Патент на изобретение №2371919
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ БОРЬБЫ С ГРИБКОВЫМИ И БАКТЕРИАЛЬНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ
(57) Реферат:
Изобретение относится к сельскому хозяйству. В качестве фунгицида и бактерицида используют поли-N,N-диметил-3,4-диметиленпирролидиний хлорид в дозе 1 грамм действующего вещества на 1 килограмм семян или 0.5-0.6 кг/га в период вегетации. Изобретение позволяет реализовать указанное назначение. 1 з.п. ф-лы, 18 табл.
Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности борьбе со стойкими и опасными возбудителями болезней (грибковыми, бактериальными) сельскохозяйственных растений, семенного материала и сельскохозяйственных растений в период вегетации. Известно применение азолсодержащих фунгицидов (тебуконазола, тритиконазола, дифеноконазола, ципроконазола, пропиконазола, эноксиконазола) для обработки семенного материала или сельскохозяйственных растений в период вегетации [1-12]. Однако азолсодержащие фунгициды не активны в отношении патогенов рода Aspergillus, Penicillum, Botrytis, Alternaria, Trichothecium, вызывающих плесневение семян хлебных злаков, и патогенов Fusarium graminearum и Fusarium culmorum, которые образовывают микотоксины, например 4-дезоксиниваленол на хлебных злаках [7]. Грибы рода Aspergillus, Penicillum, Alternaria mucor, являются потенциальными продуцентами микотоксинов [7]. Известно применение протравителей семян и фунгицидов на основе тебуконазола (раксил, бункер, колосаль, фоликур), дифеконазола (скор, дивиденд), тритиконазола (премис, премис-двести), фунгицидов на основе эноксиконазола (рексс), пропиконазола (тият), протравливателей – дифеконазол+ципроконазол (препарат дивиденд стар), карбоксин+тирам (витарос), фунгицидов – мефонаксам+манкоцеб (ридомил голдми), которые не обладают активностью против бактериальных болезней хлебных злаков, овощных, картофеля, технических и масличных культур [1, 3, 11-12]. Распространение бактериозов на посевах зерновых, овощных и технических культур в европейской части РФ приобрело эпифитотийный характер [13-15]. Снижение урожая в зависимости от метеоусловий, сорта хлебных злаков составляет от 15 до 90%, качества (содержание клейковины) зерна с 15 до 13%, с 24 до 20%. Потери урожая проса, кукурузы, сои и гороха от бактериозов составляют от 30 до 40%, картофеля в период вегетации – от 40 до 50%. Эффективных бактерицидов в качестве протравителей нет. Протравитель максим (действующее вещество флудиоксанил) не обладает бактерицидными свойствами. Известные способы борьбы со стойкими и опасными возбудителями болезней (грибковыми, бактериальными) сельскохозяйственных растений узко направлены и недостаточно эффективны. Целью изобретения является создание способа борьбы с грибковыми и бактериальными заболеваниями сельскохозяйственных растений путем использования новых препаратов, обладающих высокими бактерицидными и фунгицидными свойствами. Поставленная цель достигается тем, что в качестве фунгицида и бактерицида в борьбе с грибковыми и бактериальными болезнями растений предлагается поли-N,N-диметил-3,4-диметиленпирролидиний хлорид (ПДМПХ). Предлагаемый препарат – новый высокоэффективный экологически безопасный полимерный бактерицид и фунгицид, не содержащий химически активных веществ, отрицательно влияющих на иммунитет и наследственный аппарат животных и человека. Препарат активен против широкого спектра вирусов, бактерий и грибов, обладает пролонгированным эффектом действия, что позволяет сокращать число необходимых обработок. ПДМПХ используют в виде водных растворов, содержание которых устанавливается в зависимости от природы и вида сельскохозяйственных культур. Способ может быть реализован любыми известными методами обработки сельскохозяйственных растений, в том числе обработка семян, обработка растений в период вегетации. Настоящая эффективность действия предлагаемого препарата достигается при использовании его в дозе 1 грамм действующего вещества на 1 килограмм семян овощных культур, 0.5 кг на 1 тонну семян зерновых культур (или 1 литр