Патент на изобретение №2375051
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
(54) ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ И ЛЕЧЕНИЯ ЭНТОМОЗОВ И ГЕЛЬМИНТОЗОВ У ЖВАЧНЫХ ЖИВОТНЫХ
(57) Реферат:
Изобретение относится ветеринарии, может быть использовано для одновременной специфической профилактики сибирской язвы и профилактики либо терапии оводовых болезней, гельминтозов и клещевых инвазий. Фармацевтическая композиция содержит суспензию спор вакцинного сибиреязвенного штамма «55-ВНИИВВиМ» и препарат Иверсект или Новомек с концентрацией ивермектина 1% в заданном соотношении. Изобретение позволяет у однократно привитого животного повысить иммунитет в отношении возбудителя сибирской язвы и повысить терапевтический эффект против энтомозов и гельминтозов. 6 табл.
Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к применению биологических препаратов для одновременной специфической профилактики сибирской язвы и профилактики либо терапии оводовых болезней, гельминтозов и клещевых инвазий. В настоящее время известна вакцина против сибирской язвы, представляющая собой суспензию живых спор бескапсульного авирулентного вакцинного сибиреязвенного штамма «55-ВНИИВВиМ» [1], и препараты широкого спектра действия Иверсект и Новомек, убивающие нематод, клещей, насекомых, личинок оводов, действующим началом которых является ивермектин [2, 3]. Вакцина и противопаразитарные препараты используются независимо друг от друга и, как правило, не одномоментно, причем перед вакцинацией рекомендуется проведение обработки животных против гельминтов. Совпадение сроков иммунизации против сибирской язвы, ранней и поздней фармакотерапии эдемагеноза (сентябрь-ноябрь и март-май соответственно) свидетельствует о целесообразности создания фармацевтической композиции для комплексной лечебно-профилактической обработки животных. Использование этих препаратов в отдельности требует удвоенного количества трудозатрат (особенно в оленеводстве) и оказывает двойное стрессовое воздействие на организм животных. Борьба с гельминтозами может проводиться в разное время года, однако в настоящее время противогельминтозные мероприятия практически не проводятся. В литературе описаны результаты исследований по разработке ассоциированных препаратов на основе вакцины против сибирской язвы с использованием антигенов бактериальной и вирусной природы: против сибирской язвы и оспы овец [4, 5]; против сибирской язвы и ящура [6]; сибирской язвы и некробактериоза [7]; сибирской язвы и чумы крупного рогатого скота [8]. Известны также комплексные препараты против гельминтов и оводовых личинок, в состав которых входят одновременно два вещества, например ивермектин и клозантел [9]. Материалов по созданию комплексного препарата или использованию фармацевтической композиции против сибирской язвы, энтомозов и гельминтозов, обладающих высокой иммуногенной активностью (против сибирской язвы) и терапевтической эффективностью (против личинок овода, клещей, нематод), ареактогенностью, безвредностью в доступной литературе не обнаружено. Применение предлагаемой фармацевтической композиции в животноводстве позволит избежать указанных недостатков раздельного применения противосибиреязвенных и противопаразитарных препаратов. Целью изобретения является создание фармацевтической композиции для одновременной лечебно-профилактической обработки жвачных животных против сибирской язвы, энтомозов и гельминтозов, обладающей высокой иммуногенностью, ларвоцидной и противогельминтной эффективностью, ареактогенностью, безвредностью, индуцирующей формирование напряженного иммунитета, обеспечивающего защиту животных от заражения культурой вирулентного штамма возбудителя сибирской язвы, вызывающей гибель гельминтов, клещей и личинок подкожных оводов. Указанная цель достигается фармацевтической композицией для профилактики сибирской язвы и лечения энтомозов и гельминтозов у жвачных животных, содержащей противопаразитарный препарат Иверсект или Новомек с концентрацией инвермектина 1% и суспензию спор вакцинного сибиреязвенного штамма 55-ВНИИВВиМ при следующем соотношении этих компонентов в композиции, об.%:
Биологическая активность приготовленной таким образом фармацевтической композиции составляет: по сибиреязвенному компоненту 10,0-25,0 млн спор/см3, по противопаразитарному компоненту 9,66-9,95 мг/см3. В результате проведенных экспериментов установлено, что предлагаемая фармацевтическая композиция создает иммунитет у однократно привитых северных оленей через 10-14 дней против сибирской язвы длительностью не менее 12 месяцев, вызывает гибель личинок подкожного овода и гельминтов. При этом по иммуногенности она не уступает моновакцине против сибирской язвы животных. Эффективность лечебно-профилактического действия предлагаемой фармацевтической композиции проверена в производственных испытаниях в период проведения массовых обработок оленей против личинок подкожного овода на группе северных оленей (115 голов в возрасте около 1 года) в ООО «Северный» и ПСК «Оленевод» (г.