|
(21), (22) Заявка: 2007112882/15, 28.12.2004
(24) Дата начала отсчета срока действия патента:
28.12.2004
(43) Дата публикации заявки: 20.11.2008
(46) Опубликовано: 10.08.2009
(56) Список документов, цитированных в отчете о поиске:
RU 2216547 С2, 20.11.2003. RUBINA A.Y. at al. Hydrogel-based protein microchips: manufacturing, properties, and applications. Biotechniques. 2003; 34(5):1008-14, 1016-20, 1022. NIEMEYER C.M. at al. Self-assembly of DNA-streptavidin nanostructures and their use as reagents in immuno-PCR. Nucleic Acids Res. 1999, 1; 27(23):4553-61.
(85) Дата перевода заявки PCT на национальную фазу:
10.05.2007
(86) Заявка PCT:
RU 2004/000524 20041228
(87) Публикация PCT:
WO 2006/071132 20060706
Адрес для переписки:
103735, Москва, ул. Ильинка, 5/2, ООО “Союзпатент”, пат.пов. А.Ю.Соболеву
|
(72) Автор(ы):
Дарий Екатерина Львовна (RU), Дементьева Екатерина Игоревна (RU), Бутвиловская Вероника Игоревна (RU), Рубина Алла Юрьевна (RU), Стомахин Андрей Александрович (RU), Савватеева Елена Николаевна (RU), Заседателев Александр Сергеевич (RU)
(73) Патентообладатель(и):
Учреждение Российской академии наук Институт Молекулярной Биологии им. В.А. Энгельгардта РАН (ИМБ РАН) (RU)
|
(54) БИОЛОГИЧЕСКИЙ МИКРОЧИП ДЛЯ МНОЖЕСТВЕННОГО ПАРАЛЛЕЛЬНОГО ИММУНОЛОГИЧЕСКОГО АНАЛИЗА СОЕДИНЕНИЙ И СПОСОБЫ ИММУНОАНАЛИЗА, В КОТОРЫХ ОН ИСПОЛЬЗУЕТСЯ
(57) Реферат:
Изобретение относится к биохимии и молекулярной биологии, в частности к иммунохимическому анализу. Предложен микрочип для множественного параллельного количественного иммунологического анализа соединений. Биочип представляет собой массив трехмерных гидрогелевых элементов заданного объема, сформированных на подложке методом фото- или химически индуцируемой полимеризации и содержащих одинаковые или различные по своей природе биологические молекулы (лиганды). Способ проведения количественного иммуноанализа предусматривает инкубацию микрочипа в реакционной среде, включающей анализируемый образец, для образования комплексов. Биологические микрочипы для количественного иммунологического анализа и способ проведения множественного количественного параллельного анализа соединений могут найти применение в анализе широкого круга низкомолекулярных и высокомолекулярных соединений, в медицине, фармакологии, пищевой промышленности, охране окружающей среды, в научных исследованиях, в частности в протеомике. 7 н. и 26 з.п. ф-лы, 2 табл., 11 ил.
Текст описания приведен в факсимильном виде.                                                     
Формула изобретения
1. Биологический микрочип для множественного параллельного количественного иммунологического анализа соединений, представляющий собой массив трехмерных гидрогелевых элементов заданного объема, сформированных на подложке методом фото- или химически индуцируемой полимеризации и содержащих одинаковые или различные по своей природе биологические молекулы (лиганды), и допускающий последовательное проведение реакций различного типа.
2. Биологический микрочип по п.1, характеризующийся тем, что гидрогелевый элемент содержит иммобилизованный лиганд белковой или небелковой природы, который при инкубации микрочипа в реакционной среде, включающей образец, содержащий подлежащие анализу соединения, образует специфический иммунный комплекс типа «антиген-антитело».
3. Биологический микрочип по п.1, характеризующийся тем, что лиганды, иммобилизованные в гидрогелевых ячейках, выбирают из группы, включающей антитела любого типа и антигены различной природы.
4. Биологический микрочип по п.1, характеризующийся тем, что анализируемые соединения представляют собой соединения, которые выбирают из группы, включающей опухолеассоциированные антигены – маркеры онкологических заболеваний, общий иммуноглобулин Е человека, специфические антитела (иммуноглобулины Е человека) против различных аллергенов, полисахариды и специфические антитела против полисахаридов.