на тонну семян по препарату), 0.5-0.6 кг/га по действующему веществу для овощных культур в период вегетации. При этом происходит не только подавление болезни, но и увеличение урожайности сельскохозяйственных культур. Методы проведения испытаний и полученные результаты представлены в примерах 1-6. Пример 1. Лабораторные опыты В лабораторных опытах поли-N,N-диметил-3,4-диметилпирролидиний хлорид (ПДМПХ) испытывался на фунгицидную активность в отношении возбудителей Fusarium culmorum, Fusarium moniliforme, Aspergillus glances, Alternaria tenius и бактерицидную активность в отношении штаммов – Xanthomonas campestris и Pseudomonas atrofaciens. Для определения фунгицидной и бактерицидной активности использовали общепринятую методику [17-18]. Определяли ЕД50 по Гару [19]. В расплавленный и охлажденный до 40-50°С картофельно – глюкозный агар вводился ацетоновый раствор используемого соединения в определенной концентрации (от 4 до 5%), затем агар разливали по 20 мл в чашки Петри с внутренним диаметром 9 см. Чашки Петри оставляли при комнатной температуре до полного остывания агаризованной среды. На поверхность застывшей питательной среды уколом иглы в трех местах производился посев тест – объектов. Чашки Петри с посеянными в них тест-объектами выдерживали в термостате в течение 3-5 суток при температуре 25°С. Учитывался линейный рост (диаметр) колонии грибов или бактерий. По этому показателю сравнивали рост колоний в контроле (без введения препарата) и на среде с введенным препаратом. Торможение роста колоний рассчитывали по формуле Эббота: , где Т, % – торможение (подавление) роста по сравнению с контролем; Дк – диаметр колоний в контроле; До – диаметр колоний в опыте. По полученным данным определяли ЕД50 графически, т.е. по графику зависимости «доза – эффект» (Гар, 1963). Результаты представлены в таблице 1.
Установлено, что N,N-диметил-3,4-диметиленпирролидиний хлорид (ПДМПХ) обладает высокой фунгицидной и бактерицидной активностью. Пример 2. Полевые мелкоделяночные опыты. Бактериальные и грибковые болезни овощных культур. Поли-N,N-диметил-3,4-диметиленпирролидиний хлорид (ПДМПХ) изучался в качестве бактерицида для обработки семенного материала овощных культур (томаты, огурец, овощной горох, лук – чернушка, перец, баклажаны). Испытания проводили по общепринятым методикам [17, 18, 20, 21]. Заболевания растений: – томаты (бактериальная гниль плодов вершинная – Pseudomonas lycopersici (Burgw.)). Stapp; пятнистость черная бактериальная – Xanthomonas vesicatoria (Doidge Dowson). – огурец (пятнистость угловатая бактериальная – Pseudomonas lachrimans (E.F.Sm. et Br.) Carsner); – баклажаны (пятнистость бактериальная Pseudomonas aptata (Brown et Jamieson) Stapp); – перец (пятнистость плодов черная бактериальная – Pseudomonas capsici (Orsin) Melicova et Gorl.); – овощной горох (корневые гнили; комплекс патогенов – Aphanomyces spp, Rhizoctonia spp.); – лук «чернушка» (пятнистость бактериальная штриховидная -Xanthomonas striaeformis Thomas et Weinh; гниль красная, риоктониоз -Rhizoctonia violaceae (Tul.) Pat.). Объекты исследования (культура): томаты (сорта Викторина, Поток), овощной горох (сорт Южный), огурец (сорт Взгляд), лук «чернушка» (сорт Касатик), перец (сорт Дуэт), баклажаны (сорт Вэратик) Препарат сравнения (эталон): ТМТД, 80% СП (Тирам). Вид опыта: мелкоделяночный. Площадь опытной делянки в зависимости от культуры от 5 до 20 м2. Повторность четырехкратная. Размещение – рендомизированное. Способ обработки семян: за 3 дня до посева, расход ПДМПХ 1,0 г действующего вещества на 1 кг семян овощных культур, расход воды 25-30 мл на 1 кг семян. Данные по биологической и хозяйственной эффективности предлагаемого препарата ПДМПХ приведены в таблицах 2-8. Установлено, что ПДМПХ в опытах с томатами (сорта Викторина, Поток) (табл.2, 3) обладает высокой бактерицидной активностью 93-100%, снижает количество пораженных бактериозом плодов на 90%. По этим показателям превосходит эталон Тирам. Не оказывает отрицательного влияния на посевные качества семян, рост и развитие растений томатов (табл.4).
