Патент на изобретение №2367461
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
(54) СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ АНАЛЬГЕТИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ (ВАРИАНТЫ)
(57) Реферат:
Изобретение относится к фармакологии и может быть использовано в терапии заболеваний с болевым синдромом. Анальгетическое средство содержит спиртовые вытяжки из надземной части с цветками болиголова пятнистого (Conium maculatum L.) при следующем соотношении компонентов, в %: сухая надземная часть с цветками болиголова пятнистого – 10, спирт этиловый 40%-ный – 90; свежая надземная часть с цветками болиголова пятнистого – 2, спирт этиловый 40%-ный – 98; этилацетатную фракцию, выделенную из надземной части с цветками болиголова пятнистого. Средство не обладает побочным действием. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 1 табл.
Изобретение относится к области медицины, конкретно к фармакологии, и может быть использовано в терапии заболеваний с болевым синдромом. Известны синтетические препараты, оказывающие анальгетический эффект [1]. Вместе с тем данные средства токсичны в силу синтетического происхождения, и использование их для фармакологической коррекции в качестве анальгетиков ограничено из-за плохой переносимости, возникновения различных осложнений. Наиболее близким по положительному эффекту (базовым) является метамизол натрия. Этот препарат обладает обезболивающим действием, но он является синтетическим препаратом и обладает рядом побочных эффектов [1]. Наиболее близким анальгетическим средством по природе происхождения является 10%-ная настойка корней девясила высокого [2]. Задачей предлагаемого изобретения является расширение арсенала растительных средств, обладающих анальгетическим действием, лишенных побочных эффектов. Поставленная задача достигается тем, что анальгетическое средство содержит спиртовые вытяжки из надземной части с цветками болиголова пятнистого (Conium maculatum L.) при следующем соотношении компонентов, в %: сухая надземная часть с цветками болиголова пятнистого – 10, спирт этиловый 40%-ный – 90; свежая надземная часть с цветками болиголова пятнистого – 2, спирт этиловый 40%-ный – 98; этилацетатная фракция, выделенная из надземной части с цветками болиголова пятнистого. Впервые показано, что спиртовые вытяжки из надземной части с цветками болиголова пятнистого в предлагаемом соотношении и этилацетатная фракция, выделенная из надземной части с цветками болиголова пятнистого, проявляют анальгетические свойства, явным образом не вытекающие из уровня техники в данной области и неочевидные для специалиста. Экспериментально установлены новые свойства и возможность использования спиртовых вытяжек из сухой и свежей надземной части с цветками болиголова пятнистого и этилацетатная фракция, выделенная из надземной части с цветками болиголова пятнистого в качестве анальгетического средства в медицине. Идентичной совокупности анальгетических свойств спиртовых вытяжек из сухой и свежей надземной части с цветками болиголова пятнистого и этилацетатной фракции, выделенной из надземной части с цветками болиголова пятнистого, не обнаружено в проанализированной патентной и научно-медицинской литературе. Таким образом, предлагаемое изобретение соответствует критериям патентоспособности “новизна”, “изобретательский уровень”, “промышленная применимость”. Предлагаемое анальгетическое средство получают следующим образом: надземную часть болиголова пятнистого, собранную во время цветения в июле-августе, высушивают, измельчают до 3 мм. Взвешенное количество измельченного сырья помещают в стеклянный, фарфоровый или эмалированный сосуд и заливают 40%-ным этиловым спиртом при следующем соотношении компонентов: надземная часть с цветками болиголова пятнистого – 10%, спирт этиловый 40%-ный – 90%, настаивают в темном прохладном месте в течение 10 дней. Затем спиртовую вытяжку из измельченной сухой надземной части с цветками болиголова пятнистого (настойку) процеживают, растительный остаток хорошо отжимают, 40%-ным этиловым спиртом доводят извлечение до первоначального объема, отстаивают в прохладном месте 3 суток и затем фильтруют через обеззоленный фильтр. Хранят спиртовую вытяжку из измельченной сухой надземной части с цветками болиголова пятнистого (настойку) в темном прохладном месте. Предлагаемое анальгетическое средство из свежей надземной части с цветками