАВ и ко-ПАВ, являются пригодными для получения системы, включающей ПАВ, ко-ПАВ и липофильную фазу. Типичные примеры систем такого типа включают так называемые макроголглицериды (или полиоксиэтилированные глицериды) различных жирных кислот. Макроголглицериды представляют собой смеси моноэфиров, диэфиров и триэфиров глицерина и моноэфиров и диэфиров ПЕГ (полиэтиленгликоля, макрогола, полиоксиэтилена, полиэтиленоксида, полигликоля) и жирных кислот, причем можно определить молекулярную массу ПЭГ и природу жирных кислот. Макроголглицериды получают по реакции частичного гидролиза/этерификации триглицеридов в присутствии соответствующего макрогола. В другом варианте макроголглицериды получают этерификацией глицерина, макрогола и сответствующих свободных жирных кислот. В качестве триглицеридов используют ряд природных и/или гидрированных масел. В большинстве случаев в качестве масел используют касторовое масло, или гидрированное касторовое масло, или пищевое растительное масло, такое как кукурузное масло, оливковое масло, арахисовое масло, пальмовое масло, абрикосовое масло, миндальное масло или соответствующие гидрированные масла.

В большинстве случаев продукты переэтерификации масел и полиэтиленгликоля (или других полиспиртов) называют по их аддуктам: ПЭГ-20 касторовое масло, ПЭГ-23 касторовое масло, ПЭГ-30 касторовое масло, ПЭГ-35 касторовое масло, ПЭГ-38 касторовое масло, ПЭГ-40 касторовое масло, ПЭГ-50 касторовое масло, ПЭГ-56 касторовое масло, ПЭГ-7 гидрированное касторовое масло, ПЭГ-10 гидрированное касторовое масло, ПЭГ-20 гидрированное касторовое масло, ПЭГ-25 гидрированное касторовое масло, ПЭГ-30 гидрированное касторовое масло, ПЭГ-40 гидрированное касторовое масло, ПЭГ-45 гидрированное касторовое масло, ПЭГ-50 гидрированное касторовое масло, ПЭГ-60 гидрированное касторовое масло, ПЭГ-80 гидрированное касторовое масло, ПЭГ-8 кукурузное масло, ПЭГ-20 кукурузное масло, ПЭГ-20 миндальное масло, ПЭГ-25 триолеат, ПЭГ-40 пальмовое масло, ПЭГ-60 кукурузное масло, ПЭГ-60 миндальное масло, ПЭГ-8 каприловый/капроновый глицериды, лауроилмакрогол-32 глицерид (ПЭГ-32 гидрированное пальмовое масло, например Gelucire® 44/14), стеароилмакроголглицерид (например, Gelucire® 50/13).

Примеры коммерческих композиций на основе ко-ПАВ и моноглицеридов, включающих также ди- и триглицериды, включают некоторые продукты ко-ПАВ семейства Maisines® (фирмы Gattefosse) и Imwitors (фирмы Hülls). Такие коммерческие композиции используют для получения композиции, содержащей ко-ПАВ и липофильную фазу. Некоторые примеры таких композиций включают продукты Maisine® 35-I (линолеилглицериды) и Imwitor® 742 (каприлоил/капроилглицериды).

Алифатические карбоновые кислоты, содержащие от 6 до 22 атомов углерода

Термин «алифатические карбоновые кислоты, содержащие от 6 до 22 атомов углерода», использованный в контексте настоящего изобретения, означает алифатические С₆-С₂₂карбоновые кислоты. Предпочтительные карбоновые кислоты выбирают из группы, включающей капроновую кислоту (С6), каприловую кислоту (С8), каприновую кислоту (C10), лауриновую кислоту (C12), миристиновую кислоту (C14), пальмитиновую кислоту (C16), стеариновую кислоту (C18), арахидоновую кислоту (С20) и бегеновую кислоту (С22), а также соответствующие ненасыщенные карбоновые кислоты, такие как пальмитолевая кислота (C16), олеиновая кислота (C18), линолевая кислота (C18), линоленовая кислота (C18), эйкозеновая кислота или смеси указанных кислот. Наиболее предпочтительными являются насыщенные карбоновые кислоты.

Алифатические спирты, содержащие от 12 до 18 атомов углерода

Термин «алифатические спирты, содержащие от 12 до 18 атомов углерода», использованный в контексте настоящего изобретения, означает алифатические C₁₂-C₁₈спирты. Предпочтительные спирты выбирают из группы, включающей лауриловый спирт (C12), миристиловый спирт (C14), цетиловый спирт (С16), стеариловый спирт (C18), олеиловый спирт (С18), линолеиловый спирт (С18) и линолениловый спирт (C18), а также смеси указанных спиртов. Наиболее предпочтительными являются насыщенные спирты.

Алифатические спирты, содержащие от 12 до 22 атомов углерода

Термин «алифатические спирты, содержащие от 12 до 22 атомов углерода», использованный в контексте настоящего изобретения, означает алифатические С₁₂-С₂₂спирты. Предпочтительные спирты выбирают из группы, включающей лауриловый спирт (C12), миристиловый спирт (C14), цетиловый спирт (C16), стеариловый спирт (C18), арахидиловый спирт (С20), бегениловый спирт (С22), олеиловый спирт (C18), линолеиловый спирт (C18) и линолениловый спирт (C18), а также смеси указанных спиртов. Наиболее предпочтительными являются насыщенные спирты.

Термин «гидрофильная фаза», использованный в контексте настоящего изобретения, прежде всего означает водную фазу, которая предпочтительно представляет физиологическую жидкость пищеварительной среды и/или водную фазу, которая поступает в организм с пищей и/или фармацевтической композицией.

Термин «ферменты или смеси ферментов, обладающие по крайней мере липолитической активностью», использованный в контексте настоящего изобретения, означает физиологически приемлемые смеси ферментов, содержащие по крайней мере одну липазу. В другом варианте ферменты или смеси ферментов, кроме липолитической активности, проявляют также протеолитическую активность, т.е. содержат по крайней мере одну протеазу, и/или амилолитическую активность, т.е. содержат по крайней мере одну амилазу.

Применяют также ферменты или смеси ферментов, которые обладают (i) только липолитической, или (ii) липолитической и протеолитической, или (iii) липолитической и амилолитической, или (iv) липолитической, протеолитической и амилолитической активностью. В качестве пригодных ферментов можно использовать ферменты как животного, так и микробиологического происхождения. В качестве смеси ферментов, обладающих по крайней мере липолитической и, необязательно, также протеолитической и/или амилолитической активностью, по настоящему изобретению используют смеси только микробиологического или только животного происхождения или, в другом варианте, смеси ферментов животного и микробиологического происхождения.

Содержащие липазу смеси ферментов неживотного происхождения и композиции на их основе включают по крайней мере одну липазу и, необязательно, также по крайней мере одну протеазу и/или амилазу. В качестве таких ферментов используют ферменты растительного, грибкового или бактериального происхождения. Такие липазы, протеазы и/или амилазы получают, например, при ферментации необязательно рекомбинантных бактерий или грибов. Содержащие липазу ферменты могут включать только микробиологические ферменты (т.е. ферменты, полученные из грибов или бактерий) или растительные ферменты, но также могут включать синтетические смеси ферментов растительного, бактериального и/или грибкового происхождения, необязательно полученные рекомбинантным способом в микробиологической системе. В другом варианте полученный рекомбинантным способом фермент означает разновидность фермента или мутант фермента, который является функциональным эквивалентом или характеризуется наличием аналогичных природному ферменту структурных признаков.

Термин «полученный рекомбинантным способом фермент микробиологической природы», прежде всего термин «полученные рекомбинантным способом липаза, амилаза или протеаза» означает фермент, полученный с использованием рекомбинантной ДНК, фермент микробиологической природы, т.е. полученный из грибов или бактерий. В контексте настоящего изобретения пригодными липазами являются полученные рекомбинантным способом липазы микробиологической природы, обладающие липолитической активностью, предпочтительно при относительно низких величинах рН. В контексте настоящего изобретения пригодными протеазами являются полученные рекомбинантным сопособом протеазы микробиологической природы, обладающие протеолитической активностью, предпочтительно при относительно низких величинах рН. В контексте настоящего изобретения пригодными амилазами являются полученные рекомбинантным сопособом амилазы микробиологической природы, обладающие амилолитической активностью, предпочтительно при относительно низких величинах рН.

Полученный рекомбинантным способом фермент микробиологической природы, т.е. липаза, амилаза или протеаза, означает разновидность фермента или мутант фермента, который является функциональным эквивалентом или характеризуется наличием аналогичных природному ферменту структурных признаков.

