Патент на изобретение №2370262

(54) ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ БОЛЕЗНЕЙ, СВЯЗАННЫХ С ДЕФИЦИТОМ СЕЛЕНА ДЛЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ

(57) Реферат:

Изобретение относится к ветеринарии. Препарат для лечения и профилактики болезней, связанных с дефицитом селена для сельскохозяйственных животных, включает селенит натрия, левамизол-основание и кислоту аскорбиновую и воду для инъекций при следующем соотношении компонентов, в мас.%:

Изобретение обеспечивает иммунопротекторное, антистрессовое и антиоксидантное действие препарата и снижение затрат на его изготовление. 8 табл., 1 ил.

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к препаратам для лечения и профилактики болезней, связанных с дефицитом селена для сельскохозяйственных животных.

Уровень техники

Недостатком данного препарата является невысокий эффект повышения общей резистентности организма.

Известен препарат по способу кормления поросят, предусматривающий введение в рацион на основе ячменя, кукурузы, пшеницы премикса, содержащего витамины A, D, Е, В₁₂, марганец, кобальт, цинк, железо, медь, йод, антиоксидант, антибактерицидный препарат, наполнитель – экструдированную кукурузу, при этом в премикс дополнительно вводят селен, лимонную кислоту, а в качестве антибактериального препарата используют биовит и скармливают полученный премикс поросятам в возрасте 21-60 дней в количестве 0,9-1,5 от основного рациона, причем берут указанные компоненты премикса в следующем соотношении, мас.%:

(см. пат.RU 2083131, кл А23К 1/00, А23К 1/16, опубл. 10.07.1997 г.)

Недостатком данного препарата является высокая себестоимость, недостаточное повышение резистентности организма, неудобство дозировки.

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому положительному эффекту и принятый авторами за прототип является препарат, содержащий в 1 мл 50 мг токоферола ацетата и 0,5 мг селенита натрия в форме водорастворимого комплекса (См. Оробец В.А., Беляев В.А., Киреев И.В. Влияние Е-селена на репродуктивную функцию коров – Российский ветеринарный журнал. – Специальный выпуск, май – 2007. – С.18-19).

Недостатками данного препарата являются невысокий эффект повышения общей резистентности организма и способность к окислительно-восстановительным процессам.

Раскрытие изобретения

Задачей предлагаемого изобретения является разработка препарата для лечения и профилактики болезней, связанных с дефицитом селена для сельскохозяйственных животных, обладающего антистрессовым эффектом, иммунопротекторным действием и снижением затрат на изготовление.

Технический результат, который может быть достигнут с помощью предлагаемого изобретения, сводится к иммунопротекторному действию, антистрессовому и антиоксидантному эффекту и снижению затрат на изготовление.

Технический результат достигается с помощью препарата для лечения и профилактики болезней, связанных с дефицитом селена, для сельскохозяйственных животных, включающий селенит натрия и воду для инъекций, при этом препарат дополнительно содержит левамизол-основание и кислоту аскорбиновую при следующем соотношении компонентов, в мас.%:

Сущность получения препарата для лечения и профилактики болезней, связанных с дефицитом селена для сельскохозяйственных животных, заключается в следующем: исходные вещества, в мас.%, а именно: селенит натрия 0,05-0,4, левамизол-основание 3,0-8,0, кислоту аскорбиновую 5,0-15,0 и воду для инъекций – остальное смешивают в асептических условиях и упаковывают.

Биологические функции аскорбиновой кислоты: участие в окислительно-восстановительных процессах, регуляции углеводного обмена, процессах свертывания крови, стимуляции гемопоэза, образовании стероидных гормонов надпочечников, нормализации проницаемости капилляров (См. Мельниченко В.И. Антиоксиданты в ветеринарии: новые возможности. – Ветеринарная клиника. – 2006, 7). Одним из основных свойств витамина является способность к окислительно-восстановительным превращениям. Аскорбиновая кислота способна окисляться в дегидроаскорбиновую кислоту и таким образом вместе с ней она представляет окислительно-восстановительную систему, теряющую и присоединяющую электроны и протоны. Витамин С восстанавливает витамин Е, но сам при этом окисляется (См. Yi O.S., Han D., Shin H.Q. Synergistic antioxidative effects of tocopherol and ascorbic acid in fish oil (lecitin) water system. J. Am. Oil Cyem. Soc. – 1991; 5 (8). – С.881-883). Добавки витамина С улучшают иммунные реакции за счет поддержания уровня содержания витамина Е в крови и тканях, витамин Е также является выраженным стимулятором иммунной системы (См. Bendich A., D

Витамин С восстанавливает селенит до элементарного селена, а элементарная сера и селен легко восстанавливаются, образуя сульфиды и селениды, содержащие два или более атомов серы и селена. Селеноцистин белков посредством переноса электронов может соединяться с элементарным селеном с образованием селеносодержащих связей.

