Патент на изобретение №2367433
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
(54) ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ МАСТИТА У КОРОВ В ПЕРИОД ЛАКТАЦИИ
(57) Реферат:
Изобретение относится к области ветеринарии. Препарат состоит из следующих компонентов, %: Линкомицина гидрохлорид 2,0-4,0; Диоксидин 0,5-1,0; Моноглицерид мягкий 3,0; Моноглицерид дистиллированный 3,0; Вазелиновое масло До 100. Препарат применяют в период лактации для лечения всех форм мастита. Перед введением препарата секрет вымени выдаивают из пораженной доли и утилизируют, сосок дезинфицируют. Содержимое щприца-тюбика или флакона перед применением нагревают до 37°С, тщательно встряхивают до получения равномерной суспензии, из флакона набирают в стерильный шприц 10 мл. Шприц или шприц-тюбик плотно прижимают к наружному отверстию соскового канала, препарат вводят в сосковую цистерну вымени осторожным нажатием на поршень шприца. После введения проводят легкий массаж соска пораженной доли вымени снизу вверх. В зависимости от тяжести воспалительного процесса препарат вводят в дозе 10 мл один раз в сутки (лучше после вечернего доения) с интервалом 24 часа до полного излечивания пораженной доли вымени (2-4 раза). Технический результат – повышение терапевтической эффективности. 9 табл.
Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к препаратам для лечения мастита у коров в период лактации. Мастит – воспаление молочной железы, которое возникает в ответ на воздействие неблагоприятных механических, физических, химических и биологических факторов. Основными факторами, способствующими возникновению и развитию мастита, являются техническое несовершенство доильных установок, нарушение технологии и правил машинного доения коров. В начале возникает раздражение, которое при многократном повторении переходит в асептическое воспаление – скрытый мастит. Снижается общая и локальная (вымени) резистентность, создаются условия для проникновения и размножения различной условно-патогенной и патогенной микрофлоры, обусловливающей воспаление различных форм от субклинической, протекающей самостоятельно на протяжении одной, двух лактаций и приводящую долю к атрофии, или трансформируясь в клинически выраженный (серозный, катаральный) мастит и т.д. Заболевания молочной железы коров имеют широкое распространение и наносят животноводству большой экономический ущерб, исчисляющийся сотнями миллионов рублей. Он слагается из недополучения молока, преждевременной выбраковки коров, высокой заболеваемости молодняка. Все это нарушает ритмично-поточное производство молока, снижает производственную и экономическую эффективность молочного скотоводства, что негативно сказывается на обеспечении молочными продуктами население страны. Поэтому разработка новых высокоэффективных средств, методов лечения и профилактики мастита у коров имеет актуальное значение. В настоящее время отечественные и зарубежные производители выпускают препараты для лечения больных маститом коров, включающие антибиотики, сульфаниламидные, нитрофурановые и другие средства. Но не все они дают желаемый эффект, что прежде всего объясняется снижением чувствительности к данным средствам микрофлоры, вызывающей мастит. В связи с этим возникает необходимость создания новых комплексных препаратов широкого спектра действия. В качестве аналога к предлагаемому препарату нами взят Мастисан А, рекомендованный для лечения мастита у животных, содержащий в своем составе калиевую или натриевую соль бензилпеницилина, стрептомицин, норсульфазол или сульфадимезин, суспензированный в растительном масле, при следующем соотношении компонентов, ЕД и г/мл: Натриевая или калиевая соль бензилпеницилина – 20000 ЕД/мл Сульфат стрептомицина – 20000 ЕД/мл Норсульфазол или сульфадимезин – 0,004 г/мл Масляная основа до 1 мл Доза введения составляет 5-20 мл в сосковую цистерну вымени с интервалом 24 часа до полного излечения [Ветеринарные препараты России. Справочник. М., 2004. Ч.1. – С.469]. Известен препарат Мастисан Б, содержащий в своем составе: Сульфат неомицина – 250 ЕД/мл Сульфадимезин – 0,0035 г/мл Метилурацил – 0,0035 г/мл Масляная основа до 1 мл [Антибиотики, сульфаниламиды и нитрофураны в ветеринарии: Справочник / В.