Результаты опытов с огурцами (сорт Взгляд) представлены в таблице
Установлено, что поли-N,N-диметил-3,4-диметиленпирролидиний хлорид (табл.6) обладает высокой бактерицидной активностью 100%, в отношении патогена Pseudomonas capsici, поражающего листья, бутоны, соцветия и плоды перца (сорт Дуэт) и баклажанов (сорта Вэратик). По этим показателям испытываемое вещество превосходит Тирам.
Результаты опытов с овощным горохом (сорт Южный) представлены в таблице 7. Установлено, что ПДМПХ обладает высокой бактерицидной активностью в фазе «всходы» 86-93%, в фазе «техническая спелость» 50-74%, эталон (ТМТД) 36-70% и 11-16% соответственно. ПДМПХ повысил урожайность от 5 до 6 ц/га, эталон от 2 до 2,5 ц/га. По этим показателям испытываемое вещество превосходит Тирам более чем в два раза.
В опытах с луком «чернушка» (сорт Касатик) установлено, что поли-N,N-диметил-3,4-диметиленпирролидиний хлорид (табл.8) обладает высокой бактерицидной активностью 94-100% в отношении Xanthomonas striaeformis и фунгицидной активностью 80-90% против патогена Rhizoctonia violaceae, вызывающего гниль красную в фазе «всходы» (ф.с).
Таким образом, ПДМПХ в норме расхода 1 грамм действующего вещества на 1 килограмм семян овощных культур не обладает острой и хронической фитотоксичностью. Пример 3. Бактериозы зерновых колосовых: Pseudomonas syringae, Pv. atrofaciens, Xantomonas campestris, Pv. translucens. Основным методом полевого эксперимента являлась методика [17, 20-21]. В опытах использовали семенной материал озимой пшеницы сорта Юна, естественно инфицированный патогенами. Результаты фитоэкспертизы семян: всхожесть 97%, зараженность семян возбудителями B.sorokiniana 20%, Fusarium spp 6%, Alternaria spp 24%. Бактериозы: Pseudomonas syringae 30%, Xanthomonas campestris 20%. Обработку семян проводили ПДМПХ с нормой расхода 0.5 кг действующего вещества на тонну семян (или 1 литр на тонну семян по препарату). В качестве эталона брали 40% ВСК Тирам с нормой расхода по препарату 4 литра на тонну; семян, бункер (раксил) 0,5 литра на тонну, виал ТТ 0,5 литра на тонну. Результаты представлены в таблице 9.