болиголова пятнистого получают следующим образом: надземную часть с цветками болиголова пятнистого, собранную в июле-августе, рыхло, не трамбуя, набирают полный стеклянный, фарфоровый или эмалированный сосуд и заливают 40%-ным этиловым спиртом при следующем соотношении компонентов: надземная часть с цветками болиголова пятнистого – 2%, спирт этиловый 40%-ный – 98%, настаивают в темном прохладном месте в течение 10 дней. Затем спиртовую вытяжку из свежей надземной части с цветками болиголова пятнистого (настойку) процеживают, растительный остаток хорошо отжимают, 40%-ным этиловым спиртом доводят извлечение до первоначального объема, отстаивают в прохладном месте 3 суток и затем фильтруют через обеззоленный фильтр. Хранят спиртовую вытяжку из свежей надземной части с цветками болиголова пятнистого (настойку) в темном прохладном месте. Предлагаемое анальгетическое средство из этилацетатной фракции, выделенной из надземной части с цветками болиголова пятнистого, получают следующим образом: 30,0 г высушенной надземной части с цветками болиголова пятнистого пятикратно экстрагируют 70%-ным этанолом при нагревании на водяной бане при температуре 40°С в течение 30 минут. Этанольные экстракты объединяют и растворитель удаляют под вакуумом на роторном испарителе. Далее экстракты экстрагируют этилацетатом. Растворитель отгоняют и получают активную этилацетатную фракцию. Конкретные примеры выполнения способа. Пример 1: Собранную в июле надземную часть с цветками болиголова пятнистого высушивают, измельчают до 3 мм, 10 г измельченной надземной части с цветками болиголова пятнистого заливают 100 миллилитрами 40%-го этилового спирта и настаивают в темном месте в течение 10 дней. Затем спиртовую вытяжку из измельченной сухой надземной части с цветками болиголова пятнистого (настойку) процеживают, растительный остаток хорошо отжимают, 40%-ным этиловым спиртом доводят извлечение до первоначального объема (100 мл), отстаивают в прохладном месте в течение 3 суток, затем фильтруют через обеззоленный фильтр. Хранят спиртовую вытяжку из измельченной сухой надземной части с цветками болиголова пятнистого (настойку) в темном прохладном месте. Пример 2: Собранную в июле надземную часть с цветками болиголова пятнистого с цветками рыхло, не трамбуя, набирают полный стеклянный, фарфоровый или эмалированный сосуд и заливают 100 миллилитрами 40%-го этилового спирта и настаивают в темном прохладном месте в течение 10 дней. Затем спиртовую вытяжку из свежей надземной части с цветками болиголова пятнистого (настойку) процеживают, растительный остаток хорошо отжимают, 40%-ным этиловым спиртом доводят извлечение до первоначального объема (100 мл), отстаивают в прохладном месте 3 суток и затем фильтруют через обеззоленный фильтр. Хранят спиртовую вытяжку из свежей надземной части с цветками болиголова пятнистого (настойку) в темном прохладном месте. Пример 3: 30,0 г высушенных и измельченных до 2 мм соцветий болиголова пятнистого помещают в круглодонную колбу с притертой пробкой вместимостью 250 мл, заливают 150 мл 70%-ного этанола и нагревают с обратным холодильником 30 минут на водяной бане при температуре 40°С. После этого содержимое колбы охлаждают и настаивают в закрытой колбе при комнатной температуре 2 часа. Затем раствор процеживают через вату, сырье хорошо отжимают, заливают 100 мл 70%-ного этанола, нагревают 30 минут на водяной бане при температуре 40°С с обратным холодильником. После нагревания полученное извлечение процеживают в колбу, содержащую первое извлечение. К отжатому сырью прибавляют еще раз 100 мл 70%-ного этанола и повторяют процедуру нагревания и процеживания, как описано выше. Этанольные извлечения объединяют и упаривают досуха на роторном испарителе под вакуумом при температуре 40°С. Полученный экстракт представляет масляную массу светло-коричневого цвета в количестве 5,6 г (выход – 18,7% в пересчете на воздушно-сухое сырье). Далее 5,6 г маслянистой жидкости последовательно обрабатывают 20, 15, 10 мл хлороформа и фильтруют растворы через стеклянный фильтр, хлороформные фильтры отбрасывают, остаток растворяют в 10 мл воды очищенной, прибавляют 30 мл этилацетата и в делительной воронке проводят экстракцию в течение 30 минут. Раствор этилацетата сливают в отдельную колбочку, а в делительную воронку к водному раствору вновь прибавляют 20 мл этилацетата и повторяют экстракцию 30 минут, как описано выше, еще