Патент на изобретение №2373905

(54) ИНСТРУМЕНТ ДЛЯ ДОЗИРОВАННОГО ВЗЯТИЯ КЛЕТОЧНОГО МАТЕРИАЛА С КОНЪЮНКТИВЫ “ГЛАЗНОЙ ПОВЕРХНОСТИ”

(57) Реферат:

Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии. Инструмент содержит целлюлозно-ацетатный фильтр, корпус в форме полого цилиндра, глухо закрытого с торца, пружину, ориентированную вдоль оси цилиндра, закрепленную перед торцом на фиксаторе. Пружина откалибрована на ее сжатие при усилии 15 граммов. С рабочего конца корпус имеет шток с упорной втулкой – ограничителем движения штока, опирающийся на пружину На конце штока расположен сменный стерилизуемый наконечник с резьбой. На внешней стороне наконечника при помощи сменного кольца зафиксирован целлюлозно-ацетатный фильтр. Изобретение обеспечивает адекватные условия получения клеточного материала с конъюнктивы «глазной поверхности», что позволяет объективизировать диагностику, просто и оперативно провести в динамике контроль за результатами лечения. Устройство легко стерилизуется, конструктивно удобно в использовании, так как дозированное усилие в 15 грамм при переносе фильтра на конъюнктиву осуществляется просто однократным прикосновением к конъюнктиве «глазной поверхности» в течение 5 секунд. Кроме этого, использование разработанного инструмента позволяет сделать процедуру забора клеточного материала конъюнктивы более безопасной, так как исключается возможность травматизации конъюнктивы при извлечении целлюлозно-ацетатного фильтра. 1 ил., 1 табл.

Предлагаемое изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии, и может быть использовано в клинической практике для верификации морфологических изменений конъюнктивы «глазной поверхности», оптимизации диагностики синдрома «сухого глаза», а также для контроля эффективности терапевтических мероприятий.

2. – P.179-193].

Одним из направлений верификации морфологических изменений тканей «глазной поверхности» при синдроме «сухого глаза» является импрессионная цитология конъюнктивы с использованием целлюлозно-ацетатных фильтров Millipore с размером поры от 0,22 до 0,45 мкм [Vadrevu V.L. et al. Enhancement to the cjnjunctival impression cytology technique and examples of applications in a clinico-biocheical study of dry eye. – CLAO J., 1994. – Vol.20; 1. – P.59-63; Singh R. et al. Impression cytology of the ocular surface. – Br. J. of Ophthalmol, 2005. – Vol.89; 7. – P.1655-1659]. После забора материала путем прижатия фильтра к слизистой оболочке отпечатки эпителиальных клеток фиксируются и окрашиваются либо непосредственно на фильтровальной бумаге, либо после перенесения отпечатка на предметное стекло, затем проводятся различные варианты визуального морфометрического анализа.

В различных модификациях фильтровальную бумагу прижимают к конъюнктиве «глазной поверхности» стеклянной палочкой или поверхностью «головки» тонометра Гольдмана, при этом авторы описывают оказываемое на ткани давление различными субъективными терминами, характеризуя его как «нежное прижатие» или «легкое давление» [Murube J. Impression cytology on conjunctiva and cornea in dry eye patients establishes a correlation between squamous metaplasia and dry eye clinical severity. – Eur. J. Ophthalmol., 2003. – Vol 13; 2. – P.115-127; Singh R. et al. Impression cytology of the ocular surface. – Br. J. Of Ophthalmol, 2005. – Vol.89; 7. – P.1655-1659].

Недостатком данного подхода является недостаточная дозированность забора клеточного материала из-за отсутствия объективных показателей необходимого усилия компрессии (прижатия) фильтровальной бумаги к конъюнктиве «глазной поверхности», что может быть причиной недостаточной воспроизводимости результатов исследования.

Таким образом, приведенные данные обусловливают актуальность оптимизации импрессионной цитологии, а именно разработку инструмента для дозированного взятия клеточного материала конъюнктивы «глазной поверхности», с целью повышения воспроизводимости результатов исследования.

За ближайший аналог взятия клеточного материала принята импрессионная цитология в модификации Singh R. et al. (2005) [Singh R. et al. Impression cytology of the ocular surface. – Br. J. of Ophthalmol, 2005. – Vol.89; 7. – P.1655-1659]. Забор клеток конъюнктивы проводят следующим образом: целлюлозно-ацетатный фильтр помещают на конъюнктиву глаза пинцетом, затем осуществляют его «нежное прижатие» к слизистой оболочке «головкой» тонометра Гольдмана в течение 5-10 с, после чего фильтровальную бумагу извлекают из конъюнктивальной полости пинцетом.