Установлено, что ПДМПХ 50% в.к. при норме расхода 1 литр на тонну семян обладает высоким обеззараживающим эффектом в отношении грибковой и бактериальной инфекции семенного материала, существенно превосходя эталоны. Пример 4. Полевые мелкоделяночные опыты. Бактериальные и грибковые болезни овощных культур. Поли-N,N-диметил-3,4-диметиленпирролидиний хлорид (ПДМПХ) изучался в качестве бактерицида и фунгицида для защиты овощных культур в период вегетации. Испытание проводили по методике [21]. Заболевания растений: – томаты (бактериальная гниль плодов вершинная – Pseudomonas lycopersici (Burgw.)). Stapp; пятнистость черная бактериальная – Xanthomonas vesicatoria (Doidge Dowson). – огурец (пятнистость угловатая бактериальная – Pseudomonas lachrimans (E.F.Sm. et Br.) Carsner); – баклажаны (пятнистость бактериальная Pseudomonas aptata (Brown et Jamieson) Stapp); – перец (пятнистость плодов черная бактериальная – Pseudomonas capsici (Orsin) Melicova et Gorl.); Вид опыта: мелкоделяночный. Площадь опытной делянки в зависимости от культуры от 5 до 20 м2. Повторность четырехкратная. Размещение – рендомизированное. Технология применения ПДМПХ: обработка растений овощных культур в период вегетации, с нормой расхода 0.5-0.6 кг/га по действующему веществу (или по препарату 1.0-1.2 кг/га). Расход рабочей жидкости 300-500 л/га. Способ применения: Обработка растений овощных культур в период вегетации. Первая обработка на: – томатах, перце и баклажанах – образование первых плодов («завязь»); последующее через 15-18 дней; – огурце – появление первых признаков угловатой бактериальной пятнистости, последующее через 15-18 дней. За период вегетации проведено опрыскиваний: – на томатах 4 (срок ожидания перед съемом урожая 12 дней); – на огурцах 3 (срок ожидания перед съемом урожая 5-6 дней); – на баклажанах 4 (срок ожидания перед съемом урожая 10-12 дней); – на перце сладком 4 (срок ожидания перед съемом урожая 10-12 дней). Биологическая и хозяйственная эффективность ПДМПХ на: – на томатах (сорта Викторина, Новичок) в борьбе против черной бактериальной (Xanthomonas vesicatoria) и вершинной бактериальной гнили плодов (Pseudomonas lycopersici) испытывали при норме расхода 0.5-0.6 кг/га по действующему веществу (или по препарату 1.0-1.2 кг/га). Результаты представлены в таблицах 10-12.
Установлено, что (ПДМПХ) поли-N,N-диметил-3,4-диметиленпирролидиний хлорид обладает высокой бактерицидной активностью 90-97%, снижает количество пораженных бактериозом плодов на 92-97,5%. По этим показателям превосходит хлорокись меди. Повысилась урожайность: общая относительно к контролю на 107-110%, относительно к эталону на 108-109%; повысилась урожайность стандартных (небольших плодов) относительно к контролю на 201-211%, относительно к эталонам на 104-109%. На огурце (сорт Взгляд) в борьбе против пятнистости угловатой бактериальной (Pseudomonas lachrimans) испытывали при норме расхода 0,5-0,6 кг/га по действующему веществу (или по препарату 1,0-1,2 кг/га). Результаты представлены в таблице 13. Установлено, что (ПДМПХ) поли-N,N-диметил-3,4-диметиленпирролидиний хлорид обладает высокой бактерицидной активностью; через 10-12 дней от 89-93%, через 20 дней от 66 до 76%. По бактерицидности превосходит хлорокись меди.
На перце (сорт Дуэт) в борьбе против (Xanthomonas vesicatoria) черной бактериальной пятнистости плодов ПДМПХ испытывали при норме расхода 0.5-0.6 кг/га по действующему веществу (или по препарату 1.0-1.2 кг/га). В качестве эталона была взята хлорокись меди с нормой расхода 2.7 кг/га. Установлено (таблица 14), что 50% в.к. поли-N,N-диметил-3,4-диметиленпирролидиний хлорид (ПДМПХ) обладает высокой бактерицидной активностью в отношении пятнистости плодов черной бактериальной – Pseudomonas capsici, поражающей листья, бутоны, соцветия и плоды. По этим показателям ПДМПХ превосходит хлорокись меди. Выход стандартных плодов составил: относительно контроля от 275 до 308%, относительно эталона от 143 до 160%.
