Патент на изобретение №2377975
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
(54) ГЕЛЬ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ, ПРОФИЛАКТИКИ ОБРАЗОВАНИЯ КЕЛОИДНЫХ И ГИПЕРТРОФИЧЕСКИХ РУБЦОВ КОЖИ И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ
(57) Реферат:
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к созданию геля для лечения, профилактики образования келоидных и гипертрофических рубцов кожи. Гель в качестве биологически активных компонентов содержит 18,0-20,0% суспензии липосом, мембрана которых сформирована фосфолипидами, липидами животного и растительного происхождения с включенным хлороформным экстрактом лекарственных растений, а во внутреннем водном объеме липидных везикул присутствуют экстракты фетальной части плаценты, пупочных канатиков свиньи и минеральная вода «Нарзан». Гелеобразующая структура состоит из аммонийной соли редкосшитого сополимера акриловой кислоты, полиаллиловых эфиров пентаэритрита, глицерина, триэтаноламина, метилового и пропилового эфиров параоксибензойной кислоты, отдушки и воды. Предложен также способ получения геля. 2 н.п. ф-лы.
Группа изобретений относится к медицине, а именно эмульсионным лечебно-профилактическим средствам наружного применения для профилактики, лечения келоидных и гипертрофических рубцов.
Согласно Международным рекомендациям 2007 года по клиническому лечению рубцов, только силиконовый гель и введение стероидных гормонов в область рубца обладают эффективностью, подтвержденной клиническими испытаниями (Гущина М.Б., Терещенко А.В., Голенков А.К. «Способ лечения гипертрофических и келоидных рубцов». Патент РФ Современный рынок насыщен различными формами лекарственных и лечебно-профилактических средств, предназначенных для решения проблемы патологического рубцевания. Для этих целей используются гормональные препараты «Дипроспан», «Триамценолона ацетонид», инъецируемые внутрикожно в область рубца или применяемые в составе мазей, кремов «Аристокорд», «Кеналог». Однако наличие кортикостероидов в данных препаратах ограничивает возможность их длительного применения из-за системного и пагубного их воздействия на гормональный фон пациентов. Для обеспечения коллагенолизирующего эффекта рубцов кожи используют ферментосодержащие препараты с гиалуронидазной активностью «Лидаза», «Лонгидаза», вводимые в виде инъекций внутрикожно или внутримышечно, либо апплицируемые на рубцы в виде марлевых примочек – «Ронидаза». Указанные препараты не лишены ряда недостатков. Так, инъекционное введение ферментов не обеспечивает их длительного нахождения в зоне развития патологического процесса, поэтому их лечебный эффект более выражен в начальных стадиях формирования рубцов при многочисленных повторных введениях препаратов. Накожное нанесение фермента оказывается малоэффективным из-за трудностей по преодолению им кожного барьера. По этой же причине невысоким эффектом при лечении рубцов обладает гель «Контратубекс», содержащий экстракт лука Серае, гепарин и аллантоин. Для лечения и профилактики образования келоидов и гипертрофических рубцов используются также органопрепараты, представляющие собой экстракты из органов и тканей, содержащие комплекс биологически активных веществ (Органопрепараты в эстетической медицине: красота, ревитализация, профилактика старения, под ред. Ролика И.С. 2006, Москва, с.307). Для инъекций в область формирования рубцовой ткани применяют Revitorgan Известен противоожоговый гель и способ его получения (Патент РФ Однако данное лекарственное средство и способ его получения имеет ряд недостатков. Липосомы, вносимые в качестве биологически активной добавки в гель, содержат только гидрофобные биологически активные молекулы (липиды, фосфолипиды животного, растительного происхождения и хлороформные экстракты лекарственных трав) в составе мембран липидных везикул, а водная фаза, входящая в их внутренний объем, представлена лишь 0,01 М фосфатным буфером. При этом хлороформные экстракты календулы, подорожника, зверобоя, тысячелистника, корня солодки и донника оказывают в комплексе противовоспалительное, антиаллергенное, кровоостанавливающее, эпителизирующее, бактерицидное действие и светофильтрующий эффект при ожогах, не проявляя ремоделирующего эффекта на келоидные и гипертрофические рубцы. Метод получения липосом путем «обращения фаз» делает практически невозможным включение во внутренний объем липосом гидрофильных молекул, в первую очередь белковой природы, которые подвержены денатурации в присутствии хлороформа. Отсутствие же таких биомолекул, включая ферменты, в составе липосом, ограничивает их возможности в качестве биологически активной добавки к гелю для лечения и профилактики образования келоидных и гипертрофических рубцов кожи. Таким образом, существующие методы ремоделирования и профилактики рубцов в целом остаются болезненными, инвазивными, неудобными для применения или недостаточно эффективными. Поэтому создание эффективного препарата для профилактики, лечения данного заболевания и подбор рациональной лекарственной формы, позволяющей наиболее полно реализовать его возможности, является актуальной задачей. Целью группы изобретений является создание космецевтического липосомального препарата для лечения, профилактики