два раза. Объединенные этилацетатные растворы упаривают досуха под вакуумом на роторном испарителе при температуре не более 40°С. Этилацетатная фракция представляет собой порошок светло-желтого цвета в количестве 0,86 г (выход – 2,9% в перерасчете на воздушно-сухое сырье). Хроматографический и спектральный анализ этилацетатной фракции показали, что она в основном представлена соединениями полифенольного состава: флавоноидами (кверцетин, рутин, кемпферол, лютеолина-7 Анальгетическое действие спиртовых вытяжек из сухой и свежей надземной части с цветками болиголова пятнистого и этилацетатной фракции, выделенной из надземной части с цветками болиголова пятнистого, было найдено благодаря экспериментальным исследованиям. Для подтверждения данного свойства была использована модель «уксусные корчи», которая широко используется при исследовании данной активности и позволяет объективно оценить анальгетическое действие препаратов и предсказать их клиническую эффективность [3]. Химическое болевое раздражение индуцировали уксусной кислотой. В опытах на мышах специфическую болевую реакцию – «корчи» (характерные движения животных, включающие сокращения брюшных мышц, чередующиеся с их расслаблением, вытягиванием задних конечностей и прогибанием спины) – вызывали внутрибрюшинным введением 1% уксусной кислоты (0,1 мл/10 г массы тела) через 1 час после последнего введения исследуемого препарата. В течение последующих 15 мин после инъекции подсчитывали количество «корчей» для каждого животного. Об эффективности препаратов судили по подсчету среднего количества «корчей» в контрольной и опытных группах. [3]. Исследование анальгетической активности проводили в эксперименте на 134 беспородных мышах массой 18-20 г. Животные были распределены на три группы: контрольная, сравнения, опытная. В качестве препарата сравнения использовали метамизол натрия (250,0 мг/кг), базовый препарат, обладающий высоким анальгетическим эффектом [1]. В контрольной группе животные получали эквивалентный объем растворителя. В опытных группах животные получали предлагаемое средство из сухой и свежей надземной части с цветками болиголова пятнистого в разных концентрациях; этилацетатную фракцию, выделенную из надземной части с цветками болиголова пятнистого в дозе 25,0 мг/кг. Животных содержали на обычном пищевом рационе в условиях вивария. Эвтаназию производили, соблюдая “Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных”, утвержденные Министерством Здравоохранения России. Полученные результаты обрабатывали статистически, методами параметрической и непараметрической статистики. Различия считались достоверно значимыми при Рu<0,05 и Pt<0,05 для количественных характеристик (критерий Вилкоксона-Манна-Уитни и критерий Стьюдента соответственно); при Р Пример конкретного выполнения эксперимента Экспериментальные данные показали, что предлагаемое средство, содержащее спиртовую вытяжку из сухой надземной части с цветками болиголова пятнистого при соотношении компонентов, в %: сухая надземная часть с цветками – 10, спирт этиловый 40%-ный – 90 – оказывает выраженное анальгетическое действие, проявляющееся в достоверном уменьшении количества «уксусных корчей» на 51, 63 и 71% соответственно по сравнению с контрольной группой. Метамизол натрия снижал «уксусные корчи» на 57% по сравнению с контролем. Спиртовая вытяжка листьев девясила высокого (прототип) в дозе 5,0 мл/кг на 54% снижала количество уксусных корчей. Латентное время болевой реакции увеличивалось в 1,9-2,5 раза при сопоставлении с контролем. У животных, получавших метамизол натрия, этот показатель повышался в 2,7 раз. Девясил высокий увеличивал время в 1,3 раза (таблица). Таким образом, предлагаемое средство (спиртовая вытяжка из сухой и надземной части с цветками болиголова пятнистого при соотношении компонентов, в %: сухая надземная часть с цветками болиголова пятнистого – 10, спирт этиловый 40%-ный – 90) обладает выраженной анальгетической активностью, сопоставимой с действием препарата сравнения метамизолом натрия (базового) и препаратом-прототипом спиртовой вытяжкой девясила высокого. Пример конкретного выполнения эксперимента В результате проведенного исследования было показано, что спиртовая вытяжка из свежей надземной части с цветками болиголова пятнистого при соотношении компонентов, в %: свежая надземная часть с цветками – 2, спирт этиловый 40%-ный – 98 – оказывает выраженное