Предпочтительные полученные рекомбинантным способом липазы микробиологической природы включают липазы из грибов, например, семейства Humicola, Rhizomucor, Rhizopus, Geotrichum или Candida, прежде всего Humicola lanuginosa (Thermomyces lanuginosa), Rhizomucor miehei, Rhizopus javanicus, Rhizopus arrhizus, Rhizopus oryzae, Rhizopus delamar, Candida cylindracea, Candida rugosa или Geotrichum candidum, или из бактерий, например, семейства Pseudomonas, Burkholderia или Bacillus, прежде всего Burkholderia cepacia. Наиболее предпочтительными являются липазы из штамма Humicola lanuginosa (Thermomyces lanuginosa) или Rhizomucor miehei.

Липазы микробиологической природы используют в настоящем изобретении и их получение, например, рекомбинантным способом описано, например, в опубликованных Европейских патентах 0600868, 0238023, 0305216, 0828509, 0550450, 1261368, 0973878 и 0592478, которые включены в настоящее описание в качестве ссылок.

Предпочтительные полученные рекомбинантным способом амилазы микробиологической природы включают амилазы из грибов, например, семейства Aspergillus или Rhizopus, прежде всего Aspergillus niger или Aspergillus oryzae, или из бактерий, например, семейства Bacillus, прежде всего Bacillus subtilis. Наиболее предпочтительные амилазы получают из штамма Aspergillus oryzae.

Амилазы микробиологической природы используют в настоящем изобретении и их получение, например, рекомбинантным способом описано, например, в опубликованном Европейском патенте 0828509, который включен в настоящее описание в качестве ссылки.

Предпочтительные полученные рекомбинантным сопособом протеазы микробиологической природы включают протеазы из грибов, например, семейства Aspergillus или Rhizopus, прежде всего Aspergillus melleus, Aspergillus oryzae, Aspergillus niger или Rhizopus oryzae или из бактерий, например, семейства Bacillus, прежде всего Bacillus subtilis. Наиболее предпочтительные амилазы получают из штамма Aspergillus melleus.

Протеазы микробиологической природы, которые применяют в настоящем изобретении, описаны, например, в опубликованном Европейском патенте 1186658 и в работе Pariza и Johnson (Pariza MW и Johnson EA: “Evaluating the safety of microbial enzyme preparations used in food processing: update for a new century.” Regul Toxicol Pharmacol. Apr, т. 33(2), с. 173-86 (2001)), которые включены в настоящее описание в качестве ссылок.

Полученные рекомбинантным способом ферменты микробиологической природы, т.е. липаза, амилаза или протеаза, предпочтительно полученные рекомбинантным способом липазы получают при ферментации грибковых клеток, например, клеток рода Aspergillus, таких как A. niger, A. oryzae или А. nidulans, дрожжевых клеток, например, клеток штамма Saccharomyces, таких как S. cerevisiae, или метилотрофных дрожжей рода Hansenula, таких как Н. polymorpha, или Phichia, таких как Р. Pastoris, или бактериальных клеток, например, штамма Bacillus, таких как В. subtilis, или В. Lentus, при этом происходит превращение клеток под действием гена, кодирующего липазу микробиологического происхождения. Наиболее предпочтительные организмы-хозяева являются членами семейства Aspergillus oryzae.

Разновидность фермента или мутант фермента получают путем изменения последовательности ДНК исходного гена или его производных. Разновидность фермента или мутант фермента экспрессируют и продуцируют при включении нуклеотидной последовательности ДНК, кодирующей соответствующий фермент, в пригодный вектор пригодного организма-хозяина. Организм-хозяин не обязательно является идентичным организму, из которого получают исходный ген. Способы включения мутаций в гены известны специалистам в данной области техники и подробно описаны, например, в заявке на выдачу патента ЕР 0407225.

Предпочтительные разновидности липаз или мутанты липазы получают из исходных липаз микробиологической природы. В предпочтительном варианте исходную липазу получают из грибов, например из штамма Humicola или Rhizomucor, предпочтительно из штамма Humicola lanuginosa или Rhizomucor miehei. В другом предпочтительном варианте исходную липазу получают из дрожжей, например из штамма Candida. В еще одном предпочтительном варианте исходную липазу получают из бактерий, например из штамма Pseudomonas. Более предпочтительные разновидности липаз или мутанты липазы включают разновидности исходных липаз, включающих трипсиноподобные каталитические триады, включающие активный остаток серина, расположенный в гидрофобном вытянутом участке связывания молекулы липазы, причем электростатический заряд и/или гидрофобность зоны контакта с липидом, включающей остатки, расположенные в соседних фрагментах молекулы липазы, содержащих активный остаток серина, и эти остатки могут принимать участие во взаимодействии с субстратом в процессе гидролиза, и эти фрагменты модифицируют при удалении и/или замене одного или более отрицательно заряженных аминокислотных остатков на нейтральный или положительно заряженный аминокислотный остаток(и), и/или при замене одного или более нейтральных аминокислотных остатков на положительно заряженные аминокислотные остатки(остаток), и/или при удалении или замене одного или более гидрофобных аминокислотных остатков на гидрофобный аминокислотный остаток(и).

Фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, носители и/или эксципиенты по настоящему изобретению предпочтительно выбирают из группы, включающей свободные полиэтиленгликоли со средней молекулярной массой от приблизительно 200 до приблизительно 6000, глицерин, низшие спирты, прежде всего прямоцепные или разветвленные С₁-С₄спирты, такие как 2-пропанол, сахара, такие как лактоза, сахароза или декстроза, полисахариды, такие как мальтодекстрин или декстраты, крахмалы, целлюлозы, такие как микрокристаллическая целлюлоза или смесь микрокристаллической целлюлозы с натриевой солью карбоксиметилцеллюлозы, неорганические вещества, такие как дикальциевая соль фосфатной кислоты, гидроксиапатит, трикальциевая соль фосфатной кислоты, тальк или диоксид титана, или полиолы, такие как маннит, ксилит, сорбит или циклодекстрин, а также смеси указанных выше соединений.

В настоящем изобретении предлагаются фармацевтические композиции для перорального введения, которые самопроизвольно образуют эмульсии при контактировании с гидрофильной фазой и липофильной фазой, причем указанные композиции включают:

(i) ферменты или смеси ферментов, обладающие по крайней мере липолитической активностью, и

(ii) систему, включающую

– по крайней мере один ПАВ,

– по крайней мере один ко-ПАВ и

– необязательно липофильную фазу.

Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению предпочтительно включает ферменты или смеси ферментов, обладающие по крайней мере липолитической активностью, и систему, включающую:

– в качестве ПАВ по крайней мере один агент с величиной ГЛБ более 6 и менее 18,

– в качестве ко-ПАВ по крайней мере один агент с величиной ГЛБ менее 10 и

– в качестве липофильной фазы липидную фазу,

при этом величина ГЛБ для системы, включающей ПАВ, ко-ПАВ и липофильную фазу, составляет приблизительно от 4 до 16, а температура плавления более или равна 20°С, предпочтительно более или равна 25°С.

ПАВ предпочтительно выбирают из группы, включающей эфиры полиэтиленгликоля и жирных кислот, эфиры полиэтиленгликоля и глицеридов жирных кислот, алкиловые простые эфиры полиэтиленгликоля, стериновые простые эфиры полиэтиленгликоля, эфиры ПЭГилированного сорбита и жирных кислот, эфиры сахаров, блок-сополимеры полиоксиэтилена-полиоксипропилена, ионогенные ПАВ и смеси указанных соединений. Еще более предпочтительно ПАВ выбирают из группы, включающей моно- и/или диэфиры полиэтиленгликоля (ПЭГ) и алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот (жирных кислот), эфиры ПЭГилированного глицерина и алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот, алкиловые моно- и/или диэфиры полиэтиленгликоля (ПЭГ) и алифатических С₁₂-C₁₈спиртов и смеси указанных соединений. Прежде всего, используемый ПАВ представляет собой смесь моно- и диэфиров полиэтиленгликоля (ПЭГ) и алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот и/или моно- и диэфиров полиэтиленгликоля (ПЭГ) и алифатических С₁₂-C₁₈спиртов, причем молекула полиэтиленгликоля (ПЭГ) включает от 6 до 60 этиленоксидных звеньев (от ПЭГ-6 до ПЭГ-60 или от ПЭГ 300 до ПЭГ 3000), предпочтительно смесь моно- и диэфиров полиэтиленгликоля (ПЭГ) и алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот, в которых молекула полиэтиленгликоля (ПЭГ) включает от 6 до 40 этиленоксидных звеньев.

