Патент на изобретение №2350318

(54) СПОСОБ ОПТИМИЗАЦИИ АКТИВНОСТИ ПРОТЕИНА С У НОВОРОЖДЕННЫХ ПОРОСЯТ С АНЕМИЕЙ

(57) Реферат:

Изобретение относится к области ветеринарии. Способ заключается в том, что новорожденным поросятам с анемией назначают ферроглюкин по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двоекратно с интервалом 10 дней, фоспренил внутримышечно, троекратно в разных шприцах в разные точки. Первый раз 0,08 мл/кг одновременно с препаратом железа, второй раз в дозе 0,06 мл/кг через пять дней после первой инъекции ферроглюкина, третий раз в дозе 0,05 мл/кг одновременно со второй инъекцией ферроглюкина и гамавит 0,014 мл/кг внутримышечно один раз в день, восемь дней, начиная с первой инъекции ферроглюкина. Способ позволяет оптимизировать активность протеина С у новорожденных поросят с анемией через 3 дня после окончания лечения. 1 табл.

Изобретение относится к биологии и ветеринарии, а именно к гематологии.

Аналогов предлагаемого способа оптимизации активности протеина С у новорожденных поросят с анемией не существует.

В литературе имеются сведения о применении при анемии у поросят ферроглюкина (Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных. Под ред. В.М. Данилевского. М.: Агропромиздат, 1991. – 576 с).

Однако никогда ранее лечебный комплекс, состоящий из ферроглюкина, фоспренила и гамавита не применялся у новорожденных поросят с анемией с целью оптимизации активности протеина С.

Целью изобретения является повышение эффективности коррекции нарушений активности протеина С у новорожденных поросят с анемией.

Протеин С – синтезируемый в гепатоцитах витамин К – зависимый гликопротеин, циркулирующий в крови в виде профермента. Под действием комплекса тромбин-тромбомодулин (или активатора из змеиного яда) протеин С активируется и действует как антикоагулянт, вызывая протеолиз факторов Va и VIIIa в присутствии своего кофактора – протеина S и фосфолипидов. При тромбофилиях у новорожденных поросят, в т.ч. при анемии, нарушения в системе гемостаза могут быть обусловлены дефицитом протеина С.

Сущность заявляемого способа заключается в том, что для оптимизации активности протеина С новорожденным поросятам с анемией назначается ферроглюкин по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двоекратно с интервалом 10 дней, фоспренил внутримышечно, троекратно в разных шприцах в разные точки, первый раз 0,08 мл/кг одновременно с препаратом железа, второй раз в дозе 0,06 мл/кг через пять дней после первой инъекции ферроглюкина, третий раз в дозе 0,05 мл/кг одновременно со второй инъекцией ферроглюкина и гамавит 0,014 мл/кг внутримышечно один раз в день, восемь дней, начиная с первой инъекции ферроглюкина.

Способ позволяет оптимизировать активность протеина С у новорожденных поросят с анемией через 3 дня после окончания лечения, переводя его на уровень, близкий к таковому для здоровых животных. При соблюдении рекомендаций заявляемого способа возможно поддержание в последующем активности протеина С в оптимальном состоянии, что позволит у новорожденных поросят с анемией существенно снизить риск тромботических осложнений, оздоровить стадо, увеличить привесы, снизить падеж и повысить качество и объем получаемой мясной продукции.

Заявляемый способ осуществляется следующим образом.

Для диагностики у новорожденных поросят с анемией нарушения уровня в крови протеина С проводится его оценка по следующей методике (Баркаган З.С., Момот А.П. Основы диагностики нарушений гемостаза. М., 1999. – С.118-120).

Протеин С в образцах исследуемой плазмы активируют специфическим активатором из яда щитомордника – Agkistrodon contortrix. Активированный при этом протеин С вызывает протеолиз факторов Va и VIIIa в дефицитной по протеину С плазме. Последнее приводит к удлинению времени свертывания, по которому оценивается активность протеина С в исследуемом образце. Активность протеина С, выраженную в процентах к норме, находят по предварительно построенной калибровочной кривой.

Используются реактивы: 1. Активатор протеина, лиофилизированный, разводится 3 мл дистиллированной воды. 2. Плазма, дефицитная по протеину С, лиофилизированная, разводится в 1 мл дистиллированной воды. 3. Neothromtin, лиофилизированный – аналог каолин-кефалинового реагента, содержащий взамен каолина эллаговую кислоту и фосфолипиды, разводится 3 мл дистиллированной воды.

Кроме того, требуются мединаловый буфер (рН 7,6), использующийся для разведения образцов исследуемой и стандартной плазмы и раствор хлорида кальция (0,025 М). Для построения калибровочной кривой необходима также стандартная фирменная или контрольная нормальная плазма с известной активностью протеина С или пулированная (взятая не менее чем от 10 здоровых поросят), активность протеина С в которой принимается за 100%.

Материалом для исследования служит цитратная бедная тромбоцитами плазма.

Перед проведением анализа исследуемая плазма разводится мединаловым буфером в 10 раз.