Левамизол (Levamisolum) – 2,3,5,6-тетрагидро – 6 – фенилимида-зо-[2,1-b]-тиазола гидрохлорид. Белый аморфный или кристаллический порошок. Легко растворим в воде. Первоначально этот препарат был предложен в качестве противоглистного средства. При изучении антигельминтного действия левамизола было обнаружено, что он повышает общую сопротивляемость организма и может быть использован как средство для иммунотерапии. Опыты на изолированных клетках и наблюдения за здоровыми и больными людьми показали, что препарат способен восстановить измененные функции Т-лимфоцитов и фагоцитов и вследствие его тимомиметического эффекта может регулировать клеточные механизмы иммунологической системы. Более подробные исследования показали, что левамизол, избирательно стимулируя регуляторную функции Т-лимфоцитов, может выполнять функции иммуномодулятора, способного усилить слабую реакцию клеточного иммунитета, ослаблять сильную и не действовать на нормальную реакцию. В связи с этими свойствами левамизол был предложен для лечения различных заболеваний, в патогенезе которых придают значение расстройствам иммуногенеза: первичные и вторичные иммунодефицитные состояния, аутоиммунные болезни, хронические и рецидивирующие инфекции, опухоли и др. Левамизол как иммуностимулирующий препарат может быть эффективен в комплексной терапии различных заболеваний (См. Машковский М.Д. – М38 Лекарственные средства: В 2-х томах. Т.2. – 11-е изд. стер. М.: Медицина, 1988. – 576 с. ISBN 5 – 225 – 00036-3).

Левамизол – высокоэффективный антгельминтик, используемый при желудочно-кишечных и легочных нематодозах. Препарат вызывает увеличение числа как 1 – , так и В-лимфоцитов, титр естественных антител и процесс антителообразования у интактных животных. Полученные данные показали, что левамизол у интактных животных в основном стимулирует клеточный иммунитет. Он вызывает быстрый эффект: уже через сутки количество Т-лимфоцитов увеличивается в 2 раза по сравнению с контрольными животными. У спонтанно зараженных в эти же дни левамизол в дозе 10 мг/кг по АДВ вызывал повышение уровня Т-лимфоцитов в 5 раз. Возрастающая активность Т-лимфоцитов, наступающая под действием левамизола, очевидно, играет немаловажную роль в способности препарата повышать иммунобиологические свойства организма (См. Даугалиева Э.Х. Филиппов В.В. Иммунный статус и пути его коррекции при гельминтозах сельскохозяйственных животных. М., ВО «Агропромиздат». – 1991. – 188 с.).

В качестве растворителя выбрана вода, так как все составляющие лекарственного средства являются водорастворимыми соединениями.

Осуществление изобретения

Примеры конкретного выполнения, получение и испытание препарата для лечения и профилактики болезней, связанных с дефицитом селена для сельскохозяйственных животных.

Пример 1

Препарат для лечения и профилактики болезней, связанных с дефицитом селена для сельскохозяйственных животных, готовят путем смешения компонентов в асептических условиях и растворения в воде для инъекций при следующем соотношении компонентов, в мас.%:

с последующей упаковкой и стерилизацией.

Полученный препарат при применении коровам в период стельности за 60 и 30 дней до отела при анализе морфологических и биохимических показателей крови показал относительно невысокую стабилизацию гемопоэза, обмена белков и липидов и концентрации в крови -глобулинов.

Пример 2

Проводят аналогично примеру 1, но берут следующее соотношение компонентов, в мас.%:

Полученный препарат при применении коровам в период стельности за 60 и 30 дней до отела при анализе морфологических и биохимических показателей крови подопытных животных показал, что препарат стабилизирует гемопоэз, обмен белков и липидов, повышает концентрацию в крови -глобулинов на 9,0%, при одновременном снижении содержания -глобулинов на 7,0% он активизировал систему антиоксидантной защиты организма, что проявлялось уменьшением концентрации в крови малонового диальдегида у животных опытной группы к концу беременности на 27%, в то время как у коров контрольной группы произошло его увеличение с 1,25 мкмоль/л до 1,47 мкмоль/л.

Пример 3

Проводят аналогично примеру 1, но берут следующее соотношение компонентов, в мас.%:

Полученный препарат при применении коровам в период стельности за 60 и 30 дней до отела при анализе морфологических и биохимических показателей крови подопытных животных показал, что препарат стабилизирует гемопоэз, обмен белков и липидов, повышает концентрацию в крови -глобулинов на 9,3% при одновременном снижении содержания -глобулинов на 7,1%, он активизирует систему антиоксидантной защиты организма, что проявилось уменьшением концентрации в крови малонового диальдегида у животных опытной группы к концу беременности на 36%, в то время как у коров контрольной группы произошло его увеличение с 1,29 мкмоль/л до 1,47 мкмоль/л, т.е на 12,5%.