Ф.Ковалев, И.Б.Виолин и др. – М.: Агропромиздат, 1988. – С.124]. Известен препарат Мастисан Е, содержащий в своем составе: Эритромицин 11250 ЕД/мл Сульфадимезин – 0,004 г/мл Масляная основа до 1 мл [Ветеринарные препараты России. Справочник. М., 2004. Ч.1. – С.469]. Известен препарат диеномаст. Диеномаст – комплексный препарат, содержащий гентамицина сульфат (2000 мкг/г), диоксидин (1000 мкг/г), воск пчелиный и масло вазелиновое [Ветеринарные препараты России. Справочник. М., 2004. Ч.1. – С.461]. Общим недостатком известных препаратов является низкая терапевтическая эффективность, так как при многократном применении антибиотикосодержащих препаратов отмечали формирование устойчивости (резистентности) к ним микроорганизмов. Большинство препаратов, выпускаемых в виде суспензий, при хранении расслаиваются, а растительные масла окисляются. Прототипом изобретения является препарат для лечения мастита у коров в период лактации, состоящий из следующих компонентов (г в 100 мл): неомицина сульфат – 2, линкомицина гидрохлорид – 2, моноглицерид мягкий – 3, моноглицерид дистиллированный – 3, масло – до 100 [RU, 2180559, С1, 18.04.2002 г.]. Данный препарат недостаточно эффективен, т.к. комбинация антимикробных средств данного препарата обеспечивает лишь аддитивное действие. Технический результат изобретения – повышение терапевтической эффективности. Технический результат достигается за счет использования линкомицина гидрохлорида как антибиотика широкого спектра действия и диоксидина, эффективного при инфекциях, трудно поддающихся лечению другими антимикробными средствами, в виде стабильной суспензии в масляной основе, не действующей раздражающе на ткани вымени. По сравнению с препаратом-прототипом существенными отличительными признаками предлагаемого изобретения являются признаки, характеризующие введение в состав препарата антибиотика широкого спектра действия – линкомицина гидрохлорида и химиотерапевтического средства – диоксидина, эффективного при недостаточной активности других антибиотиков. В качестве эмульгаторов в основу препарата введены моноглицерид мягкий и моноглицерид дистиллированный в эффективном количестве. Препарат для лечения мастита у коров в период лактации состоит из следующих компонентов: Линкомицина гидрохлорид – 2,0-4,0% Диоксидин – 0,5-1,0% Моноглицерид мягкий – 3,0% Моноглицерид дистиллированный – 3,0% Масло вазелиновое – до 100%. Достижение технического результата от использования предлагаемого препарата объясняется тем, что входящий в состав лекарственного средства линкомицина гидрохлорид эффективен в отношении большинства грамположительных кокковидных (стафилококков, стрептококков, пневмококков) и некоторых грамположительных палочковидных микроорганизмов, микоплазм и бактерий, устойчивых к другим антибиотикам. Линкомицин подавляет синтез белка в микробной клетке путем взаимодействия с SOS – субъединицами рибосом. Он блокирует образование полисомальных функциональных комплексов и трансляцию связанных с транспортом РНК аминокислот [Навашин С.М., Фомина И.П. Рациональная антибиотикотерапия. М., «Медицина», 1982, с.146-149]. Входящий в препарат диоксидин относится к хиноксалиновому ряду – 1,4-ди-N-окись-2,3-ди(оксиметил), хиноксалин проявляет высокую антимикробную активность в отношении грамотрицательных и грамположительных микроорганизмов. Наибольшему влиянию диоксидина подвержены грамотрицательные микроорганизмы [«Временное наставление по применению диоксидина в ветеринарии». Утв. Главным управлением ветеринарии 5 ноября 1991 г.]