В пробирку (или кювету коагулометра), подогретую до +37°С, вносят предварительно прогретые при той же температуре 0,1 мл разведенной (1:10) плазмы, 0,1 мл плазмы, дефицитной по протеину С, 0,1 мл активатора протеина С и 0,1 мл аналога каолинкефалинового реагента. Смесь выдерживают на водяной бане при +37°С в течение 4 мин. Затем к смеси добавляют 0,1 мл раствора хлорида кальция, предварительно подогретого до 37°С, включают секундомер или таймер коагулометра и регистрируют время свертывания.

Результаты оцениваются по калибровочной кривой.

Построение калибровочной кривой. Приготавливают серию разведений пула контрольной плазмы или стандартной фирменной плазмы при помощи мединалового буфера (см. таблицу).

С каждым из образцов разведенной плазмы определяют время свертывания по указанной выше методике. При построении калибровочной кривой по логарифмической оси ординат откладывают время свертывания в секундах, по логарифмической оси абсцисс – активность протеина С в % в соответствии с указанными в таблице разведениями.

В норме активность протеина С составляет 70-140%.

При установлении снижения активности протеина С новорожденным поросятам необходимо назначать следующий лечебный комплекс.

Сущность заявляемого способа заключается в том, что для оптимизации активности протеина С новорожденным поросятам с анемией назначаются ферроглюкин по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двоекратно с интервалом 10 дней, фоспренил внутримышечно, троекратно в разных шприцах в разные точки, первый раз 0,08 мл/кг одновременно с препаратом железа, второй раз в дозе 0,06 мл/кг через пять дней после первой инъекции ферроглюкина, третий раз в дозе 0,05 мл/кг одновременно со второй инъекцией ферроглюкина и гамавит 0,014 мл/кг внутримышечно один раз в день, восемь дней, начиная с первой инъекции ферроглюкина.

Пример 1. У новорожденного поросенка с анемией №10 при обследовании было выявлено снижение активности протеина С – 56%. Так, количество гемоглобина у него составляло 82,0 г/л, эритроцитов 4,05×10¹²/л, сидероцитов 1,0% при уровне железа в сыворотке 12,8 мкмоль/л с повышением общей железосвязывающей способности сыворотки крови до 67,3 мкмоль/л.

Поросенку был назначен ферроглюкин по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двоекратно с интервалом 10 дней. Больной поросенок находился под динамическим наблюдением в процессе всего лечения.

Через 3 дня после окончания лечения у поросенка улучшились показатели красной крови. Так, количество гемоглобина у него возросло до 112,0 г/л, эритроцитов – до 4,90×10¹²/л, сидероцитов до 7,0% при увеличении железа в сыворотке до 19,6 мкмоль/л и снижении общей железосвязывающей способности сыворотки крови до 40,2 мкмоль/л.

Было получено увеличение уровня активности протеина С (68%), не достигнувшее нижней границы нормы и в последующем оставшееся на достигнутом уровне.

Пример 2. У новорожденного поросенка с анемией №11 при обследовании было выявлено снижение активности протеина С – 59%.

У данного поросенка отмечалось нарушение эритропоэза с признаками снижения уровня содержания железа в его организме, которое сопровождалось изменением показателей крови. Так, количество гемоглобина у него составляло 81,0 г/л, эритроцитов 4,10×10¹²/л, сидероцитов 1,2% при уровне железа в сыворотке 12,6 мкмоль/л с повышением общей железосвязывающей способности сыворотки крови до 68,9 мкмоль/л.

Животному был назначен ферроглюкин по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двоекратно с интервалом 10 дней, фоспренил внутримышечно, троекратно в разных шприцах в разные точки, первый раз 0,08 мл/кг одновременно с препаратом железа, второй раз в дозе 0,06 мл/кг через пять дней после первой инъекции ферроглюкина, третий раз в дозе 0,05 мл/кг одновременно со второй инъекцией ферроглюкина и гамавит 0,014 мл/кг внутримышечно один раз в день, восемь дней, начиная с первой инъекции ферроглюкина.

Через 3 дня после окончания лечения у поросенка нормализовалась красная кровь. Так, количество гемоглобина у него возросло до 120,6 г/л, эритроцитов – до 5,33×10¹²/л, сидероцитов до 8,4% при увеличении железа в сыворотке до 28,4 мкмоль/л и снижении общей железосвязывающей способности сыворотки крови до 33,6 мкмоль/л.

Была достигнута полная нормализация активности протеина С (110%), в последующем не испытавшая отрицательной динамики.

Использование предлагаемого способа оптимизации активности протеина С в ветеринарии и биологии поможет избежать многих сосудистых осложнений у новорожденных поросят с анемией, оздоровить стадо, снизить падеж, увеличить привесы, повысить качество и объем получаемой мясной продукции и получать в последующем от этих поросят здоровое потомство.

Формула изобретения

Способ оптимизации активности протеина С у новорожденных поросят с анемией путем применения ферроглюкина по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двоекратно с интервалом 10 дней, фоспренила внутримышечно, троекратно в разных шприцах в разные точки, первый раз 0,08 мл/кг одновременно с препаратом железа, второй раз в дозе 0,06 мл/кг через пять дней после первой инъекции ферроглюкина, третий раз в дозе 0,05 мл/кг одновременно со второй инъекцией ферроглюкина и гамавита 0,014 мл/кг внутримышечно один раз в день, восемь дней, начиная с первой инъекции ферроглюкина.