анальгетическое действие, уменьшая количество «уксусных корчей» на 71, 72 и 65% соответственно по сравнению с контролем. Препарат сравнения – метамизол натрия – снижал этот показатель на 57% по сравнению с контролем. Под влиянием спиртовой вытяжки из листьев девясила высокого (прототип) в дозе 5,0 мл/кг на 54% снижалось количество уксусных корчей. Время наступления первых корчей увеличивалось при введении животным настойки в 2,1-2,4 раза при сопоставлении с контролем. Метамизол натрия увеличивал время в 2,7 раза. Девясил высокий увеличивал время первых корчей в 1,3 раза (таблица). Таким образом, предлагаемое средство (спиртовая вытяжка из свежей надземной части с цветками болиголова пятнистого при соотношении компонентов, в %: свежая надземная часть с цветками болиголова пятнистого – 2, спирт этиловый 40%-ный – 98) обладает выраженной анальгетической активностью, сопоставимой с действием препарата сравнения метамизолом натрия (базового) и препаратом-прототипом спиртовой вытяжкой девясила высокого. Пример конкретного выполнения эксперимента Анализ полученных данных свидетельствует о том, что предлагаемое средство, содержащее этилацетатную фракцию, выделенную из надземной части с цветками болиголова в дозе 25,0 мг/кг, оказывало выраженное обезболивающее действие, проявляющееся в достоверном уменьшении количества «уксусных корчей» на 40% по сравнению с контрольной группой. Метамизол натрия снижал «уксусные корчи» на 57% по сравнению с контролем. Спиртовая вытяжка листьев девясила высокого (прототип) в дозе 5,0 мл/кг на 54% снижала количество уксусных корчей. Латентное время болевой реакции при введении этилацетатной фракции, выделенной из надземной части с цветками болиголова пятнистого, увеличивалось в 2,4 раза при сопоставлении с контролем. У животных, получавших метамизол натрия, этот показатель повышался в 2,7 раз. Девясил высокий увеличивал время в 1,3 раза (таблица). Таким образом, предлагаемое средство, содержащее этилацетатную фракцию, выделенную из надземной части с цветками болиголова пятнистого, обладает выраженной анальгетической активностью, не уступающей по эффективности известному анальгетическому препарату – метамизол натрия – и прототипу – спиртовая вытяжка девясила высокого.
Литература 1. Машковский М.Д. Лекарственные средства: Т.1. – М., 2001. – 159 с. 2. Патент 3. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. – М., 2000. – 238 с. 4. Гублер Е.В. Вычислительные методы анализа и распознавания патологических процессов. – Л., 1978 – 72-75 с.
Формула изобретения
1. Средство, обладающее анальгетическим действием, содержащее 40%-ную спиртовую вытяжку из растительного сырья, отличающееся тем, что в качестве растительного сырья оно содержит измельченную сухую или свежую надземную часть с цветками болиголова пятнистого (Conium maculatum L.) 2. Средство по п.1, отличающееся тем, что оно содержит спиртовую вытяжку измельченной сухой надземной части с цветками болиголова пятнистого (Соnium maculatum L.) при соотношении компонентов, %: сухая надземная часть с цветками болиголова пятнистого 10, спирт этиловый 40%-ный 90. 3. Средство по п.1, отличающееся тем, что оно содержит спиртовую вытяжку свежей надземной части с цветками болиголова пятнистого (Conium maculatum L.) при соотношении компонентов, %: свежая надземная часть с цветками болиголова пятнистого 2, спирт этиловый 40%-ный 98. 4. Средство, обладающее анальгетическим действием на основе растительного сырья, отличающееся тем, что содержит этилацетатную фракцию, выделенную из надземной части с цветками болиголова пятнистого (Conium macutatum L.), при этом в качестве растительного сырья используют измельченную сухую часть болиголова пятнистого (Conium macutatum L.).
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
-глюкозид) – 3,7%; кумаринами (скополетин, скополетин-7 
<0,05 – для качественных (метод углового преобразования Фишера) [4].
1. В ходе выполнения эксперимента предлагаемое средство, содержащее вытяжку из сухой надземной части с цветками болиголова пятнистого при соотношении компонентов, в %: сухая надземная часть с цветками – 10, спирт этиловый 40%-ный – 90, в дозах 0,5; 1,0; 2,0 мл/кг; метамизол натрия в дозе 250,0 мг/кг, вводили опытным животным и растворитель (в эквивалентном объеме) животным контрольной группы через зонд в желудок в течение 5 дней и за 1 час до внутрибрюшинного введения 1% уксусной кислоты.