Воркута). Пораженность не обрабатываемого противопаразитарными препаратами поголовья оленей для эдемагеноза и гельминтозов составляет 100% и 85% соответственно, при этом только зараженность эхинококкозом и цистицеркозом, при которых пораженные паренхиматозные органы приходится выбраковывать, достигает 25-30% общего поголовья. Обработанные фармацевтической композицией животные оставались клинически здоровыми, поствакцинальных осложнений не наблюдалось. Через 14 дней и 12 месяцев после вакцинации выборочно у 10 животных были взяты пробы крови для исследования сывороток на наличие специфических антител. Результаты определения противосибиреязвенных антител показали, что у всех животных в крови присутствуют специфические антитела в титрах 1:160-1:640, уровень которых обеспечивает защиту животных от заражения сибирской язвой. Среди привитых животных случаев заболевания сибирской язвой не наблюдалось. Применение предлагаемой фармацевтической композиции в животноводстве позволит существенно снизить трудозатраты ветеринарных специалистов, уменьшить стрессовое воздействие на организм животных при проведении прививок, снизить пораженность поголовья эдемагенозом, цефеномиозом и гельминтозами, увеличить резистентность к другим болезням, повысить привесы и качество продукции. Примеры конкретного выполнения: Пример 1 К 96,6 см3 препарата Иверсект с концентрацией ивермектина 10 мг/см3 добавляют 3,4 см3 суспензии спор вакцинного сибиреязвенного штамма «55 ВНИИВВиМ» с концентрацией 662 млн спор/см3. Смесь тщательно перемешивают и используют для введения животным. 1 мл приготовленной таким образом фармацевтической композиции содержит 22,5 млн спор/см3 вакцинного сибиреязвенного штамма «55 ВНИИВВиМ» и 9,66 мг/см3 ивермектина. Фармацевтическая композиция имеет вид прозрачной, слегка опалесцирующей жидкости. Результаты испытаний совместимости и сохраняемости приготовленной таким образом фармацевтической композиции приведены в таблицах 1 и 2. Оценку споростатического и спороцидного действия препарата Иверсект на В. anthracis, проводили в соответствии с «Методическими указаниями по отбору, испытаниям и оценке антивирусных и антибактериальных химиопрепаратов среди соединений различных химических классов», разработанными во ВНИИВВиМ и рассмотренными и одобренными на Ученом совете ВНИИВВиМ и секции Инфекционной патологии животных Отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии в 2002 г. [10]. Как видно из данных таблицы 1, препарат Иверсект не обладает споростатическим и спороцидным действием.
Изучена сохраняемость фармацевтической композиции при температурах 4±2°С (рекомендуемая температура хранения), 18±2°С и 37±2°С.
Как видно из данных таблицы, при рекомендуемой температуре хранения (4±2°С) активность спорового компонента сохраняется на исходном уровне в течение не менее 2-х недель, как в фармацевтической композиции, так и в рабочем разведении моновакцины. Пример 2 В экспериментах на морских свинках и северных оленях показано, что фармацевтическая композиция, приготовленная как описано в примере 1, не уступает по иммуногенности моновакцине против сибирской язвы животных. Результаты сравнительной проверки иммуногенности фармацевтической композиции и сибиреязвенной моновакцины на морских свинках приведены в таблице 3.
Как видно из представленных данных, процент защиты морских свинок, зараженных референс-заражающей культурой возбудителя сибирской язвы, штамм М-71 2-й вакцины Ценковского, через 10-12 суток после вакцинации, составил 100%. Все контрольные (интактные) животные после заражения культурой штамма М-71 погибли. Таким образом, при введении морским свинкам фармацевтической композиции у животных формируется полноценный противосибиреязвенный иммунитет, не отличающийся от такового при использовании противосибиреязвенной вакцины. После введения фармацевтической композиции северным оленям (n=5) местных реакций и осложнений не наблюдалось. Отклонения в клиническом состоянии животных в течение всего срока наблюдения отсутствовали. Данные динамики клинических показателей представлены в таблице 4.
Через 10 дней у всех подопытных оленей брали пробы сыворотки крови для исследования на наличие противосибиреязвенных антител в реакции непрямой гемагглютинации (РИГА). Титры противосибиреязвенных антител колебались в пределах 1:160-1:640, что соответствует титрам антител после применения сибиреязвенной моновакцины. При неполном гельминтологическом вскрытии по К.И.Скрябину в легких и желудочно-кишечном тракте оленей, обработанных фармацевтической композицией, жизнеспособные гельминты не обнаружены. При вскрытии оленей, привитых моновакциной против сибирской язвы и не обработанных противопаразитарными препаратами, в 80% случаев обнаружены гельминты в желудочно-кишечном тракте и в 50% случаев в легких. Пример 3 К 99,5 см3 препарата Новомек с концентрацией ивермектина 10 мг/см3 добавляют 0,5 см3 суспензии спор вакцинного сибиреязвенного штамма «55 ВНИИВВиМ» с концентрацией 2,46 млрд спор/см3. Смесь тщательно перемешивают и используют для введения животным. 1 мл приготовленной таким образом фармацевтической композиции содержит 12,3 млн спор/см3 вакцинного сибиреязвенного штамма «55 ВНИИВВиМ» и 9,95 мг/см3 ивермектина. Фармацевтическая композиция имеет вид прозрачной, слегка опалесцнрующей жидкости.