. Введенные в основу препарата моноглицериды используются в качестве эмульгаторов и стабилизаторов пищевых жиров, косметических кремов, фармацевтических мазей, пластификаторов [Химическая энциклопедия. М.: Изд. «Сов. Энциклопедия», 1989, т.1, с.584-585]. Заявляемый препарат применяют в период лактации для лечения всех форм мастита. Перед введением препарата секрет вымени выдаивают из пораженной доли и утилизируют, сосок дезинфицируют. Содержимое щприца тюбика или флакона перед применением нагревают до 37°С, тщательно встряхивают до получения равномерной суспензии, из флакона набирают в стерильный шприц 10 мл. Шприц или шприц-тюбик плотно прижимают к наружному отверстию соскового канала, препарат вводят в сосковую цистерну вымени осторожным нажатием на поршень шприца. После введения проводят легкий массаж соска пораженной доли вымени снизу вверх. В зависимости от тяжести воспалительного процесса препарат вводят в дозе 10 мл один раз в сутки (лучше после вечернего доения) с интервалом 24 часа до полного излечивания пораженной доли вымени (2-4 раза). Во время лечения и в течение 3 суток после последнего введения препарата молоко из пораженных долей вымени выдаивают в отдельную посуду, обезвреживают и утилизируют, а из остальных долей вымени скармливают животным после кипячения. Для получения дисперсной среды 6,0% моноглицеридов растворяют при температуре 80°С в вазелиновом масле, добавленном до 100%. Смесь автоклавируют при температуре 120°С в течение 1,5-2 часов. В охлажденную до температуры 30-35°С основу вносят навеску порошков: линкомицина гидрохлорида 2-4% и диоксидина 0,5-1%, предварительно измельченных на шаровой мельнице, включают мешалку на 15-20 минут и фасуют. По внешнему виду препарат представляет собой устойчивую маслянистую суспензию вязкой консистенции со специфическим запахом, светло -желтого цвета с зеленоватым оттенком. При температуре 35°С суспензия имеет жидкую консистенцию. Препарат полностью сохраняет исходные свойства (внешний вид, цвет, подлинность, массовая доля диоксидина, массовая доля линкомицина гидрохлорида, микробная чистота, механические включения) и не расслаивается в течение 12 месяцев хранения при температуре от 0 до 25°С. Использование в пищу людям молока допускается через 72 часа после последнего введения при условии полного исчезновения клинических признаков мастита. Убой животных на мясо разрешается не ранее, чем через 7 суток после последнего введения препарата. Мясо животных, вынужденно убитых ранее этого срока, может быть использовано для производства мясокостной муки или в корм пушным животным. Проверка эффективности препарата проведена на коровах, принадлежащих ЗАО «Должанское» Вейделеевского района Белгородской области, ЗАО «Манино» Калачаевского района Воронежской области, АОНН «Успенское» и СПК «Здоровецкий» Ливенского района Орловской области. Сущность технического решения поясняется примерами. Пример 1 С целью проверки эффективности прототипа изобретения была изучена антимикробная активность линкомицина, неомицина и их комбинации в отношении основных возбудителей мастита. Результаты представлены в таблице 1.
Проведенное изучение антимикробной активности данного лекарственного препарата и отдельных его компонентов показало, что комбинация антимикробных средств данного препарата обеспечивает аддитивное действие, т.е. общий эффект равен сумме действия каждого компонента из них в отдельности. Пример 2 Для выявления оптимального соотношения компонентов и эффективности препарата были составлены три рецептуры. Рецептура Рецептура 2: диоксидин 0,5%; линкомицин 4,0%; моноглицерид дистиллированный 3,0%; моноглицерид мягкий 3,0%; масло вазелиновое – до 100%. Рецептура 3: диоксидин 0,75%; линкомицин 3,25%; моноглицерид дистиллированный 3,0%; моноглицерид мягкий 3,0%; масло вазелиновое – до 100%. С целью определения эффективности предлагаемого препарата была подобрана 71 корова больная субклиническим маститом, разделенная по принципу аналогов на четыре группы. Животные первой, второй и третьей групп были подвергнуты терапии предлагаемым препаратом (различной рецептуры) в дозе 10 мл один раз в сутки в течение 2-4 дней, четвертой – диеномастом согласно наставлению по его применению. Через 7-10 дней животных обследовали клинически, а молоко с 2% раствором мастидина, пробой отстаивания, выборочно путем подсчета количества соматических клеток.