образования келоидных и гипертрофических рубцов и разработка способа его получения, обеспечивающего включение в липосомы гидрофобных и гидрофильных биологически активных веществ с сохранением их биологической активности. Поставленная цель достигается тем, что гель для лечения, профилактики образования келоидных и гипертрофических рубцов кожи содержит в качестве биологически активной добавки 18,0-20,0% суспензию липосом, мембрана которых представлена фосфолипидами, липидами животного и растительного происхождения с включенным в них хлороформным экстрактом лекарственных трав (листьев) алоэ древовидного, зверобоя продырявленного, клевера лугового, корня солодки, лавра благородного, подорожника большого, ромашки аптечной в весовом соотношении 2:2:1, а во внутреннем водном объеме липидных везикул присутствуют экстракты фетальной части плаценты, пупочных канатиков свиньи в минеральной воде “Нарзан” в весовом соотношении 1:1:2. При этом хлороформный экстракт трав (листьев) содержит вытяжку из их смеси в равных количествах в соотношении с хлороформом 1:20. Экстрагирование биологически активных веществ из предварительно гомогенизированных и подвергшихся 3-м циклам «замораживания-оттаивания» плаценты и пупочных канатиков свиньи осуществляют минеральной водой «Нарзан». Липосомы в асептических условиях приготавливают методом «ручного встряхивания», используя в качестве водной фазы простерилизованные с помощью мембранных фильтров полученные экстракты. Помимо липосом гель содержит также аммонийную соль редкосшитого сополимера акриловой кислоты и полиаллиловых эфиров пентаэритрита, глицерин, триэтаноламин, метиловый и пропиловый эфиры параоксибензойной кислоты, отдушку и воду, при следующем содержании компонентов, мас.%.
Способ получения геля для лечения, профилактики образования келоидных и гипертрофических рубцов кожи включает подготовку водной эмульсии водорастворимого полимера из аммонийной соли редкосшитого сополимера акриловой кислоты и полиаллиловых эфиров пентаэритрита и триэтаноламина, нагревание ее до 60-65°С и добавления раствора консервантов, в качестве которых используют метиловый и пропиловый эфиры параоксибензойной кислоты в глицерине, эмульгирование, охлаждение до 30-35°С, введение биологически активной добавки – суспензии липосом, водная фаза которых содержит экстракты фетальной части плаценты, пупочных канатиков свиньи и минеральную воду «Нарзан», а мембрана состоит из фосфолипидов и липидов животного и растительного происхождения с включенным в них хлороформным экстрактом лекарственных трав (листьев): алоэ древовидного, зверобоя продырявленного, клевера лугового, корня солодки голой, лавра благородного, подорожника большого, ромашки аптечной, с весовым соотношением 2:2:1, при этом хлороформный экстракт трав готовят из их смеси в равных количествах в соотношении с хлороформом 1:20, эмульгирование смеси и добавление отдушки. По составу и способу заявляемая группа изобретений характеризуются тем, что при формировании мембран липосом используются фосфолипиды и липиды животного и растительного происхождения с включенным в их состав хлороформным экстрактом алоэ древовидного, зверобоя продырявленного, клевера лугового, корня солодки, лавра благородного, подорожника большого, ромашки аптечной, а во внутренний объем липидных везикул иммобилизуются стерильные экстракты фетальной части плаценты, пупочных канатиков свиньи в минеральной воде “Нарзан”. Хлороформный экстракт предлагаемого фитосбора содержит алкалоиды, флавоноиды, каратиноиды, азулены, органические кислоты, дубильные вещества, жирорастворимые витамины А, Д, Е, К, в комплексе эти компоненты оказывают антисептическое, противовоспалительное, болеутоляющее, антиаллергическое, кортикостероидноподобное действия, повышают защитные силы организма, расслабляют гладкую мускулатуру, усиливают регенеративные процессы, стимулируя рост грануляций и эпителизацию. Наличие токоферолов (витамин Е) обеспечивает ингибирование перекисных реакций и образование свободных радикалов – разрушителей мембран клеток. Обладая способностью к преодолению анатомических барьеров, в том числе кожных, липосомы при нанесении на ее поверхность обеспечивают доставку в места формирования келоидных и гипертрофических рубцов биологически активных веществ фетальной части плаценты, пупочных канатиков свиньи и минеральных компонентов воды «Нарзан», а также липидов и фосфолипидов, присутствующих в их мембранах, которые оказывают лизирующее действие на келоидные и гипертрофические рубцы кожи. При этом пролонгированность действия указанных веществ обеспечивается постепенной естественной биодеградацией мембран липосом с дискретным высвобождением растворенных в их водной фазе лекарственных компонентов, оказывающих регенерирующее действие на патологические процессы рубцевания кожи. Присутствующая в липосомах минеральная вода «Нарзан» активно воздействуют на нервные окончания, способствуя усилению микроциркуляции крови и снижению воспалительных процессов. Использование для получения липосом липидов животного происхождения обусловлено их близким составом липидным компонентам кожи (Кузякова Л.М., Бутова О.А. Дерматокосметология. Тенденции и перспективы развития. Ставрополь, 2004, 295 с.).