На баклажанах (сорт Вэратик) в борьбе против пятнистости бактериальной (Pseudomonas aptata) испытывали при норме расхода 0,5-0,6 кг/га по действующему веществу (или по препарату 1,0-1,2 кг/га). В качестве эталона была взята хлорокись меди с нормой расхода 2,7 кг/га. Установлено (таблица 14), что 50% в.к. ПДМПХ обладает высокой бактерицидной активностью 100% в отношении пятнистости бактериальной (Pseudomonas aptata), поражающей листья, бутоны, соцветия и плоды. По этим показателям ПДМПХ превосходит эталон. Выход стандартных плодов составил: относительно контроля 100%, относительно эталона 99,7%. ПДМПХ при норме расхода 0,5-0,6 кг/га по действующему веществу (или по препарату 1,0-1,2 кг/га) на баклажанах и перце сладком не обладает острой и хронической фитотоксичностью. Пример 5. Бактерицидные свойства поли-N,N-диметил-3,4-диметилен- пирролидиний хлорида (ПДМПХ) [21]. Объекты исследования (культуры): фасоль (сорт Юбилейная), соя (сорт Ранняя 10). Заболевания растений: фасоль – Xsantomonas phaseoli, соя -Pseudomonas glycinum. Вид опыта: мелкоделяночный. Площадь опытной делянки в зависимости от культуры от 8 до 12.6 м2. Повторность – четырехкратная. Размещение – рендомизированное. Технология применения поли-N,N-диметил-3,4-диметиленпирролидиний хлорида: – кратность обработок; на фасоли 2, сое 3. – норма расхода на сое и фасоли 0.5 килограмма по действующему веществу или 1 литр препарата на гектар; – способ применения: орошение растений в период вегетации. Биологическая и хозяйственная эффективность ПДМПХ на: – фасоли (табл.15). Установлено, что ПДМПХ обладает высокой бактерицидностью при норме расхода 0.5 килограмма по действующему веществу или 1 литр препарата на гектар, в отношении бурой бактериальной пятнистости 79%, и хозяйственной эффективностью – повысилась урожайность на 4.7 ц/га, превосходя эталон (Хомецин «Цихом»). Воздействие острой и хронической фитотоксичности ПДМПХ на фасоль не выявлено;
– сое. Установлено (табл.16), что ПДМПХ обладает высокой бактерицидностью в отношении Pseudomonas glycinum 89.2% и хозяйственной эффективностью, повысил урожайность на 7.2 ц/га, превосходя эталон (Хомецин «Цихом»). Воздействие острой и хронической фитотоксичности ПДМПХ на сою не выявлено.
Пример 6. Фунгицидные свойства поли-N,N-диметил-3,4-диметиленпирролидиний хлорида (ПДМПХ). Определяли по методике [21]. Объекты исследования (культура) и заболевания растений: – картофель и томаты – фитофтороз (Phytophthora infestans De Ваrу); – огурец – ложная мучнистая роса (Peronospora lachrymans); – лук – ложная мучнистая роса (Р. destructor casp.). Сорта: картофель (сорт Домодедовский), лук-репка (сорт Хитон). Вид опыта: мелкоделяночный. Площадь опытной делянки в зависимости от культуры от 3 до 16.2 м2. Повторность – четырехкратная. Размещение – рендомизированное или латинский прямоугольник. Регламенты применения: норма расхода ПДМПХ на картофеле 0.3 кг на гектар по действующему веществу, лук-репка 1 литр препарата на гектар. Кратность обработок 3. Установлено, что ПДМПХ против фитофтороза картофеля (табл.17) обладает высокой бактерицидностью 85-97% и хозяйственной активностью от 135 до 137%, превосходя эталон Ридомил МЦ. На луке против пероноспороза (табл.18) ПДМПХ обладает бактерицидностью, равной 87.8%. Повысил урожайность лука репчатого на 12 килограммов с 1000 м2, превысив также значения эталона Родомил МЦ.
