|
(21), (22) Заявка: 2008137050/15, 15.09.2008
(24) Дата начала отсчета срока действия патента:
15.09.2008
(46) Опубликовано: 10.12.2009
(56) Список документов, цитированных в отчете о поиске:
RU 2192861 C1, 20.11.2002. RU 20005136759 A, 10.04.2006. RU 2270045 C1, 20.02.2006. WO 93/07123, A1, 15.04.1993.
Адрес для переписки:
634050, г.Томск, пр-кт Ленина, 36, Томский госуниверситет, отдел интеллектуальной собственности, зав. отделом В.Н. Воронину
|
(72) Автор(ы):
Плотников Владимир Михайлович (RU), Ротов Василий Александрович (RU), Плотников Евгений Владимирович (RU), Скорик Нина Алексеевна (RU)
(73) Патентообладатель(и):
Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Томский государственный университет (ТГУ) (RU)
|
(54) ЦИТОСТАТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ С АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТЬЮ
(57) Реферат:
Изобретение относится к фармакологии, ветеринарии и медицине и касается цитостатической композиции с антиоксидантной активностью, содержащей координационные соединения платины, производные аскорбиновой кислоты и фенантролина, где в качестве координационного соединения платины она содержит цисплатин, в качестве производных аскорбиновой кислоты и фенантролина – аскорбатфенантролинатный комплекс платины формулы [PtPhen2]Asc и аскорбатфенантролинатный комплекс европия с формулой EuAscNO3Phen·4H2O при следующем массовом соотношении компонентов:
цисплатин |
1 |
аскорбатфенантролинатный комплекс платины |
2 |
аскорбатфенантролинатный комплекс европия |
3. |
2 табл., 1 ил.
Изобретение относится к координационным химическим соединениям металлов, обладающим биологической активностью, и может быть использовано в онкологии для цитостатической химиотерапии.
Известна и широко используется в практике соль платины – цисплатин (цис-дихлордиаминплатина) [1].
Недостатком известного препарата является побочное токсическое действие на организм при использовании в чистом виде.
Известна композиция для антибластической терапии по патенту РФ 2192861, 2001 г., при получении которой используют координационные соединения платины, например цисплатин, а также 1,10-фенантролин и аскорбиновую кислоту при весовом соотношении 1:1:1-1:1:10 (композиция выбрана за прототип).
Недостатком этой композиции является высокая токсичность фенантролина, что ограничивает возможность терапевтического применения композиции для инъекций.
Техническая задача изобретения – получение композиции на основе координационных соединений металлов, обладающей высокой цитостатической и антиоксидантной активностью и низким побочным токсическим влиянием на организм. Для этого желательно освободиться от наличия токсичного компонента – 1,10-фенантролин или снизить его токсическое влияние.
Поставленная задача решается путем использования для приготовления композиции следующих известных компонентов: 1 – препарат платины цисплатин, 2 – аскорбатфенантролинатный комплекс платины с формулой [PtPhen2]Asc и 3 – смешанно-лигандный комплекс редкоземельного элемента европия с фенантролином и аскорбиновой кислотой с формулой EuAscNO3Phen·4H2O при массовом соотношении 1:2:3.
Методы получения указанных солей редкоземельных элементов, а также цитостатическое действие [PtPhen2]Asc известны и опубликованы нами ранее [3].
Примеры биологической активности композиции и ее компонентов.
Пример 1. Проведено тестирование антипролиферативного действия композиции на иммунокомпетентные клетки в реакции бластной трансформации лимфоцитов человека, стимулированных фитогемагглютинином (ФГА) после действия композиции в диапазоне концентраций 0,05-5,0 мг/мл. Оценка влияния препаратов на пролиферативную активность лимфоцитов в спонтанном и индуцированном ФГА тесте проведена в соответствии с методическими рекомендациями Фармкомитета Минздрава РФ [Ведомости фармакологического комитета, 1999, 1].
Результаты тестирования препаратов в реакции бластной трансформации лимфоцитов (РБТЛ) представлены на чертеже.
В результате тестирования установлено, что заявляемая композиция в указанном выше диапазоне концентраций оказывает ингибирующее влияние на индуцированную ФГА пролиферативную активность лимфоцитов, что свидетельствует о его цитостатическом действии, не уступающему прототипу. При концентрации композиции 1,0 мг/мл и более наступает тотальное разрушение клеток.
Пример 2. Проведена серия исследований цитотоксического действия заявляемой композиции на опухолевые клетки карциномы Эрлиха мышей в широком спектре концентраций (см. таблицу 1).