5. Биологический микрочип по п.1, характеризующийся тем, что для количественного иммуноанализа опухолеассоциированных антигенов – маркеров онкологических заболеваний – в качестве иммобилизованных лигандов используют антитела к указанным опухолеассоциированным антигенам или сами опухолеассоциированные антигены.
6. Биологический микрочип по п.1, характеризующийся тем, что для количественного анализа общего иммуноглобулина Е человека в качестве иммобилизованных лигандов используют антитела против иммуноглобулинов Е человека или иммуноглобулины Е человека.
7. Биологический микрочип по п.1, характеризующийся тем, что для количественного анализа специфических антител к различным аллергенам в качестве иммобилизованных лигандов используют различные аллергены.
8. Биологический микрочип по п.1, характеризующийся тем, что для анализа полисахаридов или специфических антител против полисахаридов в качестве иммобилизованных лигандов используют различные полисахариды и/или антитела против полисахаридов.
9. Способ множественного параллельного количественного иммуноанализа соединений на биологическом микрочипе, охарактеризованном в п.1, предусматривающий а) инкубацию биологического микрочипа в реакционной среде, включающей образец, содержащий подлежащие анализу соединения, для образования иммунных комплексов с иммобилизованными на микрочипе лигандами, которую при необходимости проводят в условиях перемешивания; б) детекцию образовавшегося комплекса; в) количественное определение анализируемого соединения.
10. Способ по п.9, представляющий собой количественный иммуноанализ любого типа (прямой, непрямой, конкурентный, сэндвич-анализ и др.).
11. Способ по п.9, в котором для количественного определения на стадии в) проводят стадии а)-б) с известными концентрациями анализируемого соединения и строят калибровочную зависимость, по которой определяют содержание анализируемого соединения.
12. Способ по п.9, в котором на стадии б) детекцию образовавшегося комплекса осуществляют флуориметрически, хемилюминометрически, масс-спектрометрически или путем проведения иммуно-ПЦР с последующей регистрацией результатов ПЦР на том же микрочипе.
13. Способ множественного параллельного количественного иммуноанализа онкомаркеров на биологическом микрочипе, охарактеризованном в п.1, содержащем иммобилизованные антитела против онкомаркеров и/или иммобилизованные онкомаркеры, предусматривающий а) инкубацию биологического микрочипа в реакционной среде, включающей образец, содержащий подлежащие анализу онкомаркеры, для образования иммунного комплекса с иммобилизованными на микрочипе лигандами, которую при необходимости проводят в условиях перемешивания; б) детекцию образовавшегося комплекса; в) количественное определение анализируемого онкомаркера.
14. Способ по п.13, представляющий собой количественный иммуноанализ любого типа (прямой, непрямой, конкурентный, сэндвич-анализ и др.).
15. Способ по п.13, в котором для количественного определения на стадии в) проводят стадии а)-б) с известными концентрациями анализируемого онкомаркера и строят калибровочную зависимость, по которой определяют содержание анализируемого онкомаркера в образце.
16. Способ по п.13, в котором на стадии б) детекцию образовавшегося комплекса осуществляют флуориметрически, хемилюминометрически, масс-спектрометрически или путем проведения иммуно-ПЦР с последующей регистрацией результатов ПЦР на том же микрочипе.
17. Способ множественного параллельного количественного иммуноанализа общего иммуноглобулина Е человека на биологическом микрочипе, охарактеризованном в п.1, содержащем иммобилизованные антитела против иммуноглобулинов Е человека (анти-IgE) или иммобилизованные иммуноглобулины Е человека (IgE), предусматривающий а) инкубацию биологического микрочипа в реакционной среде, включающей образец, содержащий подлежащие анализу общие иммуноглобулины человека, для образования иммунного комплекса с иммобилизованными на микрочипе лигандами, которую при необходимости проводят в условиях перемешивания; б) детекцию образовавшегося комплекса; в) количественное определение анализируемого общего иммуноглобулина Е человека.
18. Способ по п.17, представляющий собой количественный иммуноанализ любого типа (прямой, непрямой, конкурентный, сэндвич-анализ и др.).
19. Способ по п.17, в котором для количественного определения на стадии в) проводят стадии а)-б) с известными концентрациями общего иммуноглобулина Е человека и строят калибровочную зависимость, по которой определяют содержание анализируемого общего иммуноглобулина Е человека в образце.
20. Способ по п.17, в котором на стадии в) детекцию образовавшегося комплекса осуществляют флуориметрически, хемилюминометрически, масс-спектрометрически или путем проведения иммуно-ПЦР с последующей регистрацией результатов ПЦР на том же микрочипе.
