Патент на изобретение №2364393
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИИ ПИКАМИЛОНОМ ПРИ L-NAME ИНДУЦИРОВАННОМ ДЕФИЦИТЕ ОКСИДА АЗОТА
(57) Реферат:
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиологии и фармакологии. Для этого в эксперименте белым крысам самцам линии Wistar моделируют эндотелиальную дисфункцию путем ежедневного внутрибрюшинного введения в течение 7 суток N-нитро-L-аргинин метилового эфира в дозе 25 мг/кг. Затем в течение последующих 7 суток ежедневно вводят пикамилон в дозе 30 мг/кг внутрижелудочно. Способ обеспечивает эффективную коррекцию эндотелиальной дисфункции в специфических условиях моделирования. 2 табл.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиофармакологии. Наиболее близким к заявленному решению является способ фармакологической коррекции эндотелиальной дисфункции ГАМК-ергическими производными, описанный И.Н.Тюренковым, А.В.Воронковым, А.И.Робертус в статье «Фармакологическая коррекция эндотелиальной дисфункции, вызванной гормональной недостаточностью», Психофармакология и биологическая наркология, 2007, т.7, спец. выпуск, часть 2, с.1983, который заключается в введении ГАМК-ергических средств – РГПУ-189 (15 мг/кг), РГПУ-147 и РГПУ-38 (50 мг/кг) при моделировании экспериментального сахарного диабета и при недостаточности половых гормонов. Эндотелиальная функция тестировалась введением ацетилхолина с регистрацией кровотока в коре мозга. Основным недостатком способа является коррекция эндотелиальной дисфункции ГАМК-ергическими производными в условиях снижения биодоступности оксида азота и гормональной недостаточности, вызванной введением стрептозоцина и кастрацией животных, а также отсутствие оценки функционального состояния сосудистого русла в условиях целостного организма при моделировании дефицита оксида азота. Поэтому результаты коррекции эндотелиальной дисфункции при повреждении в системе L-аргининNO, которое связано в основном с недостаточностью эндотелиальной NO-синтазы, с помощью ГАМК-ергических средств неудовлетворительны. Техническим результатом изобретения является способ коррекции эндотелиальной дисфункции при L-NAME индуцированном дефиците оксида азота, включающий использование ГАМК-ергического средства – пикамилона. Технический результат достигается тем, что на фоне моделирования эндотелиальной дисфункции в эксперименте внутрибрюшинным ежедневным введением лабораторному животному в течение 7 суток блокатора синтеза NO N-нитро-L-аргинин метилового эфира (L-NAME) в дозе 25 мг/кг, проводится ее коррекция путем ежедневного внутрижелудочного введения пикамилона в дозе 30 мг/кг. СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ. Опыты проводят на белых крысах самцах линии Wistar массой 250-300 г. N-нитро-L-аргинин метиловый эфир (L-NAME) вводится внутрибрюшинно в дозе 25 мг/кг/сут. ГАМК-ергическое средство – пикамилон вводится одновременно с L-NAME в дозе 30 мг/кг/сут. На 8 день от начала эксперимента под наркозом (этаминал-натрия 50 мг/кг) вводят катетер в левую сонную артерию для регистрации показателей артериального давления (АД), болюсное введение фармакологических агентов осуществляют в правую бедреную вену. Показатели гемодинамики: систолическое артериальное давление (САД), диастолическое артериальное давление (ДАД) и частоту сердечных сокращений (ЧСС) измеряют непрерывно посредством датчика и компьютерной программы “Biopac”. Функциональные пробы: эндотелийзависимая вазодилатация (ЭЗВ) – внутривенное введение ацетилхолина (АХ) в дозе 40 мкг/кг, эндотелийнезависимая вазодилатация (ЭНЗВ) – внутривенное введение нитропруссида натрия (НП) в дозе 30 мкг/кг. При статистической обработке данных рассчитывали среднее значение, величину стандартного отклонения. Различия считали достоверными при р<0,05. ПРИМЕР КОНКРЕТНОГО ВЫПОЛНЕНИЯ Болюсное внутривенное введение АХ в течение 3-5 сек приводило к резкому падению артериального давления, достигающего пика у интактных животных: для систолического давления (САД) 84,3±4,4, для диастолического давления (ДАД) – 38,7±2,8 и для среднего артериального давления (СрАД) 53,9±2,7 мм рт.