Из представленных в таблице данных видно, что концентрация спор вакцинного штамма 55-ВНИИВВиМ В. anthracis при совместном хранении с препаратом Новомек в течение трех недель при 4°С не изменяется. В экспериментах на морских свинках, телятах и овцах показано, что фармацевтическая композиция не уступает по иммуногенности моновакцине против сибирской язвы. Результаты проверки иммуногенности фармацевтической композиции приведены в таблице 6. Процент защиты морских свинок, зараженных референс-заражающей культурой возбудителя сибирской язвы штамм М-71, через 10-12 суток после вакцинации составил для фармацевтической композиции 100%, а для сибиреязвенной моновакцины 86,7%. Через 21 сутки после введения вакцины у телят титр противосибиреязвенных антител в РНГА составил 1:160-1:320, у овец-1:80-1:320.
В результате проведенных экспериментов установлено, что предлагаемая фармацевтическая композиция создает у однократно привитого крупного рогатого скота напряженный иммунитет к сибирской язве продолжительностью не менее 12 месяцев и не уступает выпускаемой в настоящее время моновакцине против этой болезни. При вскрытии опытных животных (крупный рогатый скот, овцы), убитых через 14 и 21 сутки после обработки фармацевтической композицией, в желудочно-кишечном тракте и легких жизнеспособные гельминты не обнаружены. Пример 4 В период массовых обработок северных оленей против личинок подкожного овода (ранняя химиотерапия) изучена переносимость, безвредность и лечебно-профилактическая эффективность фармацевтической композиции в опытах на группе оленей в количестве 110 голов. Титры противосибиреязвенных антител в сыворотках крови случайно выбранных из этой группы животных составили 1:160-1:320. Через год после обработки в ноябре – декабре 11 оленей из опытной группы было убито, шкуры и туши оленей обследованы на предмет пораженности личинками подкожного овода. Эффективность фармацевтической композиции против носоглоточного и подкожного овода составила 98,8-100%. Таким образом, предлагаемая фармацевтическая композиция создает у однократно привитых животных напряженный иммунитет против сибирской язвы и обладает терапевтическим эффектом против энтомозов и гельминтозов. Источники информации 1. Патент РФ 4. Лихачев Н.В., Колесов С.Г., Борисович Ю.Ф., Преснов И.И. “Ассоциированная вакцинация овец против сибирской язвы и оспы”. Тр. ГНКИ ветпрепаратов, 1967. – Т.14. – С.35-44. 5. Патент РФ 2181296, МПК А61К 39/295, А61К 39/07, 39/275. Ассоциированная вакцина против сибирской язвы и оспы овец. / В.М.Балышев, Ю.О.Селянинов, И.А.Бакулов, А.Н.Никулин, Н.С.Косяченко, Т.Ф.Горшкова, В.И.Жестерев, Е.Н.Глухарева, Ф.А.Бадаев (РФ). – 6. Патент РФ 7. Патент РФ 2286174, МПК А61К 39/116, А61Р 31/04. Ассоциированная вакцина против сибирской язвы и некробактериоза животных. / Ю.О.Селянинов, О.И.Соломаха, А.В.Коваленко, Л.В.Кириллов, Е.Г.Лавченко, В.М.Котляров, Е.С.Казановский, Т.Е.Фирсова, И.Д.Гнездилов (РФ). – 8. Патент РФ 2286173, МПК А61К 39/07, А61К 39/187, А61Р 31/00. Ассоциированная вакцина против сибирской язвы и чумы крупного рогатого скота. /Ю.О.Селянинов, Н.В.Грехова, Т.Ф.Горшкова, Н.С.Косяченко, Е.Н.Глухарева, И.Ю.Егорова, В.И.Жестерев (РФ). – 9. Сафиуллин P.P. Фармако-токсикологическая характеристика и терапевтическая эффективность комплексного препарата на основе ивермектина и клозантела при паразитарных болезнях крупного рогатого скота. Автореферат дисс. 10. Методические указания по отбору, испытаниям и оценке антивирусных и антибактериальных химиопрепаратов среди соединений различных химических классов. Покров, 2002.
Формула изобретения
Фармацевтическая композиция для профилактики сибирской язвы и лечения энтомозов и гельминтозов у жвачных животных, содержащая противопаразитарный препарат Иверсект или Новомек с концентрацией ивермектина 1% и суспензию спор вакцинного сибиреязвенного штамма 55-ВНИИВВиМ при следующем соотношении этих компонентов в композиции, об.%:
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
2095409. Способ изготовления вакцины против сибирской язвы животных. / Бакулов И.А., Гаврилов В.А., Селиверстов В.В. и др. (РФ). 1997.
канд. биол. наук. М., 2003.