Патент на изобретение №2351019

(54) СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ПОСТМЕДИКАМЕНТОЗНОГО ИММУНОДЕФИЦИТА

(57) Реферат:

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для моделирования иммунодефицита, характерного для онкологических пациентов. Для чего осуществляют вынужденное плавание животных в водопроводной воде при температуре 18°-20°С по 15-20 минут в течение 3 дней ежедневно. Затем на следующий день проводят разовую внутрибрюшинную инъекцию 8-10 мг циклофосфана в расчете на 100 г массы тела животного в 1,0 мл раствора и исследование иммунологических показателей на 5-6 день после инъекции. Способ обеспечивает адекватное воспроизведение модели, наиболее приближенной к реальной ситуации за счет предварительной инициации стресса. 1 табл.

(56) (продолжение):

CLASS=”b560m”с.118-121. АЛЕКСЕЕВА М.Н. «Иммуномодулирующее действие импульсного низкоэнергетического лазерного излучения при вторичных иммунодефицитных состояниях, индуцированных стрессом, автореф. к.м.н. 1995 г. АЛЕШИН В.Б. «Влияние метоклопрамида на выживаемось и морфологию крови белых крыс в условиях двигательно-холодового стресса», Морфогенез тканей и органов в условиях адаптации, 1990 г., с.5-9. YU J et al. “[Effects of oxyfedrine on high blood viscosity and myocardial necrosis induced by epinephrine and ice water stress in rats]” Zhongguo Yao Li Xue Bao. 1993 Jul; 14(4): 364-6.

Известен способ моделирования постмедикаментозного иммунодефицита (Микроволны миллиметрового диапазона в профилактике экспериментального постмедикаментозного иммунодефицита цитостатического генеза. Авт. Н.И.Демешко и др. Актуальные вопросы восстановительной медицины, курортологии и физиотерапии: Матер. Международного конгресса «Здравница – 2006. – М., 2006). Способ прототипа заключается в инициации иммунодефицитного состояния посредством разовой внутрибрюшинной инъекции 0,5 мл цитостатика циклофосфана в дозе 4-8 мг/100 г массы тела животного. Этот способ нельзя признать полностью адекватным реальным клиническим ситуациям, когда у многих онкологических пациентов химиотерапия протекает на фоне другого не менее важного фактора иммунодефицита – стресса.

Способ изобретения гораздо более близок к этим ситуациям. Сущность его заключается в том, что вначале у экспериментальных животных, например крыс, вызывают стресс. Этот процесс осуществляется путем вынужденного плавания животных в водопроводной воде при температуре 18°-20°С по 15-20 минут в течение 3 дней ежедневно. На следующий день производят инъекцию циклофосфана в дозе 8-10 мг/100 г массы тела животного внутрибрюшинно. На 5 день после инъекции проводят прижизненные иммунологические исследования – содержание лейкоцитов и лейкоформула крови, фагоцитоз нейтрофилами по Иванову и Чухловину (К методике определения поглотительной и переваривающей способности нейтрофилов. – Лаб. дело. – 1967. – 10. – 610-613), масс селезенки и тимуса.

Способ осуществляют следующим образом – вначале инициируют модель стресса путем вынужденного плавания животных в питьевой водопроводной воде при температуре 18°-20°С по 15-20 минут в течение 3 дней ежедневно, на следующий день производят разовую внутрибрюшинную инъекцию 8-10 мг циклофосфана в расчете на 100 г массы тела животного в 1,0 мл раствора. На 5-6 день после инъекции исследуют иммунологические показатели.

Для изучения адекватности и тяжести предлагаемой модели изучено 31 крыс-самцов линии Вистар массой тела 200-250 г, разделенные на 4 группы. Первую группу представляли 7 интактных животных. 7 крыс второй группы получали инъекцию циклофосфана в дозе 8-10 мг/100 г массы тела; у 8 животных 3 группы инициировали стресс путем вынужденного плавания животных в питьевой водопроводной воде при температуре 18°-20°С по 15-20 минут в течение 3 дней ежедневно); 4 группа – крысы, у которых сначала инициировался стресс по вышеописанной методике, а затем они получали инъекцию циклофосфана (9).

На 5-6 день после инъекции производилось исследование иммунологических тестов.

Данные таблицы убедительно показывают, что в результате воздействия по способу изобретения развиваются достоверные иммуносупрессорные сдвиги как в отношении масс иммунокомпетентных органов, так и по основным показателя фагоцитоза – ФАЛ (фагоцитарная активность лейкоцитов), ФИЛ (фагоцитарный индекс лейкоцитов) и ПЗФ (показатель завершенности фагоцитоза).

Способ может быть проиллюстрирован следующими примерами.

1. Интактная крыса-самец линии Вистар №1, масса тела 210 г. Дополнительных воздействий не получала. Исследование животного осуществлено одновременно с животными опытной группы (на 5 день после инъекции циклофосфана). Масса селезенки 1200 мг, масса тимуса 243 мг, АОК селезенки 104 Кл/чП, ФАЛ 54%, ФИЛ 1,56 ед., ПЗФ 28,2%.

2. Крыса-самец линии Вистар №23, масса тела 210 г получила инъекцию раствора циклофосфана в вышеуказанной дозе. Исследование животного осуществлено на 5 день после инъекции. Масса селезенки 570 мг, масса тимуса 64 мг, АОК селезенки 136 Кл/чП, ФАЛ 26%, ФИЛ 0,28 ед., ПЗФ 7,14%.

3. Крыса-самец линии Вистар №13, масса тела 230 г, у которой сначала инициировался стресс по вышеописанной методике, а затем она получила инъекцию циклофосфана в вышеуказанной дозе. Исследование животного осуществлено на 5 день после инъекции. Масса селезенки 970 мг, масса тимуса 86 мг, АОК селезенки 120 Кл/чП, ФАЛ 24%, ФИЛ 0,36 ед., ПЗФ 11,1%.

4. Крыса-самец линии Вистар №14, масса тела 250 г, у которой сначала инициировался стресс по вышеописанной методике, а затем она получила инъекцию циклофосфана в вышеуказанной дозе. Исследование животного осуществлено на 5 день после инъекции. Масса селезенки 1130 мг, масса тимуса 140 мг, АОК селезенки 160 Кл/чП, ФАЛ 24%, ФИЛ 0,26 ед., ПЗФ 7,6%.

Формула изобретения

Способ моделирования иммунодефицита, характерного для онкологических пациентов, включающий вынужденное плавание животных в водопроводной воде при температуре 18°-20°С по 15-20 мин в течение 3 дней ежедневно, затем на следующий день разовую внутрибрюшинную инъекцию 8-10 мг циклофосфана в расчете на 100 г массы тела животного в 1,0 мл раствора и исследование иммунологических показателей на 5-6 день после инъекции.