Патент на изобретение №2375056
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
(54) ЦИТОСТАТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ С АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТЬЮ
(57) Реферат:
Изобретение относится к фармакологии, ветеринарии и медицине и касается цитостатической композиции с антиоксидантной активностью, содержащей координационные соединения платины, производные аскорбиновой кислоты и фенантролина, где в качестве координационного соединения платины она содержит цисплатин, в качестве производных аскорбиновой кислоты и фенантролина – аскорбатфенантролинатный комплекс платины формулы [PtPhen2]Asc и аскорбатфенантролинатный комплекс европия с формулой EuAscNO3Phen·4H2O при следующем массовом соотношении компонентов:
2 табл., 1 ил.
Изобретение относится к координационным химическим соединениям металлов, обладающим биологической активностью, и может быть использовано в онкологии для цитостатической химиотерапии. Известна и широко используется в практике соль платины – цисплатин (цис-дихлордиаминплатина) [1]. Недостатком известного препарата является побочное токсическое действие на организм при использовании в чистом виде. Известна композиция для антибластической терапии по патенту РФ Недостатком этой композиции является высокая токсичность фенантролина, что ограничивает возможность терапевтического применения композиции для инъекций. Техническая задача изобретения – получение композиции на основе координационных соединений металлов, обладающей высокой цитостатической и антиоксидантной активностью и низким побочным токсическим влиянием на организм. Для этого желательно освободиться от наличия токсичного компонента – 1,10-фенантролин или снизить его токсическое влияние. Поставленная задача решается путем использования для приготовления композиции следующих известных компонентов: 1 – препарат платины цисплатин, 2 – аскорбатфенантролинатный комплекс платины с формулой [PtPhen2]Asc и 3 – смешанно-лигандный комплекс редкоземельного элемента европия с фенантролином и аскорбиновой кислотой с формулой EuAscNO3Phen·4H2O при массовом соотношении 1:2:3. Методы получения указанных солей редкоземельных элементов, а также цитостатическое действие [PtPhen2]Asc известны и опубликованы нами ранее [3]. Примеры биологической активности композиции и ее компонентов. Пример 1. Проведено тестирование антипролиферативного действия композиции на иммунокомпетентные клетки в реакции бластной трансформации лимфоцитов человека, стимулированных фитогемагглютинином (ФГА) после действия композиции в диапазоне концентраций 0,05-5,0 мг/мл. Оценка влияния препаратов на пролиферативную активность лимфоцитов в спонтанном и индуцированном ФГА тесте проведена в соответствии с методическими рекомендациями Фармкомитета Минздрава РФ [Ведомости фармакологического комитета, 1999, Результаты тестирования препаратов в реакции бластной трансформации лимфоцитов (РБТЛ) представлены на чертеже. В результате тестирования установлено, что заявляемая композиция в указанном выше диапазоне концентраций оказывает ингибирующее влияние на индуцированную ФГА пролиферативную активность лимфоцитов, что свидетельствует о его цитостатическом действии, не уступающему прототипу. При концентрации композиции 1,0 мг/мл и более наступает тотальное разрушение клеток. Пример 2. Проведена серия исследований цитотоксического действия заявляемой композиции на опухолевые клетки карциномы Эрлиха мышей в широком спектре концентраций (см. таблицу 1).
Из материалов таблицы 1 видно, что заявляемая композиция практически полностью подавляет жизнеспособность опухолевых клеток. Анализ данных, полученных во всех сериях опытов, позволяет заключить, что при совместном применении цисплатина, аскорбатфенантролинатных комплексов платины и европия наблюдается выраженное проявление цитостатической активности композиции, что свидетельствует о наличии канцеростатического механизма действия заявленной композиции. Пример 3. Сравнительное токсикологическое исследование компонентов заявленной композиции проведено на мышах линии BALB/c массой 18-20 г методом пробит-анализа при внутрибрюшинном введении его в физиологическом растворе. Величина LD50 аскорбатфенантролинатного комплекса европия EuAscNO3Phen·4H2O составила 610 мг/кг, а его смеси с аскорбатфенантролинатным комплексом платины в соотношении 3:2 – 520 мг/кг, тогда как LD50 1,10-фенантролина составляет 82,5 мг/кг, т.е. острое токсическое влияние на организм заявляемых компонентов в несколько раз ниже, чем у фенантролина. Дополнительно исследована антиоксидантная активность заявленной композиции. Антиоксидантную активность определяли, используя метод катодной вольтамперометрии, в частности процесс электровосстановления кислорода (ЭВ O2) [3]. Эффект оценивался по временному, или так называемому кинетическому критерию антиоксидантной активности К, который отражает эффективность взаимодействия образца с кислородными радикалами и определяется по формуле:
где К – критерий антиоксидантной активности, мкмоль/л мин; Со2 – концентрация кислорода в исходном растворе без вещества, мкмоль/л; Ii – текущее значение тока электровосстановления О2, мкА; Iнач – предельное значение тока электровосстановления О2 в отсутствие вещества в растворе, мкА; Т – время протекания процесса, мин. Антиоксидантная активность заявленной композиции представлена в таблице 2.
Здесь Сраб – рабочая концентрация препаратов, выбранная по аналогии с тестом ЭВ О2 для аскорбиновой кислоты. Из приведенных в таблице 2 значений С и К видно, что заявляемая композиция обладает антиоксидантной активностью, которая составляет сравнимую величину (50%) с показателем активности стандартного антиоксиданта – аскорбиновой кислоты. В литературных источниках отсутствуют сведения о применении заявляемой композиции в клинической практике, что свидетельствует о новизне технического решения, а неочевидность цитостатической и антиоксидантной активности композиции при сравнительно низкой токсичности позволяет говорить о соответствии его критерию «изобретательский уровень». Использованные источники информации 1. М.Д.Машковский. Лекарственные средства, т.2. М.: 2002, с.218. 2. Композиция для антибластической терапии. Патент РФ 3. Евтушенко Д.Н., Скорик Н.А., Плотников В.М. Изучение взаимодействия европия, самария и платины с аскорбиновой кислотой и 1,10-фенантролином. ЖНХ, 2002, т.47, 4. E.I.Korotkova, Y.A.Karbainov, О.А.Avramchik, А.А.Bakibaev. New electrochemical sensor for antioxidant activity determination. / In book: “Instrumental Methods of Analysis. Modern Trends and Applications. Conference Proceedings of 3-rd International conference”. ZITI, Greece, 2003, P.707-710.
Формула изобретения
Цитостатическая композиция с антиоксидантной активностью, содержащая координационные соединения платины, производные аскорбиновой кислоты и фенантролина, отличающаяся тем, что в качестве координационного соединения платины выбран цисплатин, а производные аскорбиновой кислоты и фенантролина представлены аскорбатфенантролинатным комплексом платины формулы [PtPhen2]Asc и аскорбатфенантролинатным комплексом европия формулы EuAscNO3Phen·4·H2O при следующем массовом соотношении компонентов:
РИСУНКИ
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
2192861, 2001 г., при получении которой используют координационные соединения платины, например цисплатин, а также 1,10-фенантролин и аскорбиновую кислоту при весовом соотношении 1:1:1-1:1:10 (композиция выбрана за прототип).