Пример 4

Проводят аналогично примеру 1, но берут следующее соотношение компонентов в мас.%:

Полученный препарат при применении коровам в период стельности за 60 и 30 дней до отела при анализе морфологических и биохимических показателей крови не показал выраженной динамики по направлению к стабилизации гемопоэза, липидного и белкового обмена, а также способствовал уменьшению количества эритроцитов на 7,6% по сравнению с контрольной группой и в связи с этим увеличение цветового показателя до значений выше физиологической нормы.

Таким образом, наиболее оптимальными являются примеры 2 и 3, так как в результате применения препарата концентрация селена в крови увеличивалась в 4,7 раза, активность каталазы и пероксидазы в крови увеличивалась до 13 и 18,5% соответственно, а концентрация малонового диальдегида уменьшалась соответственно до 36% и была достоверно ниже, чем у животных контрольной группы.

Для токсикологических исследований и оценки действия препарата для лечения и профилактики болезней, связанных с дефицитом селена для сельскохозяйственных животных, отображенных в таблицах 1-8 и на графике (см. чертеж 1), брали следующее соотношение компонентов, в мас.%:

Были произведены токсикологические исследования препарата для лечения и профилактики болезней, связанных с дефицитом селена для сельскохозяйственных животных. Для определения летальных доз препарата использовали клинически здоровых белых мышей массой 20-22 г, исследования проводили согласно «Методическим указаниям по токсикологической оценке новых препаратов для лечения и профилактики незаразных болезней животных» (ВНИИ незаразных болезней животных, 1987 г.). Действующим веществом препарата является комбинация селенита натрия, левамизола-основания и аскорбиновой кислоты. Способом введения был выбран внутримышечный, т.к. этот препарат предназначен для внутримышечного введения сельскохозяйственным животным. В таблице 1 представлены данные исследования препарата для лечения и профилактики болезней, связанных с дефицитом селена для сельскохозяйственных животных на острую токсичность.

Для оценки влияния препарата для лечения и профилактики болезней, связанных с дефицитом селена для сельскохозяйственных животных, на гематологические показатели использовали лабораторных белых мышей; животным опытных групп ввели внутримышечно испытуемый препарат в различных дозах (см. табл.2).

Анализируя полученные результаты, можно отметить положительное влияние введения препарата для лечения и профилактики болезней, связанных с дефицитом селена для сельскохозяйственных животных, в дозе 1,17 мг/кг по ДВ на некоторые гематологические показатели: повышение количества эритроцитов, уровень гемоглобина, стабилизация количества лейкоцитов. Это послужило отправной точкой для определения дозы препарата при оценке влияния препарата на организм сельскохозяйственных животных.

В таблице 3 отображен дифференциальный подсчет лейкоцитов, который имеет большое значение при оценке кроветворения, наличия токсических воздействий на организм и воспалительных процессов, резистентности организма к инфекциям.

Для оценки влияния на организм и прирост живой массы использовали клинически здоровых кроликов, содержащихся в условиях вивария с полноценным рационом кормления (см. табл.4-6).

Таблица 4
Биохимические показатели сыворотки крови кроликов после применения препарата для лечения и профилактики болезней, связанных с дефицитом селена для сельскохозяйственных животных в дозе 1,17 мг/кг по ДВ (n=5)
Группа	Общий белок, г/л	Белковые фракции, %	Холестерин, мг %
Альбумины	Глобулины
До введения препарата
Опыт	60,1±7,7	55,2±5,5	11,4±2,0	11,4±2,5	22,0±4,7	87,6±9,5
Контроль	62,7±3,2	57,3±3,2	10,8±0,1	13,2±1,7	18,7±1,46	84,8±7,5
Через 8 дней после введения препарата
Опыт	62,1±5,5	57,9±2,7	10,5±1,0	12,3±1,9	19,3±1,1	80±4,5
Контроль	62,6±2,9	56,5±1,7	10,8±1,5	13,3±1,1	19,3±1,3	84,8±4,3
Через 15 дней после введения препарата
Опыт	67,8±4,6	58,4±0,8	10,0±0,7	11,3±1,4	20,2±2,2	74,6±2,7
Контроль	62,8±2,1	59,6±1,7	11,1±0,8	12,4±1,0	19,6±1,7	87,1±2,3
Через 23 дня после введения препарата
Опыт	68,1±4,0	59,3±2,5	10,7±0,7	11,2±0,95	19,3±1,7	73,5±3,6
Контроль	62,9±1,0	56,9±0,9	11,1±0,2	12,2±0,9	19,7±1,4	86,4±3,2
Через 31 день после введения препарата
Опыт	69,2±4,1	58,2±1,8	9,7±0,9	10,3±0,8	22,7±1,2	74,7±1,7
Контроль	63,5±2,7	58,2±2,8	11,1±0,8	11,9±0,7	18,7±2,7	86,7±2,9