Ко-ПАВ предпочтительно выбирают из группы, включающей моноацилглицериды, простые моноэфиры глицерина, частичные эфиры пропиленгликоля, частичные эфиры полиглицерина, частичные эфиры этилдигликоля и смеси указанных соединений. Еще более предпочтительно ко-ПАВ выбирают из группы, включающей моноацилглицериды алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот, простые моноэфиры глицерина и алифатических C₁₂-С₁₈спиртов, частичные эфиры пропиленгликоля и алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот, частичные эфиры полиглицерина и алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот и смеси указанных соединений. Наиболее предпочтительные ко-ПАВ включают моноацилглицериды алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот и/или простые моноэфиры глицерина и алифатических С₁₂-С₂₂спиртов, прежде всего моноацилглицериды алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот.

Липофильная фаза предпочтительно включает ди- и/или триацилглицериды, предпочтительно ди- и/или триацилглицериды алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот.

Следовательно, в предпочтительном варианте система, являющаяся частью фармацевтической композиции, включает

– в качестве ПАВ смесь моно- и диэфиров полиэтиленгликоля (ПЭГ) и алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот и/или простых моно- и диэфиров полиэтиленгликоля (ПЭГ) и алифатических С₁₂-С₁₈спиртов, причем молекула полиэтиленгликоля (ПЭГ) включает от 6 до 60 этиленоксидных звеньев, предпочтительно смесь моно- и диэфиров полиэтиленгликоля (ПЭГ) и алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот, причем молекула полиэтиленгликоля включает от 6 до 40 этиленоксидных звеньев,

– в качестве ко-ПАВ моноацилглицериды алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот и/или простые моноэфиры глицерина и алифатических С₁₂-С₂₂cпиртов, предпочтительно моноацилглицериды алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот и

– в качестве липофильной фазы ди- и триацилглицериды алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот.

Фармацевтические композиции по настоящему изобретению предпочтительно характеризуются системой, включающей

– от 2 до 90 мас.% ПАВ, как описано выше,

– от 5 до 60 мас.% ко-ПАВ, как описано выше, и

– от 0 до 70 мас.% липофильной фазы, как описано выше,

причем суммарное содержание ПАВ, ко-ПАВ и липофильной фазы в системе составляет 100 мас.%, и система, включающая ПАВ, ко-ПАВ и липофильную фазу, составляет от 10 до 95 мас.% в расчете на массу фармацевтической композиции.

Фармацевтическая композиция предпочтительно характеризуется системой, включающей ПАВ, ко-ПАВ и липофильную фазу и составляющей от 10 до 70 мас.%, предпочтительно от 20 до 50 мас.% и более предпочтительно от 25 до 40 мас.% в расчете на массу фармацевтической композиции.

В другом варианте фармацевтические композиции по настоящему изобретению предпочтительно характеризуются системой, включающей

– от 40 до 90 мас.%, предпочтительно от 60 до 85 мас.% ПАВ,

– от 5 до 40 мас.%, предпочтительно от 15 до 30 мас.% ко-ПАВ, и

– от 0 до 40 мас.%, предпочтительно от 15 до 30 мас.% липофильной фазы, причем суммарное содержание ко-ПАВ и липофильной фазы в системе составляет по крайней мере 10 мас.%, предпочтительно от 15 до 40 мас.% в расчете на массу системы.

Фармацевтические композиции по настоящему изобретению включают также фармацевтически совместимые стандартные вспомогательные вещества, носители и/или эксципиенты, как описано в настоящем контексте.

Прежде всего фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, носители и/или эксципиенты выбирают из группы, включающей полиэтиленгликоли со средней молекулярной массой от приблизительно 200 до приблизительно 6000, глицерин, низшие спирты, прежде всего прямоцепные или разветвленные С₁-С₄cпирты, такие как 2-пропанол, сахара, такие как лактоза, сахароза или декстроза, целлюлозы, такие как микрокристаллическая целлюлоза или смесь микрокристаллическая целлюлоза/натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы, а также смеси указанных соединений.

В предпочтительном варианте содержание фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ и/или эксципиентов составляет не более 20 мас.% в расчете на массу фармацевтической композции.

В другом предпочтительном варианте фармацевтическая композиция по настоящему изобретению включает смесь макроголглицеридов, т.е. систему, включающую ПАВ, ко-ПАВ и липофильную фазу, причем макроголглицериды представляют собой смесь моно-, ди- и триацилглицеридов и моно- и диэфиров полиэтиленгликоля (ПЭГ) и алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот, а также по возможности небольшие количества глицерина и свободного полиэтиленгликоля.

Полиэтиленгликоль (ПЭГ) в составе смеси макроголглицеридов предпочтительно является ПЭГ, молекула которого содержит в среднем от 6 до 40 этиленоксидных звеньев и который характеризуется молекулярной массой от 200 до 2000.

В одном объекте настоящего изобретения предлагается фармацевтическая композиция, включающая систему, содержащую ПАВ, ко-ПАВ и липофильную фазу, величина ГЛБ которой больше или равна 10 и t_пл которой больше или равна 30°С. В предпочтительном варианте система характеризуется величиной ГЛБ от 10 до 16, предпочтительно от 12 до 15, и характеризуется t_пл от 30 до 60°С, предпочтительно от 40 до 50°С.

Прежде всего, система, характеризующаяся величиной ГЛБ и t_пл; является смесью моно-, ди- и триацилглицеридов и моно- и диэфиров полиэтиленгликоля (ПЭГ) и алифатических карбоновых кислот, содержащих от 8 до 20 атомов углерода, при этом молекула полиэтиленгликоля предпочтительно включает от приблизительно 6 до приблизительно 32 этиленоксидных звеньев, причем система необязательно включает свободный глицерин и/или свободный полиэтиленгликоль. Величина ГЛБ такой системы предпочтительно зависит от длины цепи ПЭГ. Температура плавления такой системы зависит от длины цепи жирных кислот, длины цепи ПЭГ и степени насыщения цепей жирных кислот и, следовательно, от исходного масла, которое используют для получения смеси макроголглицеридов.

Термин «алифатические С₈-С₁₈карбоновые кислоты» означает смеси, в которых каприловая кислота (С8), каприновая кислота (C10), лауриновая кислота (C12), миристиновая кислота (C14), пальмитиновая кислота (C16) и стеариновая кислота (C18) содержатся в значительном варьируемом количестве, если указанные выше кислоты являются насыщенными и соответствующими ненасыщенными С₈-С₁₈карбоновыми кислотами. Содержание указанных жирных кислот зависит от исходных масел.

Указанные смеси моно-, ди- и триацилглицеридов и моно- и диэфиров полиэтиленгликоля (ПЭГ) и алифатических карбоновых кислот, содержащих от 8 до 18 атомов углерода, получают, например, по реакции между полиэтиленгликолем с молекулярной массой от 200 до 1500 и исходным маслом, при этом исходное масло включает смесь триглицеридов жирных кислот, которые выбирают из группы, включающей каприловую кислоту, каприновую кислоту, лауриновую кислоту, миристиновую кислоту, пальмитиновую кислоту, стеариновую кислоту, олеиновую кислоту и линоленовую кислоту, в виде отдельных соединений или в виде смеси соединений. Продукт такой реакции необязательно содержит небольшие количества глицерина и свободного полиэтиленгликоля.

Указанная смесь является коммерческим продуктом, например, под торговым названием Gelucire®. В одном из предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения предлагается применение продуктов под торговым названием Gelucire®, прежде всего “Gelucire® 50/13” и/или “Gelucire® 44/14”, в качестве пригодных смесей для использования в фармацевтических композициях по настоящему изобретению.

Продукт Gelucire® 50/13 является смесью моно-, ди- и триацилглицеридов и моно- и диэфиров полиэтиленгликоля и пальмитиновой кислоты (C16) и стеариновой кислоты (С18) в количестве от 40 до 50% и от 48 до 58%, что соответственно представляет основную часть связанных жирных кислот.Содержание каприловой кислоты (С8) и каприновой кислоты (C10) в каждом случае составляет менее 3%, а содержание лауриновой кислоты (C12) и миристиновой кислоты (C14) в каждом случае составляет менее 5%.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения предлагается фармацевтическая композиция, включающая систему, содержащую смесь моно-, ди- и триацилглицеридов и моно- и диэфиров полиэтиленгликоля и алифатических С₈-С₁₈карбоновых кислот, а также по возможности небольшие количества глицерина и свободного полиэтиленгликоля, причем указанная система характеризуется t_пл от 46 до 51°С и величиной ГЛБ приблизительно 13.