Предлагаемый полимерный бактерицид и фунгицид получают полимеризацией диметилдиаллиламмоний хлорида в присутствии моноаллильного соединения в количестве 0.001-0.1 моль на моль мономера и методом регулирования молекулярных весов изменением соотношения мономер и инициатор. Реакцию проводят при температуре 60-90°С. В качестве радикального инициатора целесообразно использовать гидроперекись трет-бутила или персульфат аммония, а в качестве моноаллильного соединения – диметилаллиламин, аллиловый спирт. На основании данных химического анализа ЯМР- и ИК-спектров было установлено, что полученные полимеры имеют структуру и строение поли-N,N-диметил-3,4-диметиленпирролидиний хлорида. Список литературы 1. Н.М.Голышин. Фунгициды. М., «Колос», 1993. 2. Reineck P., Kaspers H., Scheinflug H., – Proceedings. Volume 1, 1986,41-46. British, crop.protection conference-posts and diseasec. Brigton Metropol., England 17-20.11.1986. 3. С.Л.Тютерев. Совершенствование химического метода защиты сельскохозяйственных культур от семенной и почвенной инфекции. С. – Петербург, 2000. 4. Н.Н.Мельников, К.В.Новожилов, С.Р.Белан. Пестициды и регуляторы роста растений, М., «Химия», 1995. 5. Патент ЕПВ 0040345, Bayer A J. Заявлено 02.05.81. Опубликовано 11.07.84. 6. W. Ruessetal. Proc. 1988. Br. Crop.Prot. Conf, 2, 543. 7. Современная микология. Первый съезд микологов России, М., 2002. 8. Фитосанитарное оздоровление экосистем. Второй Всероссийский съезд по защите растений, С. – Петербург, 5-10.12.2005. Т.1, с.179-181; Т.2, с.283-284, 285-286, 323-326, 326-327. 9. В.А.Чулкина, Е.Ю.Торонова и др. Современные экологически безопасные системы фитосанитарной оптимизации растениеводства в Сибири. Новосибирск, 2003. 10. А.Ф.Грапов. Химические средства защиты растений XXI века. Справочник, М., 2006. (ВНИИХСЗР). 11. В.И.Абеленцев, Н.Д.Добрынин, М.В.Боровой, П.Н.Зенин. Фунгициды – фактор повышения производства зерна хлебных злаков, возделываемых по энергосберегающим агротехническим приемам. АПК 8,2007, с.52. 12. В.И.Абеленцев. Ассортимент протравителей. АПК 9, 2006, с.44. 13. В.Ф.Пересыпкин. Болезни зерновых и зернобобовых культур. Киев, 1989, Т.1. 14. Шпаар Д. и др. Бактериозы культурных растений. М., 1980. 15. Журнал защита и карантин растений, 2000-2005 г.г. 16. О.Ю.Молчанов, Е.И.Андреева. Биологические аспекты изучения азолсодержащих фунгицидов. НИИТЭХИМ, М., 1989. 17. Н.М.Голышин. Фунгициды в сельском хозяйстве. М., Колос, 1976, с.184. 18. С.С.Кукаленко, Е.И.Андреева. Методические рекомендации по определению фунгицидной активности новых соединений. Черкассы, 1984. 19. К.А.Гар. Методы испытания и эффективности инсектицидов. М., 1963, с.287. 20. Е.И.Андреева. Методы исследования протравителей семян. НИИТЭХИМ, М., 1980. 21. В.И.Абеленцев. Методическое руководство по проведению теплично-полевых испытаний протравителей семян, фунгицидов и бактерицидов. Черкассы. 1990.
Формула изобретения
1. Способ борьбы с грибковыми и бактериальными заболеваниями сельскохозяйственных растений путем применения фунгицида и бактерицида для обработки семенного материала и сельскохозяйственных культур в период вегетации, отличающийся тем, что в качестве фунгицида и бактерицида используют поли-N,N-диметил-3,4-диметиленпирролидиний хлорид. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что для эффективной борьбы со стойкими и опасными возбудителями болезней (грибковыми, бактериальными) сельскохозяйственных растений, семенного материала и сельскохозяйственных растений в период вегетации бактерицид и фунгицид используют в дозе 1 г действующего вещества на 1 кг семян или 0,5-0,6 кг/га в период вегетации.
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||