Анализ полученных результатов свидетельствует об увеличении содержания общего белка в сыворотке крови опытных животных на 13,2%, активности каталазы в крови на 59,5%, селена в крови в 7 раз, притом что в контрольной группе эти показатели оставались на прежнем уровне. До введения препарата у кроликов обеих групп наблюдалось повышенное содержание глюкозы в крови, применение препарата способствовало нормализации углеводного обмена и снижению уровня глюкозы на 22,2%, в то время как в контроле этот показатель остался практически неизменным. Содержание холестерина в сыворотке крови за время проведения опыта снизилось в опытной группе на 14,7%, тогда как в контрольной повысилось на 1,6%, а содержание лейкоцитов у контрольных животных снизилось на 13,2%, в то время как у опытных повысилось на 13,6 (что обусловлено наличием иммуностимулятора в составе препарата). Прирост живой массы за 31 день в контрольной группе в среднем составил 330 г., а в опытной 450 г., что на 26,6% больше.

Для испытания препарата для лечения и профилактики болезней, связанных с дефицитом селена для сельскохозяйственных животных, на овцах было подобрано с учетом принципа аналогов 10 животных, которых разделили на две группы. Животным первой группы внутримышечно ввели препарат для лечения и профилактики болезней, связанных с дефицитом селена для сельскохозяйственных животных в дозе 1,17 мг/кг по ДВ. Овцы второй группы препарат не получали и служили контролем. Результаты испытания представлены в таблицах 7, 8.

Установлено увеличение содержания общего белка в сыворотке крови опытных овец и снижение уровня глюкозы в крови до физиологической нормы, содержание витамина С увеличилось в 1,9 раза. Активность каталазы в крови опытной группы увеличилась на 42,6%, а в крови контрольной группы – на 14,5%; активность пероксидазы в опыте и контроле – на 42 и 5,1% соответственно. Применение препарата способствовало уменьшению концентрации малонового диальдегида в крови на 76%.

Резюмируя проведенные исследования, отмечается, что применение препарата для лечения и профилактики болезней, связанных с дефицитом селена для сельскохозяйственных животных, способствует активизации системы антиоксидантной защиты организма, что выражается в увеличении активности каталазы, пероксидазы, и витамина С, снижении концентрации малонового диальдегида в крови – недоокисленного продукта свободнорадикальных реакций. При анализе динамики содержания селена в крови наблюдаем увеличение концентрации последнего до физиологической нормы в течение недели. При воздействии препарата на организм наблюдается заметное увеличение количества лейкоцитов, связанного с наличием в его составе левамизола – соединения, обладающего иммуностимулирующими свойствами. Применение препарата для лечения и профилактики болезней, связанных с дефицитом селена для сельскохозяйственных животных, характеризовалось уменьшением уровня холестерина в крови до физиологических норм и нормализацией белкового и углеводного обмена.

Таблица 7
Биохимические показатели сыворотки крови овец после применения препарата для лечения и профилактики болезней, связанных с дефицитом селена для сельскохозяйственных животных в дозе 1,17 мг/кг по ДВ (п=5)
Группа	Общий белок, г/л	Белковые фракции, %	Вит.С, мг/л
Альбумины	Глобулины
До введения препарата
Опыт	62,5±3,8	36,2±1,7	16,8±0,3	9,0±0,3	38,0±1,6	2,13±0,23
Контроль	59,9±1,8	36,8±1,2	17,4±2,6	10,2±1,3	35,5±4,2	2,1±0,1
Через 15 дней после введения препарата
Опыт	68,1±4,6	42,06±2,8	15,6±0,9	8,5±0,35	33,7±3,1	4,9±0,45
Контроль	60,2±2,4	36,7±2,5	17,5±3,0	9,8±0,5	35,7±5	2,04±0,2
Через 30 дней после введения препарата
Опыт	65,8±3,6	42,4±2,9	14,9±2,0	8,5±0,8	34,1±4,3	3,97±0,6
Контроль	60,7±5,4	37,0±0,5	17,2±0,9	9,8±0,4	35,8±1,5	2,06±0,1

Предлагаемое изобретение по сравнению с прототипом и другими техническими решениями имеет следующие технические преимущества:

– повышение общей резистентности организма животных;

– повышение антиоксидантного действия;

– высокоэффективный иммуностимулятор;

– невысокие экономические затраты.

Формула изобретения

Препарат для лечения и профилактики болезней, связанных с дефицитом селена для сельскохозяйственных животных, включающий селенит натрия и воду для инъекций, отличающийся тем, что он дополнительно содержит левамизол основание и кислоту аскорбиновую при следующем соотношении компонентов, мас.%:

РИСУНКИ