Продукт Gelucire® 44/14 является смесью моно-, ди- и триацилглицеридов и моно- и диэфиров полиэтиленгликоля, при этом соответствующее содержание пальмитиновой кислоты (C16) составляет от 4 до 25%, стеариновой кислоты (C18) от 5 до 35%, каприловой кислоты (С8) менее 15%, каприновой кислоты (C10) менее 12%, лауриновой кислоты (C12) от 30 до 50% и миристиновой кислоты (С14) от 5 до 25%. Продукт Gelucire® 44/14 получают, например, при алкоголизе/этерификации с использованием пальмового масла и полиэтиленгликоля 1500.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения предлагается фармацевтическая композиция, включающая систему, содержащую смесь моно-, ди- и триацилглицеридов и моно- и диэфиров полиэтиленгликоля и алифатических С₈-С₁₈карбоновых кислот, а также по возможности небольшие количества глицерина и свободного полиэтиленгликоля, причем указанная система характеризуется t_пл от 42 до 48°С и величиной ГЛБ приблизительно 14.

В еще одном варианте в фармацевтической композиции по настоящему изобретению в качестве ПАВ используют ионный ПАВ. Предпочтительно, ионный ПАВ выбирают из группы, включающей лецитин, лизолецитин, фосфатидилхолин, фосфатидилэтаноламин, фосфатидилглицерин, фосфатидилсерин, лизофосфатидилхолин, лизофосфатидилэтаноламин, лизофосфатидилглицерин,лизофосфатидилинозит, лизофосфатидиловая кислота, лизофосфатидилсерин и смеси указанных соединений и предпочтительно лизофосфатидилхолин.

Прежде всего фармацевтическая композиция по настоящему изобретению включает систему, содержащую

– в качестве ПАВ лизофосфатидилхолин,

– в качестве ко-ПАВ смесь моноацилглицеридов алифатических насыщенных и/или ненасыщенных С₁₆-С₂₀карбоновых кислот, предпочтительно олеиновой и/или линолевой кислоты, и

– в качестве липофильной фазы смесь ди- и/или триацилглицеридов алифатических С₁₆-С₂₀карбоновых кислот, предпочтительно олеиновой и/или линоленовой кислоты.

В качестве смеси моно-, ди- и триацилглицеридов алифатических насыщенных и/или ненасыщенных С₁₆-С₂₀карбоновых кислот используют коммерческий продукт Maisine® (фирмы Gattefosse).

Предпочтительно, указанная фармацевтическая композиция включает от 2 до 10, предпочтительно 5 мас.% лизофосфатидилхолина, от 28 до 51 мас.% моноацилглицеридов, в основном включающих олеиновую и линолевую кислоты, от 36 до 54 мас.% диацилглицеридов и от 4 до 20 мас.% триацилглицеридов, в основном включающих олеиновую и линолевую кислоты, при этом общее содержание в системе ПАВ, ко-ПАВ и липофильной фазы составляет от 10 до 30, предпочтительно 20 мас.% в расчете на массу фармацевтической композиции.

Для фармацевтической композиции по настоящему изобретению выбирают предпочтительно твердые пероральные лекарственные формы, например порошки, пеллеты, гранулы, таблетки или микросферы, которые при необходимости помещают в капсулы или пакетики или формуют в таблетки. Гранулы в большинстве случаев получают гранулированием из расплава. Таблетки получают из порошка или гранул из расплава. Пеллеты получают с использованием термопластичных свойств вспомогательных веществ в мощном смесителе (переработка в пеллеты из расплава) или по стандартным методикам, например при помощи экструзии (например, экструзия из расплава или раствора) и сферонизации. Если отдельные виды ферментов присутствуют или получают каждый в отдельности, такие как липаза, протеаза или амилаза микробиологической природы, то они могут присутствовать в смеси или их упаковывают отдельно друг от друга. Если отдельные ферменты присутствуют в смеси, то предпочтительным является переработка и/или хранение в сухом виде.

Фармацевтические композиции по настоящему изобретению, самопроизвольно образующие эмульсию при контактировании с гидрофильной фазой и необязательно с липофильной фазой, включают ферменты или смеси ферментов, характеризующиеся наличием активного компонента, проявляющего по крайней мере липолитическую активность. В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ферменты или смеси ферментов, кроме липолитической активности, обладают протеолитической активностью, т.е. содержат по крайней мере одну протеазу, и/или амилолитической активностью, т.е. содержат по крайней мере одну амилазу.

В одном предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения липолитической активностью обладают ферменты или смеси ферментов типа липазы микробиологического происхождения.

В другом варианте фармацевтическая композиция содержит ферменты или смеси ферментов, которые являются панкреатином и/или панкреатиноподобным препаратом, предпочтительно панкреатинсодержащими смесями пищеварительных ферментов. Предпочтительно, содержание пакреатина или панкреатинсодержащих смесей пищеварительных ферментов составляет от 65 до 86 мас.%, прежде всего от 75 до 80 мас.% в расчете на массу фармацевтической композиции.

В еще одном варианте в качестве смеси ферментов используют смесь по крайней мере одной микробиологической липазы и одного или более микробиологических ферментов из группы протеаз и амилаз.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения используют смесь ферментов только микробиологического происхождения. Примеры таких физиологически приемлемых бактериальных и/или грибковых ферментов, способы их получения и использования для лечения нарушений пищеварения описаны в предшествующем уровне техники. Например, такие синтетические смеси липазы, протеазы и амилазы микробиологического происхождения, а также фармацевтические композиции, содержащие такие смеси, описаны в международной заявке на выдачу патента WO 02/060474 и в заявке на выдачу европейского патента ЕР 0828509.

Предпочтительно, содержание микробиологических ферментов в фармацевтической композиции составляет от 5 до 80 мас.%, прежде всего от 20 до 60 мас.% в расчете на массу фармацевтической композиции.

Наиболее предпочтительными по настоящему изобретению являются такие смеси пищеварительных ферментов с липолитической, протеолитической и амилолитической активностью, свойства которых близки к свойствам панкреатина. Следовательно, панкреатинсодержащие смеси пищеварительных ферментов и, прежде всего, сам панкреатин являются предпочтительными ферментами по настоящему изобретению. Однако при необходимости допускается добавление в панкреатин или панкреатинсодержащие смеси пищеварительных ферментов одного или более микробиологических ферментов, например липаз, протеаз и/или амилаз, полученных из микробиологических источников.

Пригодные микробиологические ферменты для их использования в отдельности в виде смеси ферментов или даже при добавлении в пакреатин или пакреатинсодержащие смеси пищеварительных фрементов прежде всего включают бактериальные или грибковые ферменты, такие как семейства Bacillus или Pseudomonas, или из грибковых культур, таких как Aspergillus, Humicola или Rhizomucor. Предпочтительно микробиологические ферменты, прежде всего микробиологическую липазу, получают рекомбинантным способом. В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения микробиологической липазой является разновидность липазы или мутант липазы.

Настоящее изобретение относится также к применению системы, включающей

– по крайней мере один ПАВ,

– по крайней мере один ко-ПАВ, и

– необязательно липофильную фазу

для стабилизации липолитической активности в кислотном интервале рН и/или для увеличения липолитической активности твердых фармацевтических композиций, содержащих ферменты или смесь ферментов, обладающих по крайней мере липолитической активностью, предпочтительно панкреатин или панкреатинсодержащие смеси пищеварительных ферментов.

Другие возможные варианты используемой системы, состоящей из ПАВ, ко-ПАВ и липофильной фазы, соответствуют вариантам, упомянутым выше при описании самопроизвольно образующих эмульсии фармацевтических композиций по настоящему изобретению, которые включают такие системы.

Изобретение относится также к способу получения твердых фармацевтических композиций, включающих ферменты или смеси ферментов, обладающих по крайней мере липолитической и необязательно также протеолитической и/или амилолитической активностью, прежде всего панкреатин и/или панкреатиноподобные смеси пищеварительных ферментов. Согласно настоящему изобретению ферменты или смеси ферментов затем перерабатывают в пригодные лекарственные средства, содержащие сисмему, включающую:

– ПАВ, которое выбирают из группы, включающей эфиры полиэтиленгликоля и жирных кислот, эфиры ПЭГилированного глицерина и жирных кислот, алкиловые простые эфиры полиэтиленгликоля, простые эфиры стерола и полиэтиленгликоля, эфиры ПЭГилированного сорбита и жирных кислот, эфиры сахаров, блок-сополимеры полиоксиэтилена и полиоксипропилена, ионные ПАВ и смеси указанных соединений,

– ко-ПАВ, которое выбирают из группы, включающей моноацилглицериды, простые моноэфиры глицерина, частичные эфиры пропиленгликоля, частичные эфиры полиглицерина, частичные эфиры этилдигликоля и смеси указанных соединений, и

– липофильную фазу, включающую ди- и/или триацилглицериды,

а также необязательно стандартные фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, носители и/или эксципиенты.