ст., при этом в течение первых 2-3 сек развивалась резкая брадикардия до 130-150 ударов в минуту. Восстановление АД происходило в среднем за 42,2±0,8 сек после нормализации сердечного ритма. ЭНЗВ также характеризовалась снижением САД до 83,0±3,7, ДАД до 42,1±4,4 и СрАД до 55,7±3,5 мм рт.ст. с последующим полным восстановлением в среднем в течение 45,1±1,0 сек. Блокада NO-синтазы с помощью длительного, ежедневного, в течение 7-суток внутрибрюшинного введения L-NAME (N-нитро-L-аргинин метиловый эфир в дозе 25 мг/кг) вызывало артериальную гипертензию (САД – 190,3±6,7, ДАД – 145,0±3,9, СрАД – 160,1±4,6 мм рт.ст.) и приводила к меньшему снижению показателей АД после введения АХ (САД до 110,6±5,2, ДАД до 82,8±6,6, СрАД до 92,1±6,1 мм рт.ст.) и НП (САД до 88,7±4,7, ДАД до 50,8±4,2 и СрАД до 63,4±4,1 мм рт.ст.) по сравнению с интактными животными. Одновременное введение L-NAME и пикамилона приводило к достоверному снижению показателей исходных значений АД (таблица 1). Таблица 1 Динамика показателей АД и ЧСС при L-NAME-индуцированном дефиците оксида азота и коррекции эндотелиальной дисфункции пикамилоном
Принципиальная разница в ЭЗВ и ЭНЗВ у интактных животных и животных с введением ингибитора NO-синтазы L-NAME закономерно привела нас к необходимости выведения специального показателя, характеризующего степень эндотелиальной дисфункции, являющегося отношением площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение НП к площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение АХ. Мы рассчитывали это отношение у каждого животного интактной группы и крыс после моделирования блокады NO-синтазы и получили разницу данного показателя в 5 раз – соответственно 1,1 у интактных и 5,4 у животных, получавших L-NAME. Таким образом, для дальнейшей оценки влияния АХ и НП при ЭЗВ и ЭНЗВ нами использовано это отношение как показатель коррекции эндотелиальной дисфункции. Так, в группе, где на фоне введения ингибитора NO-синтазы L-NAME вводился пикамилон, это отношение соответствовало значению 1,8±0,3 (таблица 2). Таблица 2 Показатели, отражающие коррекцию эндотелиальной дисфункции на фоне L-NAME-индуцированного дефицита оксида азота
Таким образом, полученные результаты позволяют констатировать коррекцию эндотелиальной дисфункции пикамилоном на фоне L-NAME-индуцированного дефицита оксида азота.
Формула изобретения
Способ коррекции эндотелиальной дисфункции, отличающийся тем, что в эксперименте белым крысам самцам линии Wistar с эндотелиальной дисфункцией на фоне ее моделирования внутрибрюшинным введением ингибитора эндотелиальной синтазы N-нитро-L-аргинин метилового эфира в дозе 25 мг/кг ежедневно, в течение 7 сут, оценивая степень развития дисфункции по отношению показателей эндотелийнезависимой и эндотелийзависимой вазодилятации, внутрижелудочно вводят пикамилон (30 мг/кг) ежедневно, в течение 7 сут.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
4, с.42-45. ALBERCHT J. et al. “Glutamine in the central nervous system: function and dysfunction”. Front Biosci 2007 Jan 1; 12:333-43.