Недостатки: заявителями не выявлены какие-либо инструменты, обеспечивающие стандартное единообразное прижатие целлюлозно-ацетатного фильтра к конъюнктиве «глазной поверхности» с приложением одинакового усилия компрессии, за исключением использования «головки» тонометра Гольдмана. Необходимое усилие прижатия целлюлозно-ацетатного фильтра к конъюнктиве глазной поверхности описывается авторами субъективным термином «нежное прижатие» и не имеет какого-либо объективного количественного выражения. Указанная особенность может приводить к недостаточной воспроизводимости полученных результатов.

Кроме этого, при указанном подходе взятия клеточного материала требуется последовательное трехэтапное использование двух инструментов: пинцета для помещения целлюлозно-ацетатного фильтра на поверхность конъюнктивы, «головки» тонометра Гольдмана для прижатия фильтра к слизистой, пинцета для удаления фильтра с поверхности конъюнктивы. Указанная особенность, с одной стороны, может снижать воспроизводимость результатов исследования, а с другой, не исключает ятрогенное повреждение конъюнктивы «глазной поверхности» браншами пинцета при попытке захвата края целлюлозно-ацетатного фильтра, плотно прижатого к поверхности слизистой оболочки.

Задачи:

1. Разработать инструмент для дозированного взятия клеточного материала с конъюнктивы «глазной поверхности».

2. Обеспечить адекватную воспроизводимость взятия клеточного материала конъюнктивы «глазной поверхности».

Сущность изобретения: разработанный заявителями инструмент для дозированного взятия клеточного материала имеет корпус в форме полого цилиндра, глухо закрытого с торца, пружину, ориентированную вдоль оси цилиндра, закрепленную перед торцом на фиксаторе, причем пружина откалибрована на ее сжатие при усилии 15 граммов, с рабочего конца корпус имеет шток с упорной втулкой-ограничителем движения штока, опирающийся на пружину, на конце штока расположен сменный стерилизуемый наконечник с резьбой, на внешней стороне наконечника при помощи сменного кольца зафиксирован целлюлозно-ацетатный фильтр.

Техническим результатом изобретения является обеспечение адекватных условий получения клеточного материала с конъюнктивы «глазной поверхности», что позволяет объективизировать диагностику, просто и оперативно провести в динамике контроль за результатами лечения. Устройство легко стерилизуется, конструктивно удобно в использовании, так как дозированное усилие в 15 грамм при переносе фильтра на конъюнктиву осуществляется просто однократным прикосновением к конъюнктиве «глазной поверхности» в течение 5 секунд.

Кроме этого, использование разработанного инструмента позволяет сделать процедуру забора клеточного материала конъюнктивы более безопасной, так как исключается возможность травматизации конъюнктивы при извлечении целлюлозно-ацетатного фильтра браншами пинцета, что не исключено при проведении манипуляции с помощью известных приемов.

Для лучшего понимания предлагаемый инструмент для дозированного взятия клеточного материала конъюнктивы «глазной поверхности» показан на чертеже, где: 1 – корпус; 2 – шток; 3 – пружина; 4 – упорная втулка; 5 – фиксатор пружины; 6 – торец; 7 – сменный стерилизуемый наконечник; 8 – полоска целлюлозно-ацетатного фильтра; 9 – сменное стерилизуемое кольцо для фиксации фильтра. Все элементы инструмента выполнены из нержавеющей стали 12Х18Н10Т.

Инструмент для дозированного взятия клеточного материала с конъюнктивы «глазной поверхности» используют следующим образом. Забор клеточного материала проводят после однократной инстилляции в конъюнктивальную полость 0,4% раствора оксибупрокаина («Инокаин»). Веки исследуемого глаза фиксируют пальцами левой руки врача-исследователя. Корпус инструмента 1 удерживается тремя пальцами правой руки исследователя (большим, указательным и средним); безымянный палец и мизинец правой руки врача фиксируют на окологлазничной области пациента. Предварительно, на внешней поверхности сменного стерилизуемого наконечника 7 при помощи сменного стерилизуемого кольца 9 фиксируют стерильная полоска целлюлозно-ацетатного фильтра 8 марки НАТН размером 10×8 мм (корпорации Millipore). Полоску стерильной фильтровальной бумаги 8, закрепленную на сменном наконечнике 7, прижимают к конъюнктиве «глазной поверхности». При этом шток инструмента 2 за счет сжатия пружины 3, фиксированной на фиксаторе пружины 5, полностью погружается в корпус инструмента 1. Полный ход штока 2 до контакта сменного наконечника 7 и упорной втулки 4 обеспечивает приложение к конъюнктиве глазной поверхности усилия, равного 15 граммам. Необходимое время прижатия целлюлозно-ацетатного фильтра к конъюнктиве «глазной поверхности» – 5 секунд.