Другие возможные варианты системы, состоящей из ПАВ, ко-ПАВ и липофильной фазы и используемой в способе получения, соответствуют вариантам, упомянутым выше при описании самопроизвольно образующих эмульсии фармацевтических композиций по настоящему изобретению, которые включают такие системы.

Приведенные ниже примеры предназначены для более подробного раскрытия сущности изобретения, не ограничивая его объем.

Пример 1

Получение пакреатинсодержащих композиций по настоящему изобретению и сравнение липолитической активности стандартной композиции на основе панкреатина и композиции на основе панкреатина по настоящему изобретению, включающей ПАВ, ко-ПАВ и липофильную фазу.

а) Стандартный способ получения (пеллеты), отличающийся от настоящего изобретения

Стандартную композицию получают по методике, описанной в патенте ЕР 0583726. 120 г панкреатина и 30 г ПЭГ 4000 смешивали в сухом виде и затем смачивали 20 г изопропанола. Влажную смесь подвергали экструзии и затем частицы округляли в пригодной машине с использованием парафинового масла. Полученные пеллеты сушили.

б) Способ получения по настоящему изобретению (пеллеты, пример 1А)

350 г продукта Gelucire® 50/13 расплавляли в стакане на водяной бане при температуре 52°С. Расплавленную массу смешивали с 650 г панкреатина в снабженном двойной рубашкой смесителе в течение 10 мин. Гомогенную смесь переносили в экструдер для экструзии в расплаве. Затем экструдат округляли в пригодной машине или сферонизаторе. Диаметр полученных пеллетов составлял 1,0-1,6 мм.

в) Способ получения по настоящему изобретению (гранулы, пример 1В)

300 г продукта Gelucire® 44/14 распавляли в стакане на водяной бане при температуре 48°С. Расплавленную массу смешивали с 700 г панкреатина в снабженном двойной рубашкой смесителе в течение 15 мин и затем охлаждали (гранулирование из расплава).

Определение активности липазы в зависимости от величины рН и времени проводили согласно методике, описанной в работе “Fédération Internationale Pharmaceutique/European Pharmacopeia” (FIP/Ph.Eur.). Согласно данному стандартному методу анализа гидролитическую активность липазы в исследуемом образце определяли с использованием оливкового масла в качестве субстрата. Свободные жирные кислоты, отщепленные от триглицеридов оливкового масла, титровали раствором гидроксида натрия при постоянной величине рН 9,0. Активность липазы в образце определяли при сравнении скорости гидролиза эмульсии оливкового масла в присутствии образца со скоростью гидролиза аналогичного субстрата в аналогичных условиях в присутствии порошкообразного стандартного панкреатина.

В таблице 1 показаны величины абсолютной и относительной липолитической активности стандартной композиции и композиции по настоящему изобретению (пеллеты), определенные в каждом случае согласно FIP/Ph.Eur. В таблице 2 показаны величины абсолютной и относительной липолитической активности стандартной композиции и композиции по настоящему изобретению (гранулы), определенные в каждом случае согласно FIP/Ph.Eur.

Полученные данные свидетельствуют о том, что добавление системы, включающей по крайней мере один ПАВ, по крайней мере один ко-ПАВ и липофильную фазу, в фармацевтические композиции на основе ферментов и смесей ферментов, обладающих по крайней мере липолитической активностью, предпочтительно смесей на основе панкреатина и/или панкреатиноподобных смесей пищеварительных ферментов, приводит к повышению липолитической активности по сравнению со стандартными композициями на основе панкреатина, известных в предшествующем уровне техники.

Абсолютная липолитическая активность соответствующей фармацевтической композиции, определенная согласно FIP/Ph.Eur, представлена по сравнению с общей липолитической активностью, теоретически возможной для данного образца, в виде относительной активности с целью учета различия концентраций пакреатина в композициях. Сравнение определенных относительных активностей липазы свидетельствует о том, что относительная активность липазы в композициях по настоящему изобретению приблизительно на 10% выше соответствующих величин для стандартных композиций. В связи с этим фармацевтические композиции по настоящему изобретению характеризуются повышеной липолитической активностью по сравнению со стандартными композициями на основе панкреатина.

Более того, величина относительной активности липазы композиций по настоящему изобретению, составляющая более 100%, свидетельствует о наличии эффекта активации липазы системой, включающей ПАВ, ко-ПАВ и необязательно липофильную фазу, включенные в композиции по настоящему изобретению.

Пример 2

Сравнение стабильности липолитической активности стандартной композиции на основе панкреатина и композиции на основе панкреатина по настоящему изобретению, включающей ПАВ, ко-ПАВ и липофильную фазу при различных величинах рН

С целью сравнения стабильности липолитической активности стандартной композиции на основе панкреатина и фармацевтической композиции на основе панкреатина по настоящему изобретению, включающей смесь ферментов, обладающих по крайней мере липолитической активностью, и систему, включающую по крайней мере один ПАВ, по крайней мере один ко-ПАВ и липофильную фазу, и активность стандартной композиции на основе пакреатина сравнивали с активностью смеси Gelucire® и панкреатина, которые выдерживали в течение 2 ч при различных рН (рН 6, рН 5 и рН 4).

а) Стандартный способ получения (пеллеты)

Стандартную композицию получали по методике, описанной в патенте ЕР 0583726. 120 г панкреатина и 30 г ПЭГ 4000 смешивали в сухом виде и затем смачивали 20 г изопропанола. Влажную смесь подвергали экструзии и затем округляли в пригодной машине с использованием парафинового масла. Полученные пеллеты сушили.

б) Способ получения по настоящему изобретению (пеллеты) – пример 2

300 г продукта Gelucire® 44/14 расплавляли в стакане на водяной бане при температуре 48°С. Расплавленную массу смешивали с 700 г панкреатина в снабженном двойной рубашкой скоростном смесителе (получение пеллетов из расплава).

Определение активности липазы в зависимости от величины рН и времени проводили по методике FIP/Ph.Eur., как описано выше.

Для определения высвобождения липазы при различных величинах рН в стандартной композиции и композиции по настоящему изобретению образцы инкубировали в приборе для разложения в течение 2 ч при температуре 37° в фосфатном буферном растворе (рН 6, рН 5, рН 4). Образцы отбирали с интервалом в 15 мин и липолитическую активность в образцах измеряли по методике FIP/Ph.Eur., как описано выше.

600 мл Буферного раствора (67 мМ фосфат, 34 мМ NaCl, рН 6,0, рН 5,0, рН 4,0) нагревали до постоянной температуры 37° в стакане объемом 1 л в устройстве для разложения. После достижения постоянной температуры 2 г образца добавляли в стакан и включали устройство для разложения. Величину рН фосфатного буфера поддерживали постоянной в ходе всего эксперимента. Образцы отбирали с интервалом в 15 мин и липолитическую активность в образцах измеряли по методике FIP/Ph.Eur.

Величины относительной липолитической активности, определенной через 15, 30, 45, 60, 75, 90, 105 и 120 мин для стандартной композиции и для композиции по настоящему изобретению по методике, описанной FIP/Ph.Eur, приведены в таблице 3 в % от активности соответствующего образца по сравнению со стандартным порошком панкреатина в соответствии с методикой FIP/Ph.Eur.

Полученные данные свидетельствуют о том, что добавление системы, включающей по крайней мере один ПАВ, по крайней мере один ко-ПАВ и липофильную фазу, в фармацевтические композиции на основе ферментов и смесей ферментов, обладающих по крайней мере липолитической активностью, предпочтительно смесей на основе панкреатина и/или панкреатиноподобных смесей пищеварительных ферментов, приводит к стабилизации липолитической активности в кислотном интервале величин рН. При сравнении липолитической активности стандартной композиции на основе панкреатина и композиции на основе панкреатина по настоящему изобретению при рН 6 в течение 120 мин установлено, что липолитическая активность для обеих композиций в течение времени уменьшается очень незначительно, при этом липолитическая активность композиции по настоящему изобретению оказывается на приблизительно 10% выше по сравнению со стандартной композицией после повторного измерения в течение первого часа. Однако известно, что величина рН, равная 6, не оказывает значительного влияния на величину липолитической активности. С другой стороны, при рН 5 липолитическая активность стандартной композиции уменьшается намного быстрее по сравнению с активностью композиции по настоящему изобретению. В то время как снижение липолитической активности композиции по настоящему избретению составляет менее 10% через 90 мин, снижение липолитической активности стандартной композиции составляет более 30% по сравнению со стандартным порошком панкреатина в соответствии с методикой FIP/Ph.Eur. При рН 4 величина остаточной липолитической активности композиции по настоящему изобретению значительно превышает аналогичную величину для стандартной композиции. В связи с этим фармацевтические композиции по настоящему изобретению характеризуются значительным увеличением липолитической активности в кислотных средах.