Как видно из представленных в таблицах 2-5 данных, более высоким терапевтическим действием обладает предлагаемый препарат (рецептура 1; 2; 3) в сравнении с диеномастом. Наиболее высоким терапевтическим действием обладает предлагаемый препарат рецептуры Таким образом, высокий терапевтический эффект достигнут при применении следующей композиции препарата для лечения мастита у коров в перид лактации: диоксидин 0,75%; линкомицин 3,25%; моноглицерид дистиллированный 3,0%; моноглицерид мягкий 3,0%; масло вазелиновое – до 100%. Пример 3. Влияние препарата (диоксидин 0,75%; линкомицин 3,25%; моноглицерид дистиллированный 3,0%; моноглицерид мягкий 3,0%; масло вазелиновое – до 100%) для лечения мастита у коров на молочную железу и организм лактирующих коров изучили на трех клинически здоровых животных, находящихся на 3-4 месяце лактации, путем интрацистернального введения препарата, подогретого до 37°С, в дозе 10 мл в левую переднюю долю вымени, а правая передняя доля служила контролем. Через 3; 6; 12; 48 и 72 часа после введения препарата коров обследовали клинически, а также отбирали пробы молока из этих четвертей вымени для оценки реакции с 2% раствором мастидина, определения количества соматических клеток (СК) и постановки пробы отстаивания. Результаты исследований приведены в таблицах 6 и 7.
Установлено, что после интрацистернального введения препарата для лечения мастита у коров в период лактации в дозе 10 мл происходит увеличение числа соматических клеток (таблица 6) через 3 часа в 1,45 раза (с 316,6±17,1 до 459,8±13,9 тыс/мл), через 6 ч – в 2,57; через 12 ч – в 3,9; через 24 ч – в 4,98; через 48 ч – в 2,22 раза и к 72 ч – приближается к исходному уровню (368,9±30,4 тыс/мл). При этом реакция секрета вымени с 2% раствором мастидина в течение 48 часов была положительной, а проба отстаивания – отрицательной. После интрацистернального введения препарата не установлено заметных изменений со стороны общего состояния организма животных. Таким образом, препарат для лечения мастита в период лактации обладает умеренным раздражающим действием на молочную железу коров, признаки которого исчезают через 72 часа после введения, и может быть рекомендован для интрацистернального введения с целью лечения мастита у коров. Пример 4 Изучение антимикробного действия препарата для лечении мастита у коров в период лактации (диоксидин 0,75%; линкомицин 3,25%; моноглицерид дистиллированный 3,0%; моноглицерид мягкий 3,0%; масло вазелиновое – до 100%) и его компонентов провели методом серийных разведений в жидкой питательной среде. Для проведения опытов использовали патогенные культуры микробов, выделенные из секрета больных маститом коров, а также музейные штаммы. Данные по определению антимикробной активности приведены в таблице 8.