Таким образом, повышение эффективности заявляемого средства (геля) для лечения, профилактики образования келоидных и гипертрофических рубцов кожи обеспечивается составом мембран липосом, в которых сбалансированы липиды животного, растительного происхождения и биологически активные компоненты лекарственных растений, а также наличием во внутреннем объеме липидных везикул экстрактов фетальной части плаценты, пупочных канатиков свиньи в минеральной воде «Нарзан», оказывающих коллагенолизирующий эффект на рубцы. Липосомы, глубоко проникая в кожу, взаимодействуя с мембранами ее клеток, обеспечивают постепенный выход лекарственных компонентов и пролонгированность их действия. Использование в качестве структурообразующего компонента аммонийной соли редкосшитого сополимера акриловой кислоты, полиаллиловых эфиров пентаэритрита и эмульгирование гелеобразной основы с суспензией липосом создает условия образования связанодисперсной системы за счет поликонденсации компонентов основы с полярными липидами бислойной мембраны липосом и обеспечивает стабильное распределение биологически активной добавки в массе продукта. Возможность практического использования заявляемой рецептуры и способа получения геля для лечения, профилактики образования келоидных и гипертрофических рубцов кожи иллюстрируется примером конкретного исполнения. Пример. Готовят гелеобразный раствор водорастворимого полимера. В реактор заливают стерильную очищенную воду в объеме 1,9 литра, загружают 25 грамм карбополла-940 или 32 грамма аксама. Полимер осторожно насыпают на поверхность воды и оставляют набухать 30-40 минут. В случае использования карбопола-940 в реактор осторожно заливают при перемешивании 20 грамм триэтаноламина. Температуру смеси доводят до 60°С и осуществляют перемешивание в течение 20-30 минут до полного растворения полимера. В отдельную емкость загружают 50 грамм глицерина, нагревают его до 60°С и растворяют в нем консерванты – пропиловый и метиловый эфиры параоксибензойной кислоты по 2,5 грамма. Полученный раствор фильтруют, перемешивают с гелеобразным раствором полимера и смесь охлаждают до 35°С. Затем в гелеобразную массу порциями подают 0,5 литра 18,0-20,0% суспензию липосом, перемешивают в течение 30 минут до получения однородной массы, добавляют отдушку и вновь перемешивают в течение 10 минут. Готовый гель подают на фасовку. Полученный продукт представляет собой однородную непрозрачную гелеобразную массу серо-зеленого цвета с приятным запахом. Он хорошо впитывается в кожу без образования пленки. Высушенные лекарственные травы (листья) зверобоя продырявленного, клевера лугового, корня солодки, лавра благородного, подорожника большого, ромашки аптечной смешивают в равных количествах, добавляют пропорциональное количество алоэ древовидного (1/7 часть в пересчете на сухой вес), измельчают и выдерживают в течение 3-х часов под бактерицидной лампой. Затем смесь трав заливают хлороформом в соотношении 1:20, суспензию перемешивают и настаивают в затемненном месте в течение 2-3 суток. По окончании экстракции суспензию перемешивают и отделяют супернатант. Конечную концентрацию липидов в экстракте доводят до 50 мг/мл. Смесь липидов и фосфолипидов из головного мозга свиньи и семян подсолнечника выделяют путем гомогенизации головного мозга свиньи и отдельно семян подсолнечника охлажденным ацетоном с последующей фильтрацией, экстракции осадков смесью хлороформ-этанол 1:1 в течение 1-2 часов при 20°С, отделения липидной фазы и выделения из нее фосфолипидов добавлением охлажденного ацетона в соотношении с супернатантом 1,5-2,0:1. Полученные осадки фосфолипидов отделяют фильтрованием и растворяют в хлороформе, доводя конечную концентрацию липидов до 50 мг/мл (Патент РФ Биологически активные вещества выделяют из фетальной части плаценты и пупочных канатиков свиньи. Органы в весовом соотношении 1:1 тщательно промывают холодной водой, гомогенизируют, для разрушения мембран клеток трехкратно подвергают циклам «замораживания-оттаивания». Процесс замораживания осуществляют при -40°С в течение 12-18 часов, а оттаивание производят при 37°С в течение 2-4 часов, после чего гомогенат заливают 2-мя объемами минеральной воды «Нарзан», а экстракцию проводят при периодическом перемешивании в течение 18 часов при температуре 4°С, затем супернатант отделяют фильтрованием и стерилизуют с использованием мембранных фильтров. Липосомы получают из смеси хлороформных экстрактов животного, растительного происхождения и лекарственных трав в весовом соотношении 2:2:1. Для этого в асептических условиях в каждую круглодонную колбу объемом 1000 мл вносят по 4 мл