Пример 3

Зависимость дозировки композиции на основе пакреатина по настоящему изобретению, включающей ПАВ, ко-ПАВ и липофильную фазу, от усваиваемости диеты с высоким содержанием жира у страдающих внешнесекреторной недостаточностью поджелудочной железы свинок

Эффективность фармацевтических композиций по настоящему изобретению в виде пеллетов, включающих смесь ферментов, обладающих по крайней мере липолитической активностью, и систему, включающую по крайней мере один ПАВ, по крайней мере один ко-ПАВ и липофильную фазу, определяли при испытании на свинках, которые получали корм с высоким содержанием жира (32%). Свинкам накладывали лигатуру на панкреатический тракт, чтобы вызвать полную внешнесекреторную недостаточность поджелудочной железы. Установлено, что композиции по настоящему изобретению повышают пищеварение и абсорбцию жира у экспериментальных животных.

а) Способ получения по настоящему изобретению (пеллеты)

250 г продукта Gelucire® 44/14 (фирмы Gattefossé) расплавляли в стакане на водяной бане при температуре 48°С. Расплавленную массу смешивали с 750 г панкреатина в снабженном двойной рубашкой высокоскоростном смесителе (получение пеллетов из расплава). Размер пеллетов, полученных из данной композиции, аналогичен размеру пеллетов из коммерческого панкреатина.

Определение активности липазы

Испытания проводили на шести свинках (Ellegaard, самки свинок Göttingen), страдающих внешнесекреторной недостаточностью поджелудочной железы массой 20-30 кг (перед операцией). Свинок готовили, как описано в работе Tabeling R, Gregory P, Kamphues J. Studies on nutrient digestibilities (precaecal and total) in pancreatic ductligated pigs and the effects of enzyme substitution. J. Anim. Physiol. a. Anim. Nutr. т. 82, с. 251-263 (1999)), под действием анестезии галотаном с последующей срединной лапаротомией, затем накладывали лигатуру на пакреатический тракт и вводили постоянный илеоцекальный обратный свищ, выходящий через правый бок.

Эффективность лигатуры панкреатического тракта подтверждали (анализ фекалий на химотрипсин) перед началом испытаний на пищеварение, которые начинали по крайней мере через 4 недели после восстановления свинок после операции.

Свинок кормили 2 раза в день по 250 г корма (в 08,00 и 20,0 ч) с высоким содержанием жира (корм содержит: 180 г дважды измельченного продукта Altromin 9021 (модифицированного), 70 г соевого масла (фирмы Roth), причем общий состав корма включает: 99% сухого вещества, 4% неочищенной золы, 32% неочищенных жиров, 16% неочищенных белков, 28% крахмала, 3% волокон) и 0,625 г Сr₂О₃ (смешанный с 1 литром воды) вместе с каждым приемом корма. Корм тщательно смешивали с ферментами непосредственно перед кормлением свинок. Корм в большинстве случаев потреблялся в течение 5 мин.

Во время испытаний свинки получали 28000 или 336000 единиц липазы (FIP) во время одного приема корма в виде композиции по настоящему изобретению в течение 14 сут, при этом фекалии собирали полностью в течение последних 5 сут. Фекалии (и корм) замораживали при -20°, лиофильно сушили и проводили анализ Веендера (Naumann С., Bassler R.: Die chemische Untersuchung von Futtermitteln. 3. Aufl. VDLUFA-Verlag, Darmstadt (1993)) с целью опеределения сухого вещества (высушивание при 103°С в течение 8 ч) и неочищенных жиров с помощью гравиметрического анализа после кипячения в присутствии концентрированной НСl в течение 30 мин с последующей экстракцией петролейным эфиром в течение 6 ч, при этом происходит окисление Сr₂О₃ до хромата и содержание хрома расчитывали с использованием полосы поглощения при 365 нм (Petry H, Rapp W.: Zur Problematik der Chromoxidbestimmung in Verdauungsversuchen. Z. Tierphysiol. Tierernährung und Futtermitellkunde 27, 181-189 (1970)).

Содержание жира и хрома в 100 г сухого вещества корма и фекалий (см. выше) использовали для определения усваиваемости жира (CFA) по следующей формуле:

Эффективность повышения пищеварения и абсорбции жира у свинок, которым накладывали лигатуру на панкреатический тракт, чтобы вызвать полную внешнесекреторную недостаточность поджелудочной железы, определяли в виде % усваиваемости жира для композиции по настоящему изобретению в присутствии различных уровней активности добавленной липазы (в единицах FIP/Ph.Eur.).

Таблица 4
Усваиваемость жира в % у свинок, получавших композицию на основе панкреатина по настоящему изобретению
Система	0 единиц липазы	28000 FIP единиц липазы/прием корма	336000 FIP единиц липазы/прием корма
В отсутствие ферментов	31,66±13,78
Композиция по настоящему изобретению		61,98±11,60 *	79,25±7,00 **
*, ** данные приведены в виде средней величины ± средне-квадратичное отклонение

Использование композиций по настоящему изобретению приводит к значительному и зависимому от дозы повышению усваиваемости жира. В то же время установлено, что при использовании чрезвычайно низких доз также наблюдается чрезвычайно высокая эффективность повышения усваиваемости жира.

Пример 4

Сравнение стабильности липолитической активности стандартной композиции на основе порошкообразного панкреатина и композиции на основе панкреатина по настоящему изобретению, включающей ПАВ, ко-ПАВ и липофильную фазу при различных величинах рН

Получали следующие композиции по настоящему изобретению и определяли их липолитическую активность по сравнению с активностью порошкообразного панкреатина при различных величинах рН в кислотном интервале (рН 6, рН 5 и рН 4).

а) Композиция, отличающаяся от настоящего изобретения для сравнения

Порошкообразный панкреатин

б) Композиция по настоящему изобретению, пример 4А

700 г порошкообразного панкреатина

200 г продукта Gelucire 44/14 (фирмы Gattefossé)

100 г продукта Labrasol (фирмы Gattefossé)

Продукты Gelucire® 44/14 и Labrasol® смешивали и расплавляли в стакане на водяной бане при температуре 48°С. Расплавленную массу смешивали с 700 г панкреатина в снабженном двойной рубашкой высокоскоростном смесителе (гранулирование из расплава).

в) Композиция по настоящему изобретению, пример 4В

800 г порошкообразного панкреатина

190 г продукта Maisine® (фирмы Gattefossé)

10 г ЛФХ (лизофосфатидилхолина)

Продукты Maisine® и лизофосфатидилхолин смешивали и расплавляли в стакане на водяной бане при температуре 48°С. Расплавленную массу смешивали с 800 г панкреатина в снабженном двойной рубашкой высокоскоростном смесителе (гранулирование из расплава).

Определение активности липазы в зависимости от рН и времени проводили, как описано в примере 2.

Высвобождение липазы при различных рН из порошкообразного панкреатина и композиции по настоящему изобретению определяли, как описано в примере 2.

Величины относительной липолитической активности, определенной через 15, 30, 45, 60, 75, 90, 105 и 120 мин для порошкообразного панкреатина и для композиций, полученных в примерах 4А и 4В по настоящему изобретению по методике FIP/Ph.Eur, приведены в таблицах 5А и 5 В в % активности соответствующего образца по сравнению со стандартным порошкообразным панкреатином по методике FIP/Ph.Eur.

Полученные данные свидетельствуют о том, что добавление системы, включающей по крайней мере один ПАВ, по крайней мере один ко-ПАВ и липофильную фазу, в фармацевтические композиции на основе ферментов и смесей ферментов, обладающих по крайней мере липолитической активностью, предпочтительно смесей на основе панкреатина и/или панкреатиноподобных смесей пищеварительных ферментов, приводит к стабилизации липолитической активности в кислотном интервале величин рН.

Пример 5

Определение липолитической активности композиции по настоящему изобретению, включающей липазу микробиологического происхождения и систему, включающую ПАВ, ко-ПАВ и липофильную фазу, и определение стабильности активности при различных рН

С целью определения липолитической активности и оценки повышения стабильности в кислотном интервале рН фармацевтической композиции по настоящему изобретению, включающей смесь ферментов, обладающих по крайней мере липолитической активностью за счет липазы микробиологического происхождения, необязательно полученной рекомбинантным способом, и включающей систему, содержащую по крайней мере один ПАВ, по крайней мере ко-ПАВ и липофильную фазу, активность фармацевтической композиции, включающей смесь продукта Gelucire и микробиологической липазы, определяли при различных рН (рН 6, рН 5, рН 4 и 3)и сравнивали с нестабилизированным препаратом липазы.

