Патент на изобретение №2375071
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) АНТИАГРЕГАЦИОННОЕ И СТРЕСС-ЛИМИТИРУЮЩЕЕ СРЕДСТВО
(57) Реферат:
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к созданию антиагрегационного и стресс-лимитирующего средства, в качестве действующего вещества содержащего экдистероидсодержащую субстанцию в виде смеси 20-гидроксиэкдизона в количестве не менее 75% и 25S-инокостерона в количестве не менее 10%. Действующее вещество выделено из надземной части растений рода Serratula семейства Asteraceae, предпочтительно листьев, собранных в фазу вегетации, массовой бутонизации или начала цветения. Данное средство расширяет арсенал средств антиагрегационного и стресс-лимитирующего воздействия, без проявления побочного действия на организм человека.
Изобретение относится к пищевым добавкам и лечебным препаратам антиагрегационного и стресс-лимитирующего действия, может быть использовано для профилактики заболеваний, сопровождающихся синдромом повышенной вязкости крови, агрегацией эритроцитов и снижением деформируемости: заболеваний сердечнососудистой системы: атеросклероз, ИБС, инфаркт миокарда и др., заболеваний обмена веществ: сахарном диабете, ожирении и некоторых заболеваний аутоиммунной природы. Средство показано в комплексной терапии для коррекции неврозов и состояний дизадаптации, для снижения невротического реагирования, а также для повышения адаптивных возможностей человека и сохранения его работоспособности в трудных климатических и профессиональных условиях. Известно средство Патримин, обладающее антиагрегационным действием (RU 2189241, МКИ 7 А61К 35/78, 20.09.2002). Средство характеризуется тем, что представляет собой сухой экстракт тритерпеновых гликозидов-патринозидов Д, В и С, полученный из корней патринии средней (Patrinia intermedia (Horn.) Roem et Schult), при этом содержание олеаноловой кислоты 10-19% на абсолютно сухой экстракт. Недостатком известного средства является токсичность действия тритерпеновых гликозидов-патринозидов, кроме того для получения средства используют корни и корневища растений, что снижает воспроизводимость лекарственных растений и увеличивает себестоимость готового продукта. Задачей настоящего изобретения является расширение спектра фармакологической активности, получение препарата без отрицательного воздействия на организм человека. Технический результат заключается в расширении арсенала средств антиагрегационного и стресс-лимитирующего воздействия, без проявления побочного действия на организм человека. Новый препарат обладает дополнительным стресс-лимитирующим действием, не оказывает собственного гормонального воздействия, оптимизирует состояние систем неспецифической адаптации организма. Технический результат достигается тем, что антиагрегационное и стресс-лимитирующее средство включает действующее вещество из надземной части растений рода Serratula семейства Asteraceae, предпочтительно листьев, собранных в фазу вегетации, массовой бутонизации или начала цветения, в качестве действующего вещества используют экдистероидсодержащую субстанцию в виде смеси 20-гидроксиэкдизона в количестве не менее 75% и 258-инокостерона в количестве не менее 10% и, кроме того, оно обладает дополнительным стресс-лимитирующим действием. Субстанцию смеси фитоэкдистероидов выделяют по способу, описанному в патенте РФ 2153346. Способ позволяет получить 20-гидроксиэкдизона – не менее 75% и 25S-инокостерона – не менее 10%. Заготовку сырья, предпочтительно листьев, осуществляют в фазу вегетации, массовой бутонизации или начала цветения. Экспериментально установлено, что в эти фазы развития содержание экдистероидов максимально. Исследование распределения экдистероидов в растениях серпухи венценосной проводили у средневозрастных генеративных особей. По содержанию экдистероидов серпуха венценосная намного превосходит другие растения. Использование надземной части растения (в отличие от корневищ) значительно облегчает заготовку и переработку экдистероидсодержащего растительного сырья. Измельченное растительное сырье (надземная часть растения рода Serratula семейства Asteraceae) неоднократно экстрагируют водой при температуре не выше 100°С не более 1 ч при постоянном перемешивании и соотношении сырье: экстрагент – 1:10 соответственно. Густой водный экстракт упаривают при пониженном давлении, обрабатывают смесью этилацетат-метанол, взятой при соотношении 4:1 или хлороформ-метанол при соотношении 6:1. Процедуру повторяют до полного извлечения экдистероидов из густого экстракта. Органические извлечения упаривают досуха, затем экдистероиды очищают путем хроматографии на оксиде алюминия в системе хлороформ-метанол или этилацетат-метанол возрастающей полярности и перекристаллизацией в системе этилацетат-метанол или этилацетат- этанол при соотношении 9:1. Выделенная субстанция проявляет высокую физиологическую активность по сравнению с препаратами – аналогами. Субстанция получила коммерческое наименование Серпистен, которое образовано от названия лекарственного растении. Средство Серпистен представляет собой белый кристаллический порошок, не имеющий запаха, малорастворимый в воде, хорошо растворимый в метаноле и 70%-ном этаноле. Проверка антиагрегационного и стресс-лимитирующего действия субстанции Серпистен осуществлялась на базе кафедры физиологии человека и животных Сыктывкарского государственного университета. Эксперименты выполнены на 3-4 месячных белых беспородных крысах обоего пола (количество – 190, масса 166±10), самцах линии Wistar (количество – 18, масса 156±9). Готовили 0,3% раствор Серпистена в 0,9% растворе NaCl. В качестве контроля использовали 0,9% NaCl (плацебо). Серпистен и изотонический раствор вводили внутримышечно. Кровь брали методом тотального обескровливания путем декапитации животных после легкого хлороформного наркоза.