Как видно из представленных данных, комбинация диоксидина в соотношении 1:4 обладает широким спектром и высоким антимикробным действием в отношении основных возбудителей мастита в концентрации 3,1-25,0 мкг/мл, что превышает антимикробную активность диоксидина и линкомицина в отдельности в 2-16 раз. При изучении антибактериального эффекта сочетания линкомицина и диоксидина в опытах in vitro нами было установлено, что минимальная подавляющая концентрация каждого из антибиотиков в присутствии другого снижается в значительной степени. Например, в присутствии линкомицина гидрохлорида в концентрации 2,51-5,12 мкг/мл минимально подавляющая концентрация (МПК) диоксидина в отношении стафилококка золотистого-209Р и стафилококка золотистого-586 снижается до 0,59-1,18 мкг/мл (в 21,2 раза). И наоборот, наличие в комбинации диоксидина в концентрации 1,18 мкг/мл снижает МПК линкомицина до 5,12 мкг/мл (в 2,44 раза). При добавлении к диоксидину линкомицина гидрохлорида в концентрации 2,51-5,12 мкг/мл МПК первого в отношении стрептококка агалактийного (штаммы 586; 587; 588) снижается до 0,59-1,18 (в 21,0-84,7 раза). В то же время присутствие диоксидина в концентрации 0,59-1,18 мкг/мл в отношении данного микроорганизма снижает МПК линкомицина до 2,51-5,12 мкг/мл (в 2,44-9,9 раз). В отношении кишечной палочки 643 и стрептококка группы D, в присутствии линкомицина в концентрации 4,9 мкг/мл, МПК диоксидина снижается до 10,6 мкг/мл (в 4,9 раза), а наличие диоксидина в концентрации 10,6 мкг/мл в отношении данных микроорганизмов снижает МПК линкомицина гидрохлорида до 4,9 мкг/мл (в 10,6 раза). Обоснованность данной комбинации обусловлена тем, что в лекарственной форме одновременно сочетаются два антибактериальных компонента. Это обеспечивает синергидный эффект за счет того, что оба компонента действуют в одну фазу клеточного роста, но на разные метаболические пути. Диоксидин проявляет высокую антимикробную активность в отношении грамотрицательных и грамположительных микроорганизмов. Наибольшему влиянию диоксидина подвержены грамотрицательные микроорганизмы [Временное наставление по применению диоксидина в ветеринарии. Утв. Главным управлением ветеринарии 5 ноября 1991 г.]. В основе антибактериального действия диоксидина лежит избирательное подавление синтеза ДНК. Кроме этого, препарат снижает активность внеклеточной нуклеазы и плазмокоагулазы у микроорганизмов, что приводит к нарушению функции генетического аппарата микробной клетки и в результате подавляется синтез биологически активных макромолекул, являющихся факторами патогенности. Линкомицин эффективен в отношении большинства грамположительных кокковидных (стафилококков, стрептококков, пневмококков) и некоторых грамположительных палочковидных микроорганизмов, микоплазм и бактерий, устойчивых к другим антибиотикам. Линкомицин подавляет синтез белка в микробной клетке путем взаимодействия с SOS – субъединицами рибосом. Он блокирует образование полисомальных функциональных комплексов и трансляцию связанных с транспортом РНК аминокислот [Навашин С.М., Фомина И.П. Рациональная антибиотикотерапия. М., «Медицина», 1982, с.146-149]. Пример 5. В производственных условиях показано (таблица 9), что предложенный препарат в совокупности линкомицина гидрохлорида и диоксидина обеспечивает достижение нового сверхсуммарного эффекта по сравнению с одним из препаратов-аналогов (диеномастом).
Таким образом, препарат для лечения мастита у коров в период лактации обладает более высокой, по сравнению с прототипом, терапевтической эффективностью, обусловленной использованием линкомицина гидрохлорида как антибиотика широкого спектра действия и диоксидина, эффективного при инфекциях, трудно поддающихся лечению другими антимикробными средствами, в виде стабильной суспензии на масляной основе, не действующей раздражающе на ткани молочной железы.
Формула изобретения
Препарат для лечения мастита у коров в период лактации, содержащий в качестве антибиотика линкомицина гидрохлорид, в качестве эмульгаторов – моноглицерид мягкий и моноглицерид дистиллированный и масляную основу, отличающийся тем, что он дополнительно содержит диоксидин, а в качестве масляной основы – вазелиновое масло при следующем соотношении компонентов, %:
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
п/п