хлороформных экстрактов животного и растительного происхождения и 2 мл хлороформного экстракта лекарственных трав. Колбы присоединяют к роторному испарителю и при пониженном давлении и температуре 37±2°C выпаривают органический растворитель. В каждую колбу, на внутренней поверхности которой находится липидная пленка, вносят по 20 мл экстракта фетальной части плаценты, пупочных канатиков свиньи в минеральной воде “Нарзан” и стерильные стеклянные бусинки. Колбу выдерживают 2 часа при комнатной температуре для набухания липидной пленки и затем энергично встряхивают в течение 10-20 минут до формирования стойкой эмульсии липосом. Контроль формирования липидных везикул осуществляют с использованием оптического микроскопа при инструментальном увеличении × 320-400. Заявляемое содержание всех составляющих в рецептуре геля для лечения, профилактики образования келоидных и гипертрофических рубцов кожи оптимально обеспечивает достижение желаемого эффекта. Снижение содержания аммонийной соли редкосшитого сополимера акриловой кислоты и полиаллиловых эфиров пентаэритрита не обеспечивает необходимой консистенции, повышение содержания в продукте акриловой кислоты приводит к формированию слишком густого геля. Снижение содержания суспензии липосом ниже заявляемого предела приводит к понижению лечебного и профилактического действия геля, повышение количества липосом в препарате нецелесообразно, так как достигаемый эффект уже практически не изменяется. Сравнительные испытания заявляемого геля для лечения и профилактики образования келоидных и гипертрофических рубцов и широко известной мази «Кеналог» (триамцинолона ацетонид) проведены в Ставропольской государственной медицинской академии. У экспериментальных животных моделированы келоидные и гипертрофические рубцы. Эксперимент выполняли на 30 морских свинках, обоих полов, с массой тела 320-340 г. Подопытных животных разделили на 3 группы. Первая группа состояла из животных с гипертрофическими рубцами в области срединной линии спины (по 2 рубца на каждом животном на расстоянии 3 см), полученными путем нанесения под местной анестезией дугообразного разреза кожи, с последующим обсеменением культурой Staphylococcus aureus. Вторая группа была представлена животными с келоидными рубцами (по 2 рубца на каждом животном на расстоянии 3 см), полученными путем контактного ожога с последующей гиперстимуляцией рубца антигенами, выделенными из келоидного рубца человека. Третья группа – контроль. В каждой из указанных групп животных на 1-й рубец производилось накожное нанесение мази «Кеналог» в течение 1,5 месяцев ежедневно, на 2-й – заявленного препарата 1 раз в 2 дня. В контрольной группе обе методики лечения применялись на неизмененной коже. Через 2 месяца была произведена морфологическая оценка результатов лечения. Оценивались: местная гиперемия, отек, эрозии, изменения пигментации, размеры и качество рубца, сопротивление разрыву и/или рецидивы келоида. Исследование показало, что в первых 2-х группах экспериментальных животных в результате применения заявленного препарата произошло выраженное ремоделирование гипертрофических и келоидных рубцов, в контрольной группе местных и системных побочных эффектов не наблюдалось. Оценка результатов местного применения мази «Кеналог» в группах с келоидными и гипертрофическими рубцами показала способность кортикостероида размягчить, сделать более плоским рубец, а также улучшить симптоматический рельеф, но степень минимизации рубцовой репарации оказалась ниже. Кроме того, во всех группах животных с местным применением мази «Кеналог» ассоциировались такие осложнения, как атрофия кожи, гипопигментация, телеангиоэктазии, уртикарная сыпь. Таким образом, заявляемая рецептура и способ получения геля для лечения, профилактики образования келоидных и гипертрофических рубцов практически осуществимы, а результаты исследования его фармакологических свойств обусловливают целесообразность практического использования изобретения в массовом производстве эффективного лечебного средства. Литература
3. Ефременко В.И. Липосомы (получение, свойства, аспекты применения в биологии и медицине), Ставрополь, 1999, 236 с. 4. Кузякова Л.М., Бутова О.А. Дерматокосметология. Тенденции и перспективы развития. Ставрополь, 2004, 295 с. 5. Органопрепараты в эстетической медицине: красота, ревитализация, профилактика старения, под ред. Ролика И.С. 2006, Москва, с.307 6. Патент РФ 7. Патент РФ 8. Патент РФ 9. Anthony E. Brissett, M.D., and David A. Sherris, M.D. «Scar Contractures, Hypertrophic Scars, and Keloids», Vol 1. Chicago: University of Chicago Press; 1930: 403-406.