а) Способ получения по настоящему изобретению (гранулы)

562,5 г продукта Gelucire® 44/14 расплавляли в стакане на водяной бане при температуре 48°С. 937,5 г композиции на основе микробиологической липазы (содержание активного белка (липазы) составляет от 50 до 60 мас.% сухого вещества композиции) помещали в снабженный двойной рубашкой смеситель при 46°С, затем добавляли расплавленный продукт Gelucire® и соединения смешивали на первой стадии при низкой скорости в течение 3 мин, затем при высокой скорости в течение приблизительно 15 мин и затем охлаждали (гранулирование из расплава).

б) Композиция для сравнения (отличающаяся от настоящего изобретения)

Определение активности липазы проводили согласно методике, описанной в работе “Federation Internationale Pharmaceutique” (FIP) для микробиологических липаз, за исключением того, что концентрация солей желчной кислоты составляла 10 мМ.

С использованием данного стандартного метода анализа гидролитическую активность липазы исследуемого образца определяли с использованием субстрата оливкового масла. Высвобождающиеся жирные кислоты титровали раствором гидроксида натрия при постоянной величине рН 7,0. Активность липазы в образце определяли при сравнении скорости гидролиза эмульсии оливкового масла в присутствии образца со скоростью гидролиза аналогичного субстрата в аналогичных условиях в присутствии стандартной порошкообразной микробиолигической липазы.

Для определения устойчивости липазы при различных величинах рН в нестабилизированном препарате и композиции по настоящему изобретению образцы инкубировали в приборе для разложения в течение 2 ч при температуре 37° в буферном растворе (рН 5, рН 4 и 3). Образцы отбирали с интервалом в 15 мин и липолитическую активность в образцах измеряли по методике FIP.

100 мг липазы инкубировали в 100 мл буферного раствора (0,1 М буфеный раствор на основе малоновой кислоты, 1 мМ раствор хлорида кальция, рН 3, 4 и 5) при 37°С. Образцы отбирали каждые 15 мин в течение 2 ч и липолитическую активность образцов определяли следующим образом: суспензию оливкового масла получали при смешивании 175 г оливкового масла с 630 мл раствора 700 г аравийской камеди и 94,4 г дигидрата хлорида кальция в 5900 мл воды в течение 15 мин в пищевом смесителе на максимальной скорости. Эмульсию охлаждали до 37°С и рН доводили до величины 6,8 с использованием раствора гидроксида натрия. Три раствора для сравнения получали экстракцией соответствующего количества стандартной микробиологической липазы FIP ледяным 1% (мас./об.) раствором хлорида натрия и получали растворы для сравнения, обладающие активностью 50 ед. FIP/мл, 65 ед. FIP/мл и 80 ед. FIP/мл. Растворы образцов получали экстракцией образца, количество которого соответствует приблизительно 6500 единиц в течение 15 мин, с использованием 100 мл ледяного 1% (мас./об.) раствора хлорида натрия. Затем полученные образцы разбавляли ледяным 1% (мас./об.) раствором хлорида натрия и получали растворы, кривые титрования которых соответствовали интервалу кривых титрования растворов сравнения.

Кривые титрования растворов для сравнения и образцов получали при смешивании в термостатированном сосуде 19 мл суспензии оливкового масла с 10 мл раствора 492 мг смеси, содержащей активную липазу (FIP) в 500 мл воды. Полученный раствор термостатировали при 37° и рН доводили до величины 7,0. В полученный раствор добавляли 1 мл раствора для сравнения или образца и высвобождающиеся жирные кислоты титровали при постоянной величине рН 0,1 М ратвором гидроксида натрия в течение 5 мин. Кривые титрования получали методом линейной регрессии по крайней мере по 9 точкам при титровании в течение 60-300 с.

По кривым титрования растворов для сравнения методом линейной регрессии рассчитывали калибровочную кривую. Калибровочная кривая описывается уравнением: у=mx+b, где у означает скорость титрования, m означает наклон, х означает единицы активности FIP раствора для сравнения, a b означает пересечение оси. С использованием величин, определенных для m и b, с использованием формулы х=(y-b)/m рассчитывали липолитическую активность х для каждого раствора образца.

Величины относительной липолитической активности, определенной через 0, 15, 30, 45, 60, 75, 90, 105 и 120 мин для нестабилизированного препарата микробиологической липазы и для композиции по настоящему изобретению определяли по методике FIP. Сравнение полученных результатов свидетельствует об увеличении липолитической активности и повышенной стабильности в кислотном интервале рН композиции по настоящему изобретению, включающей микробиологическую липазу, по сравнению с нестабилизированным препаратом липазы.

Формула изобретения

1. Фармацевтическая композиция для перорального введения, которая самопроизвольно образует эмульсии при контактировании с гидрофильной фазой и липофильной фазой, причем указанная композиция включает:
(i) ферменты или смеси ферментов, обладающие по крайней мере липолитической активностью, и (ii) систему, включающую
по крайней мере одно ПАВ в количестве от 2 до 90 мас.%, которое выбирают из группы, включающей моно- и/или диэфиры ПЭГ и алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот, эфиры ПЭГилированного глицерина и алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот, алкиловые простые моно- и/или диэфиры ПЭГ и алифатических С₁₂-С₁₈спиртов и смеси указанных соединений; или ионный ПАВ выбирают из группы, включающей лецитин, лизолецитин, фосфатидилхолин, фосфатидилэтаноламин, фосфатидилглицерин, фосфатидилсерин, лизофосфатидилхолин, лизофосфатидилэтаноламин, лизофосфатидилглицерин, лизофосфатидилинозит, лизофосфатидную кислоту, лизофосфатидилсерин и смеси указанных соединений,
по крайней мере одно ко-ПАВ в количестве от 5 до 60 мас.%, которое выбирают из группы, включающей моноацилглицериды алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот, простые моноэфиры глицерина и алифатических C₁₂-C₁₈спиртов, частичные эфиры пропиленгликоля и алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот, частичные эфиры полиглицерина и алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот и смеси указанных соединений,
липофильную фазу в количестве от 0 до 70 мас.%, включающую ди- и/или триацилглицериды алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот, при этом суммарное содержание компонентов ПАВ, ко-ПАВ и липофильной фазы составляет 100 мас.% в расчете на массу указанной системы, а суммарное содержание системы составляет от 10 до 95 мас.% в расчете на массу фармацевтической композиции.

2. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой система включает липофильную фазу.

3. Фармацевтическая композиция по п.2, в которой система включает
в качестве ПАВ по крайней мере один агент с величиной гидрофильно-липофильного баланса (ГЛБ) более 6 и менее 18,
в качестве ко-ПАВ по крайней мере один агент с величиной ГЛБ менее 10 и
в качестве липофильной фазы липидную фазу,
при этом величина ГЛБ для системы, включающей ПАВ, ко-ПАВ и липофильную фазу, составляет приблизительно от 4 до 16, а температура плавления равна или превышает 20°С, предпочтительно равна или более 25°С.

4. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой система включает
в качестве ПАВ смесь моно- и/или диэфиров ПЭГ и алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот и/или простых моно- и диэфиров ПЭГ и алифатических С₁₂-С₁₈спиртов, причем молекула ПЭГ включает от 6 до 60 этиленоксидных звеньев,
в качестве ко-ПАВ моноацилглицериды алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот и/или простые моноэфиры глицерина и алифатических С₁₂-С₂₂спиртов, и
в качестве липофильной фазы ди- и/или триацилглицериды алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот.

5. Фармацевтическая композиция по п.4, в которой в качестве ПАВ используют смеси моно- и диэфиров ПЭГ и алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот, причем 1 молекула ПЭГ включает от 6 до 40 этиленоксидных звеньев, а в качестве ко-ПАВ используют моноацилглицериды алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот.

6. Фармацевтическая композиция по п.1, характеризующаяся системой, включающей ПАВ, ко-ПАВ и липофильную фазу, и содержание системы составляет от 10 до 70 мас.%, предпочтительно от 20 до 50 мас.% и более предпочтительно от 25 до 40 мас.% в расчете на массу фармацевтической композиции.

7. Фармацевтическая композиция по п.1 или 6, характеризующаяся системой, включающей
от 40 до 90 мас.%, предпочтительно от 60 до 85 мас.% ПАВ,
от 5 до 40 мас.%, предпочтительно от 15 до 30 мас.% ко-ПАВ, и
от 0 до 40 мас.%, предпочтительно от 15 до 30 мас.% липофильной фазы, причем суммарное содержание ко-ПАВ и липофильной фазы в системе составляет покрайней мере 10 мас.%, предпочтительно от 15 до 40 мас.% в расчете на массу системы.

8. Фармацевтическая композиция по одному из пп.4-7, кроме того, включающая фармацевтически совместимые вспомогательные вещества, носители и/или эксципиенты.

