Патент на изобретение №2360923

(54) НОВЫЙ ЛИГАНД РЕЦЕПТОРА ЦИТОКИНА ZCYTOR17

(57) Реферат:

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии. Предложен полипептид и соответствующий полинуклеотид zcytor17lig и молекулы антитела против zcytor17 человека. Zcytor17lig человека является новым цитокином. Настоящее изобретение относится также к способам получения белка, его применению для стимуляции иммунной реакции у млекопитающего. Описан способ получения антитела к указанному белку и соответствующие антитела. Указанные полипептиды можно использовать при осуществлении способов стимуляции иммунной системы, пролиферации и/или развития гемопоэтических клеток in vitro и in vivo. 14 н. и 3 з.п. ф-лы, 3 ил., 21 табл.

Текст описания приведен в факсимильном виде.

Формула изобретения

1. Выделенный полипептид, содержащий последовательность аминокислотных остатков, выбранных из группы
(a) полипептида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:2 от остатка 38 (Val) до остатка 152 (Leu);
(b) полипептида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:2 от остатка 27 (Leu) до остатка 164 (Thr);
(c) полипептида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:2 от остатка 24 (Ser) до остатка 164 (Thr); и
(d) полипептида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:2 от остатка 1 (Met) до остатка 164 (Thr),
причем указанный полипептид связывается с рецептором zcytor17 человека.

2. Выделенный полипептид по п.1, где аминокислотные остатки 72, 133 и 147 являются цистеином.

3. Выделенный полипептид по п.1, который связывается с рецептором zcytor17, показанным в SEQ ID NO:5 или SEQ ID NO:71.

4. Экспрессирующий вектор, содержащий следующие функционально связанные элементы:
(а) промотор транскрипции;
(b) сегмент ДНК, кодирующий полипептид, который связывается с рецептором zcytor17 человека, содержащий аминокислотные остатки с 38 (Val) по 152 (Leu) SEQ ID NO:2; и
(c) терминатор транскрипции.

5. Культивируемая клетка, содержащая экспрессирующий вектор по п.4.

6. Способ получения полипептида, который включает в себя
культивирование клетки по п.5 в условиях, обеспечивающих экспрессию сегмента ДНК, и выделение полипептида, кодируемого указанным сегментом ДНК.

7. Способ стимуляции иммунной реакции у млекопитающего, предусматривающий стадию введения композиции, содержащей полипептид zcytor17lig, охарактеризованный в п.1, в приемлемом фармацевтическом носителе.

8. Способ обнаружения РНК zcytor17lig человека в биологическом образце, который включает в себя стадии
(a) контактирования зонда нуклеиновой кислоты zcytor17lig в условиях гибридизации либо (i) с молекулами испытуемой РНК, выделенными из биологического образца, либо (ii) с молекулами нуклеиновой кислоты, синтезированными из выделенных молекул РНК, при этом указанный зонд имеет нуклеотидную последовательность, содержащую часть нуклеотидной последовательности молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид, который связывается с рецептором zcytor17 человека, содержащий аминокислотные остатки с 38 (Val) по 152 (Leu) SEQ ID NO:2, или ее комплемент; и
(b) обнаружение образовавшихся гибридов зонда нуклеиновой кислоты и либо молекул испытуемой РНК, либо молекул синтезированной нуклеиновой кислоты;
при этом наличие гибридов указывает на присутствие РНК zcytor17lig человека в биологическом образце.

9. Способ обнаружения воспаления у пациента, включающий в себя
получение у пациента тканевого или биологического образца;
мечение полинуклеотида, содержащего по меньшей мере 14 смежных нуклеотидов последовательности SEQ ID NO:1 или комплемента последовательности SEQ ID NO:1, где полинуклеотид содержит полинуклеотид, выбранный из группы, состоящей из
(a) полинуклеотида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:1 от нуклеотида 139 до нуклеотида 483;
(b) полинуклеотида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:1 от нуклеотида 106 до нуклеотида 519;
(c) полинуклеотида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:1 от нуклеотида 97 до нуклеотида 519; и
(d) полинуклеотида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:1 от нуклеотида 28 до нуклеотида 519;
инкубацию тканевого или биологического образца в условиях, обеспечивающих гибридизацию полинуклеотида с комплементарной полинуклеотидной последовательностью;
визуализацию меченого полинуклеотида в тканевом или биологическом образце; и
сравнение уровня гибридизации меченого полинуклеотида в тканевом или биологическом образце, взятом у пациента, с нормальным контрольным тканевым или биологическим образцом;
при этом увеличение гибридизации меченого полинуклеотида в тканевом или биологическом образце пациента по сравнению с нормальным контрольным тканевым или биологическим образцом указывает на наличие воспаления у пациента.

10. Выделенный полипептид, связывающийся с рецептором zcytor17 человека, с одной или несколькими аминокислотными заменами, аминоконцевым метиониновым остатком, линкерным пептидом или аффинной меткой, содержащий последовательность аминокислотных остатков, выбранных из группы
(a) остатков от 38 (Val) до 152 (Leu) полипептида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:2;
(b) остатков от 27 (Leu) до 164 (Thr) полипептида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:2;
(c) остатков от 24 (Ser) до 164 (Thr) полипептида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:2; и
(d) остатков от 1 (Met) до 164 (Thr) полипептида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:2.

11. Выделенный полипептид, который связывается с рецептором zcytor17 человека, состоящий из последовательности аминокислотных остатков, выбранных из группы, состоящей из
(a) остатков от 38 (Val) до 152 (Leu) полипептида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:2;
(b) остатков от 27 (Leu) до 164 (Thr) полипептида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:2;
(c) остатков от 24 (Ser) до 164 (Thr) полипептида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:2; и
(d) остатков от 1 (Met) до 164 (Thr) полипептида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:2.

12. Выделенная молекула полинуклеотида, кодирующая полипептид по любому из пп.1, 2, 3, 10 или 11.

13. Выделенная молекула полинуклеотида по п.12, в которой нуклеотиды выбраны из группы
(a) нуклеотидов от 139 до 483 полинуклеотида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:1;
(b) нуклеотидов от 106 до 519 полинуклеотида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:1;
(c) нуклеотидов от 97 до 519 полинуклеотида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:1; и
(d) нуклеотидов от 28 до 519 полинуклеотида, приведенного в последовательности SEQ ID NO:1;

14. Способ получения антитела против полипептида zcytor17lig, который включает в себя
инокуляцию животного адъювантом и полипептидом из группы
(a) полипептида, состоящего из аминокислот 38-152 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2;
(b) полипептида, состоящего из аминокислот 24-164 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2;
(c) полипептида, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO:2 от аминокислоты 27 до аминокислоты 164; и
выделение указанного антитела из организма животного.

15. Антитело, полученное способом по п.14, которое связывается с полипептидом zcytor17lig человека, состоящим из аминокислот 38-152 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2.

16. Антитело, полученное способом по п.14, которое связывается с полипептидом zcytor17lig человека, состоящим из аминокислот 24-164 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2.

17. Антитело, полученное способом по п.14, которое связывается с полипептидом zcytor17lig человека, состоящим из аминокислот 27-164 аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2.
Приоритет по пунктам:

19.12.2002 – 1(а), 1(с), 1(d), 2-12, 13(a), 13(b), 13(d), 14-17;

25.04.2002 – 1(b), 13(с).

РИСУНКИ