Таблица 1 |
Результаты определения цитотоксического действия заявляемой композиции на опухолевые клетки карциномы Эрлиха через 48 часов инкубации |
Дозы |
Процент жизнеспособных клеток (%) |
Контроль (без препарата) |
0,05 |
10 |
87 |
0,5 |
0 |
87 |
5,0 |
0 |
87 |
Из материалов таблицы 1 видно, что заявляемая композиция практически полностью подавляет жизнеспособность опухолевых клеток. Анализ данных, полученных во всех сериях опытов, позволяет заключить, что при совместном применении цисплатина, аскорбатфенантролинатных комплексов платины и европия наблюдается выраженное проявление цитостатической активности композиции, что свидетельствует о наличии канцеростатического механизма действия заявленной композиции.
Пример 3. Сравнительное токсикологическое исследование компонентов заявленной композиции проведено на мышах линии BALB/c массой 18-20 г методом пробит-анализа при внутрибрюшинном введении его в физиологическом растворе. Величина LD50 аскорбатфенантролинатного комплекса европия EuAscNO3Phen·4H2O составила 610 мг/кг, а его смеси с аскорбатфенантролинатным комплексом платины в соотношении 3:2 – 520 мг/кг, тогда как LD50 1,10-фенантролина составляет 82,5 мг/кг, т.е. острое токсическое влияние на организм заявляемых компонентов в несколько раз ниже, чем у фенантролина.
Дополнительно исследована антиоксидантная активность заявленной композиции. Антиоксидантную активность определяли, используя метод катодной вольтамперометрии, в частности процесс электровосстановления кислорода (ЭВ O2) [3]. Эффект оценивался по временному, или так называемому кинетическому критерию антиоксидантной активности К, который отражает эффективность взаимодействия образца с кислородными радикалами и определяется по формуле:

где К – критерий антиоксидантной активности, мкмоль/л мин;
Со2 – концентрация кислорода в исходном растворе без вещества, мкмоль/л;
Ii – текущее значение тока электровосстановления О2, мкА;
Iнач – предельное значение тока электровосстановления О2 в отсутствие вещества в растворе, мкА;
Т – время протекания процесса, мин.
Антиоксидантная активность заявленной композиции представлена в таблице 2.
Таблица 2 |
Исследуемый препарат |
Сраб |
К |
(г/л) |
(мкмоль/л·мин) |
Аскорбиновая кислота |
5·10-4 |
1,4 |
Заявляемая композиция |
5·10-4 |
0,7 |
Здесь Сраб – рабочая концентрация препаратов, выбранная по аналогии с тестом ЭВ О2 для аскорбиновой кислоты.
Из приведенных в таблице 2 значений С и К видно, что заявляемая композиция обладает антиоксидантной активностью, которая составляет сравнимую величину (50%) с показателем активности стандартного антиоксиданта – аскорбиновой кислоты.
В литературных источниках отсутствуют сведения о применении заявляемой композиции в клинической практике, что свидетельствует о новизне технического решения, а неочевидность цитостатической и антиоксидантной активности композиции при сравнительно низкой токсичности позволяет говорить о соответствии его критерию «изобретательский уровень».
Использованные источники информации
1. М.Д.Машковский. Лекарственные средства, т.2. М.: 2002, с.218.
2. Композиция для антибластической терапии. Патент РФ 2192861, МКИ А61К 31/4745, опубл. 2002.11.20.
3. Евтушенко Д.Н., Скорик Н.А., Плотников В.М. Изучение взаимодействия европия, самария и платины с аскорбиновой кислотой и 1,10-фенантролином. ЖНХ, 2002, т.47, 11, с.1877-1882.
4. E.I.Korotkova, Y.A.Karbainov, О.А.Avramchik, А.А.Bakibaev. New electrochemical sensor for antioxidant activity determination. / In book: “Instrumental Methods of Analysis. Modern Trends and Applications. Conference Proceedings of 3-rd International conference”. ZITI, Greece, 2003, P.707-710.
Формула изобретения
Цитостатическая композиция с антиоксидантной активностью, содержащая координационные соединения платины, производные аскорбиновой кислоты и фенантролина, отличающаяся тем, что в качестве координационного соединения платины выбран цисплатин, а производные аскорбиновой кислоты и фенантролина представлены аскорбатфенантролинатным комплексом платины формулы [PtPhen2]Asc и аскорбатфенантролинатным комплексом европия формулы EuAscNO3Phen·4·H2O при следующем массовом соотношении компонентов:
цисплатин |
1 |
аскорбатфенантролинатный комплекс платины |
2 |
аскорбатфенантролинатный комплекс европия |
3 |
РИСУНКИ
|
|