9. Фармацевтическая композиция по п.8, кроме того, включающая фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, носители и/или эксципиенты, которые выбирают из группы, включающей ПЭГ, глицерин, C₁-C₄спирты, сахара, целлюлозы, а также смеси указанных соединений.

10. Фармацевтическая композиция по п.8 или 9, кроме того, включающая фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества и/или эксципиенты, содержание которых составляет не более 20 мас.% в расчете на массу фармацевтической композиции.

11. Фармацевтическая композиция по одному из пп.4-10, включающая смесь макроголглицеридов, т.е. систему, включающую ПАВ, ко-ПАВ и липофильную фазу, а также необязательно небольшие количества глицерина и свободного полиэтиленгликоля, причем макроголглицериды представляют собой смесь моно-, ди- и триацилглицеридов и моно- и диэфиров ПЭГ и алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот, а 1 молекула ПЭГ содержит от приблизительно 6 до приблизительно 32 этиленоксидных звеньев.

12. Фармацевтическая композиция по п.11, включающая систему, содержащую ПАВ, ко-ПАВ и липофильную фазу, а величина ГЛБ системы равна или больше 10 и t_пл равна или больше 30°С.

13. Фармацевтическая композиция по п.12, включающая систему, которая характеризуется величиной ГЛБ от 10 до 16, предпочтительно от 12 до 15 и характеризуется t_пл от 30 до 60°С, предпочтительно от 40 до 50°С.

14. Фармацевтическая композиция по п.13, включающая систему, содержащую смесь моно-, ди- и триацилглицеридов и моно- и диэфиров ПЭГ и алифатических С₈-С₁₈карбоновых кислот, а также необязательно небольшие количества глицерина и/или свободного ПЭГ, причем указанная система характеризуется t_пл от 42 до 48°С и величиной ГЛБ приблизительно 14.

15. Фармацевтическая композиция по п.13, включающая систему, содержащую смесь моно-, ди- и триацилглицеридов и моно- и диэфиров ПЭГ и алифатических С₈-С₁₈карбоновых кислот, а также необязательно небольшие количества глицерина и свободного ПЭГ, причем указанная система характеризуется t_пл от 46 до 51°С и величиной ГЛБ приблизительно 13.

16. Фармацевтическая композиция по п.11, включающая систему, содержащую смесь моно-, ди- и триацилглицеридов и моно- и диэфиров ПЭГ-32 и в основном алифатических С₈-С₁₆карбоновых кислот, смесь моно-, ди- и триацилглицеридов и моно- и диэфиров ПЭГ-8 и в основном алифатических С₆-С₁₀карбоновых кислот, а также необязательно небольшие количества глицерина и свободного ПЭГ.

17. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой система включает
в качестве ПАВ лизофосфатидилхолин,
в качестве ко-ПАВ смесь моноацилглицеридов алифатических насыщенных и/или ненасыщенных С₁₆-С₂₀карбоновых кислот, предпочтительно олеиновой и/или линолевой кислоты, и
в качестве липофильной фазы ди- и/или триацилглицериды алифатических С₁₆-С₂₀карбоновых кислот, предпочтительно олеиновой и/или линолевой кислоты.

18. Фармацевтическая композиция по п.17, в которой система включает от 2 до 10, предпочтительно 5 мас.% лизофосфатидилхолина, от 28 до 51 мас.% моноацилглицеридов, в основном включающих олеиновую и линолевую кислоты, от 36 до 54 мас.% диацилглицеридов и от 4 до 20 мас.% триацилглицеридов, в основном включающих олеиновую и линолевую кислоты, при этом суммарное содержание системы, содержащей ПАВ, ко-ПАВ и липофильную фазу, составляет от 10 до 30, предпочтительно 20 мас.% в расчете на массу фармацевтической композиции.

19. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-18, характеризующаяся твердым фармацевтическим составом в форме порошка, гранул, таблеток, пеллетов или т.п.

20. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-19, в которой липолитическая активность ферментов или смеси ферментов представлена липазой микробиологического происхождения, предпочтительно из бактериальных или грибковых источников.

21. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-19, в которой ферменты или смеси ферментов, кроме того, проявляют протеолитическую и/или амилолитическую активность.

22. Фармацевтическая композиция по п.21, в которой ферментами или смесями ферментов являются панкреатин и/или панкреатиноподобный препарат, предпочтительно панкреатинсодержащие смеси пищеварительных ферментов.

23. Фармацевтическая композиция по п.22, в которой содержание панкреатина или панкреатинсодержащих смесей пищеварительных ферментов составляет от 65 до 85 мас.%, прежде всего от 75 до 80 мас.% в расчете на массу фармацевтической композиции.

24. Фармацевтическая композиция по п.21, в которой в качестве смеси ферментов используют смесь по крайней мере одной микробиологической липазы и одного или более микробиологических ферментов из группы протеаз и амилаз.

25. Фармацевтическая композиция по п.24, в которой содержание микробиологических ферментов в фармацевтической композиции составляет от 5 до 80 мас.%, прежде всего от 20 до 60 мас.% в расчете на массу фармацевтической композиции.

26. Фармацевтическая композиция по п.21, в которой в качестве ферментов или смеси ферментов используют панкреатин или панкреатинсодержащие смеси пищеварительных ферментов, кроме того, включающие один или более микробиологических ферментов, которые выбирают из группы липаз, протеаз и амилаз.

27. Фармацевтическая композиция по любому из пп.20, 24 или 26, в которой микробиологической липазой является липаза грибкового или бактериального происхождения, полученная рекомбинантным способом.

28. Фармацевтическая композиция по п.27, в которой указанной липазой является разновидность липазы или мутант липазы.

29. Применение системы, включающей
по крайней мере одно ПАВ в количестве от 2 до 90 мас.%, которое выбирают из группы, включающей моно- и/или диэфиры ПЭГ и алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот, эфиры ПЭГилированного глицерина и алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот, алкиловые простые моно- и/или диэфиры ПЭГ и алифатических С₁₂-С₁₈спиртов и смеси указанных соединений; или ионный ПАВ выбирают из группы, включающей лецитин, лизолецитин, фосфатидилхолин, фосфатидилэтаноламин, фосфатидилглицерин, фосфатидилсерин, лизофосфатидилхолин, лизофосфатидилэтаноламин, лизофосфатидилглицерин, лизофосфатидилинозит, лизофосфатидную кислоту, лизофосфатидилсерин и смеси указанных соединений,
по крайней мере одно ко-ПАВ в количестве 5 до 60 мас.%, которое выбирают из группы, включающей моноацилглицериды алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот, простые моноэфиры глицерина и алифатических C₁₂-C₁₈спиртов, частичные эфиры пропиленгликоля и алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот, частичные эфиры полиглицерина и алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот и смеси указанных соединений,
липофильную фазу в количестве от 0 до 70 мас.%, включающую ди- и/или триацилглицериды алифатических С₆-С₂₂карбоновых кислот,
при этом суммарное содержание компонентов ПАВ, ко-ПАВ и липофильной фазы составляет 100 мас.% в расчете на массу указанной системы, а суммарное содержание системы составляет от 10 до 95 мас.% в расчете на массу фармацевтической композиции для приготовления твердых фармацевтических композиций, содержащих ферменты или смеси ферментов, обладающих по крайней мере липолитической активностью, предпочтительно панкреатин или панкреатинсодержащие смеси пищеварительных ферментов.

30. Способ получения твердых фармацевтических композиций для перорального введения, включающих ферменты или смеси ферментов, обладающих по крайней мере липолитической активностью, причем ферменты или смеси ферментов затем перерабатывают в пригодные лекарственные средства, содержащие систему, включающую
ПАВ, который выбирают из группы, включающей эфиры ПЭГ и жирных кислот, эфиры ПЭГилированного глицерина и жирных кислот, алкиловые простые эфиры ПЭГ, простые эфиры стерола и ПЭГ, эфиры ПЭГилированного сорбита и жирных кислот, эфиры сахаров, блок-сополимеры полиоксиэтилена и полиоксипропилена, ионные ПАВ и смеси указанных соединений,
ко-ПАВ, который выбирают из группы, включающей моноацилглицериды, простые моноэфиры глицерина, частичные эфиры пропиленгликоля, частичные эфиры полиглицерина, частичные эфиры этилдигликоля и смеси указанных соединений, и
липофильную фазу, включающую ди- и/или триацилглицериды, а также необязательно стандартные фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, носители и/или эксципиенты, отличающиеся тем, что в качестве системы, содержащей ПАВ, ко-ПАВ и липофильную фазу, в нем используют систему по любому из пп.3-7 и 8-15.