Патент на изобретение №2360959
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ ХРАНЕНИЯ МИКОБАКТЕРИЙ ЛЕПРЫ
(57) Реферат:
Изобретение относится к микробиологии. Описан способ хранения микобактерий лепры, заключающийся в воздействии низких температур на инфицированный материал. Хранящийся материал подвергается охлаждению при температуре -18°С, что позволяет использовать бытовые морозильные камеры. Изобретение позволяет упростить способ хранения M.leprae.
Изобретение относится к медицине, а именно к лепрологии, и может быть, в частности, использовано для длительного хранения М.leprae.
В патентной и научной литературе другие данные о способах хранения микобактерий лепры отсутствуют. Предлагаемое изобретение решает основную задачу – упрощение способа. Сущность изобретения выражена совокупностью существенных признаков, достаточных для обеспечиваемого изобретением технического результата. Решение поставленной задачи предлагаемым способом состоит в том, что хранящийся материал подвергают охлаждению при температуре -18°С. Упрощение предлагаемого способа по сравнению с прототипом дает возможность хранить инфицированный материал, содержащий микобактерий лепры, без использования дорогостоящего холодильного оборудования, т.е. использовать бытовые морозильные камеры. Проведенный анализ патентной и научной литературы показал, что предлагаемый способ хранения М.leprae ранее не применялся. Предлагаемый нами способ позволяет длительно хранить M.leprae, что дает возможность использовать определенный штамм и определенный пассаж для исследования. Т.о. появляется возможность до некоторой степени стандартизировать источник получения различных биологических препаратов (в частности, антигенов для производства диагностических тест-систем). Хранение M.leprae при температуре -18°С (в бытовом морозильнике) является существенным отличием предлагаемого способа хранения и именно это отличие позволило получить положительный эффект в виде упрощения способа. Предлагаемый способ позволяет отказаться от использования низкотемпературных морозильных камер для хранения M.leprae. Предлагаемый способ хранения микобактерий лепры осуществляется следующим образом: ткань лепромы человека, больного лепрой, или лапа мыши, зараженной интраплантарно, помещается в стерильный пластиковый контейнер (бакпечатка одноразового применения) и хранится при температуре -18°С. Материал хранили от 3 до 12 месяцев (время наблюдения). При необходимости использования ткань размораживали и готовили суспензию для заражения животных. Предлагаемый способ прошел успешную апробацию в ФГУ «НИИ по изучению лепры Росздрава» в 1997-2007 гг. Ниже приводятся результаты апробации способа. Пример 1. Мыши линии BALB/C были заражены интраплантарно М.leprae, пассируемыми на мышах (IV пассаж), выделенными от больного К., в дозе 1×104 микробных тел на мышь. Материал хранили при температуре -18°С в течение 12 месяцев. Через 7 месяцев после заражения животных в месте инокуляции количество М.leprae составило 2,9×105+0,91, а через 12 месяцев после заражения достигло 3,68×105+0,59. Таким образом, получено интенсивное размножение М.leprae в месте инокуляции после длительного хранения при температуре -18°С. Пример 2. Мыши линии СВА были заражены интраплантарно М.leprae, пассируемыми на мышах (V пассаж), выделенными от больного К., в дозе 1×104 микробных тел на мышь. Материал хранили при температуре -18°С в течение 4 месяцев. Через 8 месяцев после заражения животных в месте инокуляции количество M.leprae составило 4,1×106+1,7. Таким образом, получено интенсивное размножение M.leprae в месте инокуляции после длительного хранения при температуре -18°С. Пример 3. Мыши линии СВА были заражены интраплантарно M.leprae, пассируемыми на мышах (IX пассаж), выделенными от больного Н., в дозе 1×104 микробных тел на мышь. Материал хранили при температуре -18°С в течение 4 месяцев. Через 8 месяцев после заражения животных в месте инокуляции количество M.leprae составило 1,1×108+0,07. Таким образом, получено интенсивное размножение M.leprae в месте инокуляции после длительного хранения при температуре -18°С. Предлагаемый способ позволяет осуществлять забор и хранение материала, содержащего микобактерий лепры с целью его дальнейшего исследования непосредственно в периферийных противолепрозных учреждениях, которые не оснащены специальным научным оборудованием, в частности низкотемпературными морозильными камерами. Предлагаемым способом достигается упрощение хранения M.leprae по сравнению с прототипом, которое заключается в уменьшении затрат, связанных с необходимостью использования низкотемпературных (-80°С) морозильных камер. Таким образом, авторами предложен новый, никем ранее не предлагаемый способ хранения M.leprae. Предлагаемый способ может быть рекомендован для использования в научных и клинических лабораториях противолепрозных учреждений системы здравоохранения.
Формула изобретения
Способ хранения микобактерий лепры, состоящий в воздействии низких температур на инфицированный материал, содержащий микобактерии лепры, отличающийся тем, что хранящийся материал подвергают охлаждению при температуре -18°С.
|
||||||||||||||||||||||||||
1. – P 8-22). Недостатком способа является необходимость использования дорогостоящего холодильного оборудования – низкотемпературных морозильных камер. Кроме того, жизнеспособность микобактерий лепры, замороженных при -80°С и затем подвергнутых оттаиванию, значительно снижалась судя по результатам роста в подушечке лапы мыши и их метаболической активности. Отмеченные недостатки не дают возможность получить конкретный технический результат – упрощение способа.