21. Способ множественного параллельного количественного иммуноанализа аллергенспецифических иммуноглобулинов Е на биологическом микрочипе, охарактеризованном в п.1, содержащем иммобилизованные специфические аллергены, предусматривающий а) инкубацию биологического микрочипа в реакционной среде, включающей образец, содержащий подлежащие анализу аллергенспецифические IgE, для образования комплекса иммобилизованный аллерген – аллергенспецифическое антитело, которую при необходимости проводят в условиях перемешивания; б) детекцию образовавшегося комплекса; в) количественное определение анализируемого аллергенспецифического IgE.
22. Способ по п.21, представляющий собой количественный иммуноанализ любого типа (прямой, непрямой, конкурентный, сэндвич-анализ и др.).
23. Способ по п.21, в котором для количественного определения на стадии в) проводят стадии а)-б) с известными концентрациями аллергенспецифических IgE и строят калибровочную зависимость, по которой определяют содержание анализируемого аллергенспецифического IgE в образце.
24. Способ по п.21, в котором на стадии б) детекцию образовавшегося комплекса осуществляют флуориметрически, хемилюминометрически, масс-спектрометрически или путем проведения иммуно-ПЦР с последующей регистрацией результатов ПЦР на том же микрочипе.
25. Способ множественного параллельного количественного иммуноанализа антител против полисахаридов на биологическом микрочипе, охарактеризованном в п.1, содержащем иммобилизованные полисахариды или антитела против полисахаридов, предусматривающий а) инкубацию биологического микрочипа в реакционной среде, включающей образец, содержащий подлежащие анализу антитела против полисахаридов, для образования комплекса полисахарид – антитело, которую при необходимости проводят в условиях перемешивания; б) детекцию образовавшегося комплекса; в) количественное определение антител против полисахаридов или полисахаридов.
26. Способ по п.25, где иммобилизованные полисахариды представляют собой трисахариды А и В – агглютиногены эритроцитов, определяющие группу крови человека.
27. Способ по п.25, в котором для количественного определения на стадии в) проводят стадии а)-б) с известными концентрациями анализируемого антитела против полисахарида и строят калибровочную зависимость, по которой определяют содержание анализируемого антитела против полисахарида в образце.
28. Способ по п.25, представляющий количественный иммуноанализ любого типа (прямой, непрямой, конкурентный, сэндвич-анализ и др.).
29. Способ по п.25, в котором на стадии б) детекцию образовавшегося комплекса осуществляют флуориметрически, хемилюминометрически, масс-спектрометрически или путем проведения иммуно-ПЦР с последующей регистрацией результатов ПЦР на том же микрочипе.
30. Способ множественного параллельного количественного иммуноанализа полисахаридов на биологическом микрочипе, охарактеризованном в п.1, содержащем иммобилизованные полисахариды или антитела против полисахаридов, предусматривающий а) инкубацию биологического микрочипа в реакционной среде, включающей образец, содержащий подлежащие анализу полисахариды, для образования комплекса полисахарид – антитело, которую при необходимости проводят в условиях перемешивания; б) детекцию образовавшегося комплекса; в) количественное определение антител против полисахаридов или полисахаридов.
31. Способ по п.30, в котором для количественного определения на стадии в) проводят стадии а)-б) с известными концентрациями анализируемого полисахарида и строят калибровочную зависимость, по которой определяют содержание анализируемого полисахарида в образце.
32. Способ по п.30, представляющий количественный иммуноанализ любого типа (прямой, непрямой, конкурентный, сэндвич-анализ и др.).
33. Способ по п.30, в котором на стадии б) детекцию образовавшегося комплекса осуществляют флуориметрически, хемилюминометрически, масс-спектрометрически или путем проведения иммуно-ПЦР с последующей регистрацией результатов ПЦР на том же микрочипе.
РИСУНКИ
QB4A – Регистрация лицензионного договора на использование изобретения
Лицензиар(ы): Учреждение Российской академии наук Институт молекулярной биологии им.В.А.Энгельгардта РАН
Вид лицензии*: НИЛ
Лицензиат(ы): Общество с ограниченной ответственностью “БИОЧИП-ИМБ”
Договор № РД0060400 зарегистрирован 12.02.2010
Извещение опубликовано: 27.03.2010 БИ: 09/2010
* ИЛ – исключительная лицензия НИЛ – неисключительная лицензия
|
|