Таким образом, разработанный инструмент позволяет в течение всего времени исследования оказывать равномерное усилие – 15 грамм – на конъюнктиву «глазной поверхности». После пятисекундной дозированной компрессии фильтровальную бумагу извлекают с поверхности конъюнктивы вместе с инструментом. В глаз пациента инсталлируют капли антибиотика ципрофлоксацина 0,3%.

В отличие от известных приемов усилие компрессии стандартизировано, так как имеет объективное количественное выражение (прикладываемая сила – 15 грамм). Фиксация фильтровальной бумаги на сменной стерилизуемой головке инструмента позволяет упростить манипуляцию и сделать ее более безопасной для пациента. В известных аналогах в ходе исследования требуется поочередное трехэтапное использование двух инструментов: пинцета для помещения целлюлозно-ацетатного фильтра на конъюнктиву, «головки» тонометра Гольдмана для «нежного прижатия» фильтра к конъюнктиве, пинцета для извлечения фильтра с поверхности слизистой оболочки «глазной поверхности». При этом возможно ятрогенное повреждение конъюнктивы, так как при захвате края целлюлозно-ацетатного фильтра, плотно прижатого к слизистой глаза, не исключено захватывание браншами пинцета непосредственно ткани конъюнктивы и ее травматизация.

После этого клетки конъюнктивы переносят с полоски фильтровальной бумаги 8 на обезжиренное предметное стекло. Для этого врач-исследователь удерживает корпус инструмента 1 в правой руке, целлюлозно-ацетатный фильтр прижимают к поверхности предметного стекла. При этом шток инструмента 2 за счет сжатия пружины 3, фиксированной на фиксаторе пружины 5, полностью погружают в корпус инструмента, то есть до достижения усилия в 15 грамм. Необходимое время контакта фильтровальной бумаги и предметного стекла – 5 секунд.

Затем клетки конъюнктивы, перенесенные на предметное стекло, подсушивают на воздухе 30-40 минут и подвергают фиксации, окрашиванию и патоморфологическому исследованию.

Инструмент был апробирован в условиях клиники. Для сравнительной оценки воспроизводимости результатов забора клеточного материала конъюнктивы «глазной поверхности» было проведено взятие 7 проб по Singh R. et al. (2005), а также 7 проб с использованием разработанного инструмента. Взятие проб проводили у одного человека-добровольца в возрасте 60 лет без признаков какой-либо глазной патологии. Взятие всех образцов эпителия конъюнктивы у одного и того же человека обусловлено необходимостью обеспечить единообразие проб изучаемой ткани. Таким образом, в основную группу вошли 7 отпечатков эпителия конъюнктивы, полученных с использованием разработанного инструмента; контрольную группу составили 7 отпечатков эпителия конъюнктивы, полученные без использования указанного инструмента. В каждом отпечатке, окрашенном по Май-Грюнвальду, подсчитывали по 5 полей зрения и рассчитывали среднее количество эпителиоцитов в расчете на одно поле зрения для данного образца.

Основным критерием в оценке воспроизводимости результатов исследования был коэффициент вариации (CV). Все полученные результаты подвергали обработке методами вариационной статистики.

Результаты сравнительной оценки воспризводимости результатов забора клеточного материала конъюнктивы «глазной поверхности» с использованием разработанного инструмента и без его использования (по Singh R. et al., 2005) представлены в таблице 1.

Таким образом, при использовании разработанного инструмента для дозированного забора клеточного материала конъюнктивы «глазной поверхности» вариабельность результатов снижается в 7,8 раз, что свидетельствует о существенном повышении воспроизводимости результатов забора клеточного материала.

Формула изобретения

Инструмент для дозированного взятия клеточного материала с конъюнктивы «глазной поверхности», содержащий целлюлозно-ацетатный фильтр, отличающийся тем, что он имеет корпус в форме полого цилиндра, глухо закрытого с торца, пружину, ориентированную вдоль оси цилиндра, закрепленную перед торцом на фиксаторе, причем пружина откалибрована на ее сжатие при усилии 15 г, с рабочего конца корпус имеет шток с упорной втулкой-ограничителем движения штока, опирающийся на пружину, на конце штока расположен сменный стерилизуемый наконечник с резьбой, на внешней стороне наконечника при помощи сменного кольца зафиксирован целлюлозно-ацетатный фильтр.

РИСУНКИ