Формула изобретения
1. Гель для лечения, профилактики образования келоидных и гипертрофических рубцов кожи, содержащий аммонийную соль редкосшитого сополимера акриловой кислоты и полиаллиловых эфиров пентаэритрита, метиловый и пропиловый эфир параоксибензойной кислоты, триэтаноламин, глицерин, отдушку и воду, отличающийся тем, что он содержит биологически активную добавку – 18-20% суспензию липосом из фосфолипидов животного и растительного происхождения с включенным в их мембрану хлороформным экстрактом лекарственных растений с весовым соотношением 2:2:1, при этом экстрагируют листья алоэ древовидного, зверобоя продырявленного, клевера лугового, корня солодки голой, лавра благородного, подорожника большого и ромашки аптечной, взятые в равных количествах при соотношении с хлороформом 1:20, а во внутреннем объеме липидных везикул присутствуют экстракты фетальной части плаценты, пупочных канатиков свиньи в минеральной воде «Нарзан» в весовом соотношении 1:1:2 при следующем соотношении компонентов, мас.%:
2. Способ получения геля для лечения, профилактики образования келоидных и гипертрофических рубцов кожи, включающий приготовление водной эмульсии водорастворимого сополимера акриловой кислоты и полиаллиловых эфиров пентаэритрита и триэтаноламина с нагреванием до 60-65°С, с последующим добавлением метилового и пропилового эфиров оксибензойной кислоты в глицерине, после эмульсию охлаждают до 30-35°С и вводят биологически активную добавку – 18-20% суспензию липосом, состоящую из фосфолипидов и липидов животного и растительного происхождения с включенным в их мембрану хлороформным экстрактом лекарственных растений с весовым соотношением 2:2:1, при этом экстрагируют листья алоэ древовидного, зверобоя продырявленного, клевера лугового, корня солодки голой, лавра благородного, подорожника большого и ромашки аптечной, взятые в равных количествах при соотношении с хлороформом 1:20, а во внутренний объем липидных везикул вводят в асептических условиях экстракты фетальной части плаценты, пупочных канатиков свиньи в минеральной воде «Нарзан» в весовом соотношении 1:1:2, получаемые после разрушения мембранных клеток трехкратным циклом замораживания при -40°С в течение 12-18 ч и оттаивания при 37°С в течение 18 ч при температуре 4°С, после чего растворимую часть экстракта отделяют, стерилизуют с использованием мембранных фильтров и включают в липосомы в асептических условиях методом «ручного встряхивания», смесь снова эмульгируют и добавляют отдушку.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
4, 2004, Санкт-Петербург, с.35.). Закономерно высоки требования к качеству послеоперационных рубцов у пациентов, перенесших косметические операции, особенно на открытых областях тела. Внешний вид рубцов оказывает большое влияние на эстетическую, а их клинико-морфологический тип (атрофические, нормотрофические, гипотрофические, келоидные) – на функциональную оценку результатов вмешательства. Келоидные и гипертрофические рубцы могут вызвать контрактуры, которые приводят к потере функции, если пересекают сустав, обезображивание, если располагаются на лице. Помимо этого, они могут быть болезненными или зудящими. Только иссечение дает рецидив в 45-100% случаях и, по мнению большинства клиницистов, должно крайне редко использоваться как отдельная модель лечения келоидных рубцов. Таким образом, именно лекарственная терапия келоидных и гипертрофических рубцов является актуальным разделом современной медицины.