Статистическую обработку проводили с использованием параметрических и непараметрических методов с вычислением средней арифметической, среднеквадратичного отклонения, ошибки средней достоверности различий оценивали по t-критерию Стьюдента. Пример 1 Иммобилизационный стресс в течение 30 минут увеличивал ФГА-вызванную агрегацию эритроцитов у крыс (n=30) в среднем на 39% на 10 минуте наблюдения (р<0,01), на 23% – на 20 минуте наблюдения (р<0,05). Серпистен, в дозе 20 мг/кг массы животного, введенный за 24 часа до забоя, не изменял агрегационных свойств эритроцитов. Серпистен, в дозе 20 мг/кг, введенный за 24 часа до иммобилизационного стресса, снижал фитогемагглютинацию эритроцитов, увеличенную стрессом, в среднем на 19% на 10 минуте наблюдения; на 14% – на 20 минуте наблюдения (р<0,05). Пример 2 Введение внутримышечно 0,9% раствора NaCl (растворитель Серпистена) за 2 часа до забоя крысы увеличивало реакцию агглютинации эритроцитов на 10 минуте на 29% (р<0,05), на 20 минуте – на 14% (р<0,05) по сравнению с интактными крысами. Введение 0,9% раствора NaCl многократно в течение 5 дней увеличивало реакцию агглютинации эритроцитов на 26% на 10 минуте наблюдения (р<0,05), на 14% на 20 минуте наблюдения (р<0,1) по сравнению с интактными крысами. Серпистен, введенный за 2 часа до забоя, не изменял агрегационных свойств эритроцитов (снижение на 4%) по сравнению с интактными животными. Многократное введение Серпистена (5 дней) снижало реакцию агглютинации эритроцитов на 16% на 10-20 минутах наблюдения по сравнению с интактными крысами ( стабилизация мембраны, увеличение устойчивости к ФГА). По сравнению с контрольными крысами (введение плацебо – 0,9% NaCl) Серпистен снижал ФГА-вызванную агрегацию эритроцитов на 33% на 10 минуте наблюдения (р<0,01), на 21% на 20 минуте наблюдения (р<0,01). Таким образом, многократное введение Серпистена (5 дней в малой дозе – 5 мг/кг) не только снижало отрицательное действие своего растворителя (0,9% NaCl), но и понижало агрегацию эритроцитов, вызванную ФГА, ниже уровня интактных животных. Пример 3 Функциональная активность САС (АК), оцениваемая по методу (Патент РФ 2310196), при введении Серпистена в дозе 20 мг/кг за 2 часа до забоя крыс составляла для самцов 61%, для самок – 65%; при многократном введении Серпистена (5 дней) АК составляла для самцов 60%, для самок – 62%. При АК ниже 80% САС считают неактивированной. АК при введении 0,9% раствора NaCl за 2 часа до забоя крыс оставляла у самцов 93%, у самок – 90%, при многократном введении раствора (5 дней) АК была у самцов – 90%, у самок – 93%, т.е. САС была значительно активирована. При иммобилизационном стрессе АК у самцов крыс составляла 98%. В опытах in vitro на донорской крови адренореактивность организма, оцениваемая по методу (Р.И.Стрюк, Длусская И.Г. Новый метод прогнозирования и оценки эффективности
Формула изобретения
Антиагрегационное и стресс-лимитирующее средство, содержащее действующее вещество, выделенное из надземной части растений рода Serratula семейства Asteraceae, предпочтительно листьев, собранных в фазу вегетации, массовой бутонизации или начала цветения, в качестве действующего вещества оно содержит экдистероидсодержащую субстанцию в виде смеси 20-гидроксиэкдизона в количестве не менее 75% и 25S-инокостерона в количестве не менее 10%.
|
||||||||||||||||||||||||||
6, с.779-786.4). Проверка стресс-лимитирующего действия субстанции Серпистен проводилась имитацией эффекта активации симпатоадреналовой системы (САС) in vitro. CAC является ведущей неспецифической системой адаптации, включающейся в начальный период стресс-реакции и в значительной степени определяющей уровень эмоциональной составляющей стресс-реакции и невротизации поведения. Оценка состояния САС и адренореактивности организма осуществлялась с помощью метода фитогемагглютинации в сочетании с пропранололовым тестом (Патент РФ 2310196), а также осмотического гемолиза с добавлением 
-адреноблокатора и использованием набора реактивов «